[發(fā)明專利]食品中蛋白質(zhì)含量的測定方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010237927.9
• 申請(qǐng)日: 2010-07-27
• 公開（公告）號(hào): CN102338749A
• 公開（公告）日: 2012-02-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭景鵬;沙飛翔;丁國才
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海海帝園藝有限公司
• 主分類號(hào): G01N21/79
• 分類號(hào): G01N21/79
• 代理公司: 上海漢聲知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31236
• 代理人: 郭國中

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食品檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種食品中蛋白質(zhì)含量的測定方法。

背景技術(shù)

蛋白質(zhì)是構(gòu)成生物體細(xì)胞的重要成分，食物中的蛋白質(zhì)是人體中氮的唯一來源，具有糖類和脂肪等生物大分子不可替代的作用。蛋白質(zhì)與生物體中的營養(yǎng)代謝、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、酶、激素、病毒以及免疫、物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和遺傳等密切相關(guān)，其分離與定性或定量測定在食品檢驗(yàn)中具有重要意義。食品中測定蛋白質(zhì)含量的方法有很多種，一般可分為間接方法和直接方法，間接方法是通過測定樣品中蛋白質(zhì)的含氮量進(jìn)而推算蛋白質(zhì)含量；直接方法則根據(jù)蛋白質(zhì)的物理或化學(xué)性質(zhì)直接測定蛋白質(zhì)的含量。凱氏定氮法作為食品類產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量測定的法定方法，也是蛋白質(zhì)測定中最常用的方法，以其測定結(jié)果穩(wěn)定、準(zhǔn)確，在國內(nèi)外得到了廣泛地采用，但此法操作繁瑣，試劑消耗量大，消化時(shí)排放的SO₂對(duì)人體健康造成直接危害，而且費(fèi)時(shí)、費(fèi)電、費(fèi)水；其他諸如分光光度法和滴定法等方法也都存在操作繁瑣的缺點(diǎn)；而利用凱氏定氮儀進(jìn)行蛋白質(zhì)測定成本過高，且由于儀器本身昂貴，難以推廣使用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中食品中蛋白質(zhì)含量的測定方法操作復(fù)雜繁瑣，對(duì)操作人員危害性大，費(fèi)用過高的技術(shù)問題。

本發(fā)明的食品中蛋白質(zhì)含量的測定方法包括如下步驟：

步驟一，用雙氧水與濃硫酸組成的消化液消化樣品，得混合溶液；

步驟二，取混合溶液，以甲基紅作為指示劑，加入NaOH的水溶液；

步驟三，加入甲醛溶液振搖，之后加入酚酞指示劑，用濃度為C的NaOH的水溶液滴定至微紅色半分鐘內(nèi)不退色，記錄消耗的NaOH的水溶液的體積V，利用公式計(jì)算蛋白質(zhì)的含量，所述公式為：

蛋白質(zhì)含量＝CV×14.01×6.25×100％/m，其中，m為步驟二中所取混合溶液中含有的樣品質(zhì)量。

優(yōu)選地，所述雙氧水的濃度為8.8mol/L。

優(yōu)選地，所述消化液中雙氧水與濃硫酸的體積比為4∶1。

優(yōu)選地，所述消化包括如下步驟：取樣品，加入濃硫酸，加熱，滴加消化液，加熱使溶液由黑色變?yōu)闊o色，加熱，冷卻，加蒸餾水定容。

優(yōu)選地，所述加入NaOH的水溶液中和消化液中的酸具體為：先使用2.5mol/L的NaOH的水溶液中和硫酸，接近終點(diǎn)時(shí)改用0.1mol/L的NaOH的水溶液滴定至紅色消失變成黃色。

優(yōu)選地，所述甲醛溶液的濃度為6.5mol/L。

優(yōu)選地，所述NaOH的水溶液的濃度為0.1mol/L。

本發(fā)明具有如下的有益效果：

(1)本發(fā)明的方法使用的消化液能夠加快樣品的消化速度，縮短消化時(shí)間，使得分析速度加快；

(2)本發(fā)明的方法采用甲醛法進(jìn)行滴定，簡化了操作；

(3)本發(fā)明的方法消除了空氣污染，減少了對(duì)操作人員的危害性，且節(jié)約了試劑和水電；

(4)本發(fā)明的方法適于進(jìn)行大批量樣品的蛋白質(zhì)含量測定。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。應(yīng)理解，以下實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而非用于限定本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例

本實(shí)施例中使用的消化裝置為：用100ml梨形三頸瓶代替凱氏燒瓶，上面分別連接滴液漏斗、真空調(diào)節(jié)管和彎管，彎管用導(dǎo)管與內(nèi)盛稀堿溶液的抽濾瓶和真空泵相連，將消化所產(chǎn)生的煙氣用堿液吸收。

實(shí)施例中使用的試劑為：

濃硫酸購于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；

8.8mol/L過氧化氫購于開封開化集團(tuán)有限公司；

氫氧化鈉購于淄博市化學(xué)試劑廠；

甲醛購于淄博市化學(xué)試劑廠；

六次甲基四胺購于中國藥品生物制品檢定所；

酚酞指示劑購于上海市試劑三廠；

甲基紅指示劑購于上海市試劑三廠。

1、消化樣品，得混合溶液

稱取0.5g樣品置于消化裝置中，加濃硫酸5ml；打開真空泵，用螺旋夾調(diào)節(jié)三頸瓶中的壓力，使產(chǎn)生的煙氣被堿液完全吸收，三頸瓶置電爐上加熱2～5min，然后用滴液漏斗緩慢滴加15ml消化液，所述消化液是將濃度為8.8mol/L的雙氧水與濃硫酸按體積比為4∶1的比例進(jìn)行混合而得；加完后繼續(xù)加熱3min，樣品由黑色變?yōu)闊o色，再加熱2min，除去H₂O₂；冷卻后緩緩加入蒸餾水20ml，搖勻，定量轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度。