[發明專利]滑菇多糖提取物的制備方法

有效

• 申請號: 201010234664.6
• 申請日: 2010-07-22
• 公開（公告）號: CN101863999A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發明（設計）人: 李海平
• 申請（專利權）人: 天津商業大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C12S3/02
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 肖莉麗

技術領域

本發明涉及一種滑菇多糖提取物的制備方法。

背景技術

滑菇(Pholiota?nameko)，又名真珠菇、滑子蘑，擔子菌綱，散菌目，蓋球菇科，磷傘屬。滑菇因菌蓋表面有粘液而得名，滑菇口味鮮美，營養價值高，在世界上享有較高聲譽。滑菇含有對腫瘤起抑制作用的多糖物質，并可預防葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎桿菌、結核桿菌的感染。據日本學者研究認為，滑菇提取物中的多糖類有效成分，具有很高的抗癌活性和增強細胞的免疫功能，有降低血糖、調整血壓、改善骨質增生等多種作用。滑菇中多糖的含量很高，其中可溶性碳水化合物29％，多糖含量在8％以上，而且比較穩定。松本保久研究發現熱水提取的滑菇多糖提取物對小白鼠肉瘤180的抑制率達86.5％。此外，滑菇子實體的沸水提取物對小鼠S180的抑制率為60％，氫氧化鈉溶液提取物對小白鼠肉瘤S180的抑制率達90％，對艾氏腹水癌的抑制率達70％。宋玉光等的研究滑菇多糖提取液能調節正常或荷瘤小鼠的機體免疫功能。

天津商業大學課題小組研究了滑菇多糖對核糖核酸酶A(RNase?A)的抑制動力學作用。研究結果顯示滑菇多糖對核糖核酸酶A的抑制動力學作用，結果表明滑菇多糖能有效地抑制RNase?A的活性，提示其在抗腫瘤以及抗炎方面的潛力。

天津商業大學課題小組研究了滑菇多糖的抗炎活性，通過建立各種急性和慢性炎癥動物模型，包括二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗，大鼠棉球肉芽腫實驗；角叉菜膠致大鼠足跖腫脹實驗；甲醛致大鼠足跖腫脹實驗和急慢性潰瘍實驗對滑菇多糖作出抗炎活性評價。實驗結果顯示滑菇多糖對慢性和急性炎癥均有很好的作用，而且沒有副作用。

天津商業大學課題小組利用化學發光法檢測滑菇多糖對超氧陰離子自由基(O·^-₂)、羥自由基(OH·)、脂自由基(R·)、抗氧化；單線態氧(¹O₂)的清除能力，同時檢測了滑菇多糖對小鼠肝勻漿以及肝線粒體丙二醛(MDA)氧化抑制作用。實驗結果表明，滑菇多糖四種活性氧自由基均具有較好的清除作用，同時對肝勻漿以及肝線粒體中丙二醛(MDA)氧化具有很強的抑制作用。滑菇多糖具有很強的清除自由基的能力，具有很好的體外抗氧化作用。

天津商業大學課題小組給高脂血癥大鼠喂食滑菇多糖，與對照組相比，滑菇多糖能明顯降低血清低密度脂蛋白，甘油三酯和總脂的水平，同時提高血清高密度脂蛋白的水平；也能顯著降低高脂血癥大鼠肝臟總脂、總膽固醇、甘油三酯和總脂的水平；而且能顯著提高肝臟抗氧化酶(超氧化物歧化酶、過氧化物酶和谷胱甘肽過氧化酶)的水平和降低丙二醛的含量，抑制了脂肪的過氧化。滑菇多糖具有很好的降血脂作用。

滑菇在我國廣泛種植，目前滑菇多糖提取物都是實驗室用于實驗的少量提取，提取率低，成本高，不適合大規模生產，還沒有得到產業上的應用。

發明內容

本發明是為了克服現有技術中的不足之處，提供一種能規模化生產，工藝簡單、成本低的滑菇多糖提取物的制備方法。

本發明通過下述技術方案實現：

一種滑菇多糖提取物的制備方法，其特征在于，包括下述步驟：

(1)將滑菇干制品用熱水浸泡，充分溶脹；之后，打漿得到滑菇漿液；

(2)在上述滑菇漿液中加入胰蛋白酶在37℃下保溫1小時；然后再加入纖維素酶在55℃下保溫2小時；然后升溫到80℃下保溫3小時，之后，收集第一次提取液和沉淀；將第一次沉淀加等量水用超聲波在功率400W下超聲提取30分鐘，之后收集第二次提取液和殘渣；清洗殘渣，濾取清洗殘渣的液體得到第三次提取液；合并三次提取液；將合并后的提取液減壓濃縮至總體積的1/6-1/10；其中，胰蛋白酶的活力為2500U/mg，添加量為滑菇漿液重量的0.012％；纖維素酶的活力為1000U/mg，添加量為滑菇漿液重量的0.008％；

(3)將減壓濃縮后的提取液中加入無水乙醇，使得溶液中乙醇體積百分比濃度為60-80％，醇沉得到粗滑菇多糖；

(4)將步驟(3)得到的粗滑菇多糖進一步純化得到滑菇多糖提取物。

其中，粗滑菇多糖的純化可以采用下述三種方法：

所述步驟(4)中的純化方法包括下述步驟：

(一)將粗滑菇多糖溶于水，加熱到60℃并攪拌到溶解，再加入質量百分比濃度為40-50％的三氯乙酸，使得三氯乙酸最終的質量百分比濃度達到4-6％，4℃靜置24小時后離心去除沉淀，取上清液；

(二)在上清液中加入無水乙醇，使得溶液中乙醇的體積百分比濃度為75％，醇沉得到滑菇多糖；