[發明專利]滑菇多糖提取物的制備方法

有效

• 申請號: 201010234664.6
• 申請日: 2010-07-22
• 公開（公告）號: CN101863999A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發明（設計）人: 李海平
• 申請（專利權）人: 天津商業大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C12S3/02
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 肖莉麗

1.一種滑菇多糖提取物的制備方法，其特征在于，包括下述步驟：

(1)將滑菇干制品用熱水浸泡，充分溶脹；之后，打漿得到滑菇漿液；

(2)在上述滑菇漿液中加入胰蛋白酶在37℃下保溫1小時；然后再加入纖維素酶在55℃下保溫2小時；然后升溫到80℃下保溫3小時，之后，收集第一次提取液和沉淀；將第一次沉淀加等量水用超聲波在功率400W下超聲提取30分鐘，之后收集第二次提取液和殘渣；清洗殘渣，濾取清洗殘渣的液體得到第三次提取液；合并三次提取液；將合并后的提取液減壓濃縮至總體積的1/6-1/10；其中，胰蛋白酶的活力為2500U/mg，添加量為滑菇漿液重量的0.012％；纖維素酶的活力為1000U/mg，添加量為滑菇漿液重量的0.008％；

(3)將減壓濃縮后的提取液中加入無水乙醇，使得溶液中乙醇體積百分比濃度為60-80％，醇沉得到粗滑菇多糖；

(4)將步驟(3)得到的粗滑菇多糖進一步純化得到滑菇多糖提取物。

2.根據權利要求1所述的滑菇多糖提取物的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中的純化方法包括下述步驟：

(一)將粗滑菇多糖溶于水，加熱到60℃并攪拌到溶解，再加入質量百分比濃度為40-50％的三氯乙酸，使得三氯乙酸最終的質量百分比濃度達到4-6％，4℃靜置24小時后離心去除沉淀，取上清液；

(二)在上清液中加入無水乙醇，使得溶液中乙醇的體積百分比濃度為75％，醇沉得到滑菇多糖；

(三)將步驟(二)得到的滑菇多糖沉淀再加入無水乙醇溶解，使得溶液中乙醇的體積百分比濃度為75％，醇沉得到滑菇多糖；將得到的滑菇多糖沉淀再溶于水，如此反復，逐步提高沉淀滑菇多糖所需要的溶液中的乙醇含量，最后將沉淀出的滑菇多糖冷凍干燥，即得到滑菇多糖提取物。

3.根據權利要求1所述的滑菇多糖提取物的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中的純化方法包括下述步驟：

(一)將粗滑菇多糖重新溶解在水中，加熱到60℃并攪拌到溶解，加入質量百分比濃度為40-50％的三氯乙酸溶液，使得三氯乙酸最終的質量百分比濃度達到4-6％，4℃靜置24小時后離心去除沉淀取上清液；

(二)在上述上清液中加入無水乙醇，使得溶液中乙醇的體積百分比濃度為75％，醇沉得到滑菇多糖；得到的滑菇多糖沉淀再溶解于水中，加熱到60℃并攪拌到溶解得到滑菇多糖溶液；

(三)上述滑菇多糖溶液上大孔吸附樹脂，用乙醇洗脫，收集洗脫液；將洗脫液濃縮到原液體積的1/4-1/8；在洗脫液的濃縮液中加無水乙醇，醇沉得到滑菇多糖；將醇沉出的滑菇多糖冷凍干燥，即得滑菇多糖提取物。

4.根據權利要求1所述的滑菇多糖提取物的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中的純化方法包括下述步驟：

(一)將粗滑菇多糖重新溶解在水中，加熱到60℃并攪拌到溶解，得到粗滑菇多糖溶液；

(二)將粗滑菇多糖溶液直接上大孔吸附樹脂，用乙醇洗脫，收集洗脫液；將洗脫液濃縮到原液體積的1/4-1/8；將洗脫液的濃縮液中加無水乙醇使得溶液中乙醇體積百分比濃度為75％，醇沉得到滑菇多糖；最后將沉淀出的滑菇多糖冷凍干燥，即得滑菇多糖提取物。

5.根據權利要求3或4所述的滑菇多糖提取物的制備方法，其特征在于，所述大孔吸附樹脂是纖維素型大孔吸附樹脂或聚苯乙烯型大孔吸附樹脂。

6.根據權利要求1所述的滑菇多糖提取物的制備方法，其特征在于，步驟(2)中超聲提取30分鐘時，每超聲工作5秒，間歇1秒。