[發明專利]一種新型螺旋藻源降血壓肽及其制備方法

無效

• 申請號: 201010237795.X
• 申請日: 2010-07-27
• 公開（公告）號: CN101906135A
• 公開（公告）日: 2010-12-08
• 發明（設計）人: 魯軍;任迪峰;田之倉優;王建中
• 申請（專利權）人: 魯軍
• 主分類號: C07K5/083
• 分類號: C07K5/083;C07K1/20;C07K1/16;C12P21/06;A23L1/29;A23L1/305;A61K38/06;A61P9/12
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技術領域

本發明涉及一種新型螺旋藻源降血壓肽的制備、純化方法，可應用于營養產品、保健性功能食品及藥品，屬食品生物技術領域。

背景技術

生物活性肽是指對生物機體的生命活動有益或具有生理作用的肽類化合物。人類攝取的蛋白質經過消化道的多種酶水解后，不是僅以氨基酸的形式吸收，更多的是以低肽的形式被直接吸收，而且二肽和三肽的吸收速度比同一組成的氨基酸要快。因此，生物活性肽的生物學意義主要體現在其吸收機制優于氨基酸和具有氨基酸不可比擬的生理功能兩個方面。

近些年來，大量的科學證據表明天然食物資源是分離、獲取生物活性肽的寶貴來源，采用酶法將天然蛋白質水解后，大分子的蛋白質酶切成小分子的肽段，不但利于消化吸收，而且可以獲得多種生物活性肽。國內外對食源低聚肽的研究結果表明，經酶解后得到食用肽類制品具有易吸收、抗氧化、抗疲勞、降血脂、降血壓、增強免疫力等一系列生理功能，同時研究發現，食源性肽的生物活性和其原料來源、分子量大小、氨基酸序列與組成有密切關系。迄今為止，國內外研究者相繼從牛乳、奶酪、海洋魚類、小麥、玉米、大豆、大米等天然食物來源中獲取具有不同生理活性的低聚肽。食源性肽類具有原料來源廣泛、可規模化生產、產品功能廣泛、價格便宜等優點，已成為國際上極具發展潛力的功能性原料。

目前全世界有將近十億人口患高血壓，高血壓正成為嚴重威脅人類健康的疾病之一。雖然卡托普利(Captopril)等人工合成血管緊張素轉化酶(ACE)抑制劑具有顯著的降血壓效果，然而這類降血壓藥物屬酶的競爭性抑制劑，它們對酶活性部位的抑制是可逆的，藥物作用時間不長，停藥后會使血壓反彈；而且，這類藥物被吸收和排泄的速度較快，經腎臟排出易損害腎功能，同時也會引起諸多的副作用，例如咳嗽、過敏、皮疹、水腫、心律失常和腎臟損害等，所以研發更為安全的天然來源ACE抑制劑十分必要。ACE抑制肽的研究在國外從上世紀六、七十年代開始，而在國內則從九十年代后期開始才逐有報道。國內外研究者已從不同的天然食物來源中分離出ACE抑制肽，如蝮蛇、牛奶、金槍魚、酪蛋白等，不同來源的ACE抑制肽在氨基酸數目、序列和活性上均存在較大差異。

螺旋藻(Spirulina?platensis)為藍藻屬的一個種，富含蛋白質、不飽和脂肪酸、維生素、礦物質和酶類等多種營養成分，具有護肝、抗氧化、防病毒、抗癌和增強免疫等生理功能。螺旋藻蛋白質占螺旋藻干重的55％～70％，相對于一般概念上營養豐富的雞蛋(蛋白質含量16％～18％)、大豆(33％～35％)、魚(17％～25％)等，螺旋藻是迄今發現的蛋白質含量最高的物種之一。螺旋藻蛋白質包含18種氨基酸，具有人體必需的全部8種氨基酸，并且在組成配比上最接近于世界糧農組織(FAO)規定的標準，是獲得天然活性肽的潛在寶貴資源。目前，螺旋藻主要以干粉形式直接應用食品行業，由于其溶解性質的局限性，不利于人體吸收，使其應用受到一定的限制。本研究采用蛋白酶解和色譜分離技術，獲取一種高活性的ACE抑制肽，成果可廣泛應用于保健性功能食品及藥品領域，具有巨大的實用價值和經濟效益。

發明內容

本發明的目的是克服大分子蛋白質吸收性差以及目前活性肽品種混雜不清、活性和純度不高方面的不足，獲得具有高體內降血壓作用的螺旋藻源降血壓肽。

為實現上述目的，本發明采用超低溫凍融與超聲波破碎相結合的方法，將螺旋藻粉懸浮水中(料液比1∶5～1∶10)，懸浮液用液氮-水浴25～30℃法凍融2～5次。采用超聲波破碎3～5min，以4000g～8000g的速率離心20～40min，得到螺旋藻蛋白質溶液。然后采用Alcalase?2.4L酶水解所述螺旋藻蛋白質溶液，酶解pH值7～9，酶與底物的比例為0.02～0.05(v/v)，混合均勻后，酶解溫度40℃～60℃，酶解時間6～10小時。酶解結束后混合液在沸水浴中加熱8～15min滅酶，然后調節pH值至7.0。所獲產物經不同分子量大小的MWCO?10000D、5000D、3000D超濾膜過濾，獲得具有不同分子量多肽的濾液。