[發(fā)明專利]一種新型螺旋藻源降血壓肽及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010237795.X
• 申請(qǐng)日: 2010-07-27
• 公開（公告）號(hào): CN101906135A
• 公開（公告）日: 2010-12-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 魯軍;任迪峰;田之倉(cāng)優(yōu);王建中
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 魯軍
• 主分類號(hào): C07K5/083
• 分類號(hào): C07K5/083;C07K1/20;C07K1/16;C12P21/06;A23L1/29;A23L1/305;A61K38/06;A61P9/12
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• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種具有高體內(nèi)活性的降血壓肽，所述降血壓肽的序列為異亮氨酸-谷氨酰胺-脯氨酸(Ile-Gln-Pro，IQP)。

2.一種制備含有如權(quán)利要求1所述序列降血壓肽的螺旋藻低聚肽的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

1)將螺旋藻粉懸浮水中(料液比1∶5～1∶10)，懸浮液用液氮-水浴25～30℃法凍融2～5次。采用超聲波破碎3～5min，以4000g～8000g的速率離心20～40min，得到螺旋藻蛋白質(zhì)溶液。

2)采用Alcalase?2.4L酶水解所述螺旋藻蛋白質(zhì)溶液，酶解pH值7～9，酶與底物的比例為0.02～0.05(v/v)，混合均勻后，酶解溫度40℃～60℃，酶解時(shí)間6～10小時(shí)。酶解結(jié)束后混合液在沸水浴中加熱8～15min滅酶，然后調(diào)節(jié)pH值至7.0。

3)采用截留分子量為10000D、5000D和3000D的超濾膜對(duì)所述酶解后混合液進(jìn)行過濾，經(jīng)噴霧干燥或真空冷凍干燥，從而得到不同分子量范圍的螺旋藻低聚肽粉。

3.一種制備如權(quán)利要求1所述序列降血壓肽的純化方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

1)檢測(cè)如權(quán)利要求2所述不同分子量范圍的螺旋藻低聚肽的ACE抑制活性，活性最高的螺旋藻低聚肽經(jīng)Superdex?Peptide?HR?10/30柱過濾分離，采用10mM?Tris-HCl(pH?7.0，包含150mM?NaCl)洗脫，收集并檢測(cè)ACE抑制活性。

2)具有最高活性的所述收集液相繼經(jīng)反相高效液相色譜進(jìn)行2次不同梯度的純化，其中流動(dòng)相A：0.1％三氟乙酸(TFA)溶解于1％乙腈(ACN)/水(v/v)；流動(dòng)相B：0.1％TFA溶解于90％ACN/Water(v/v)。

4.如權(quán)利要求1所述序列降血壓肽的制備方法，其特征在于所述降血壓肽可以從其他蛋白來(lái)源酶解制備，或利用肽自動(dòng)合成儀通過合成方法人工合成。

5.如權(quán)利要求1所述序列降血壓肽作為產(chǎn)品或添加成分在具有降血壓作用的保健功能性食品或藥劑中的應(yīng)用。

6.如權(quán)利要求2所述螺旋藻低聚肽作為產(chǎn)品或添加成分在具有降血壓作用的保健功能性食品或藥劑中的應(yīng)用。