[發明專利]白細胞介素3衍生片段的融合蛋白及其用途

有效

• 申請號: 201010234598.2
• 申請日: 2010-07-23
• 公開（公告）號: CN102336835A
• 公開（公告）日: 2012-02-01
• 發明（設計）人: 盧圣棟;肖衛純;王湛;盧麗;陳偉京;李濤;王欣;路金芝
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院基礎醫學研究所
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12P21/02;A61K48/00;A61K47/48;A61P35/02;A61K47/42
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

技術領域

本發明涉及白細胞介素3衍生片段的融合蛋白及其用途。更具體而言，本發明涉及一種包含突變改型的白細胞介素3衍生片段的融合蛋白，其選自：(1)IL2_mIL3_m2SON3，(2)IL2_mIL3_m3SON3或(3)IL2_mIL3_m1SON3，其中IL2_m是IL2的突變改型的衍生片段，IL3_m2是IL3的突變改型的衍生片段2，IL3_m3是IL3的突變改型的衍生片段3，IL3_m1是IL3的突變改型的衍生片段1，SON3是DNA結合蛋白SON的衍生片段且富含堿性氨基酸。特別地，本發明還涉及上述融合蛋白的用途、編碼核苷酸序列、包含所述編碼核苷酸序列的表達重組體、包含所述重組體的工程細胞或工程菌、生產所述融合蛋白的方法、所述融合蛋白的復合物及所述復合物的用途。

背景技術

攻克癌癥一直是醫學界面臨的重大挑戰。傳統的化療與放療有兩個重大缺陷：一個是藥物嚴重的毒副作用，第二個是治療后容易復發。為了克服這兩個缺陷，首先需要靶向殺滅腫瘤細胞。腫瘤靶向治療是利用特異性的載體，將藥物或其他殺傷腫瘤細胞的活性物質選擇性地運送到腫瘤部位，把藥物的殺傷作用或治療效應盡量限定在特定的靶細胞、組織或器官內，而不傷害正常細胞、組織或器官，從而提高療效、減少毒副作用，具有高特異性、高效性以及低毒副作用的特點。

靶向治療的主要特點是特異性結合，本發明根據一般白血病細胞的表面富集的受體設計特異性結合的配體避免對正常細胞的損傷。IL2R在一般白血病細胞表面高表達并富集，在正常的血液細胞表面低表達，甚至不表達。因此，IL2R的配體IL2可以成為特異性結合白血病細胞的“靶向頭”。

其次需要靶向殺滅腫瘤干細胞。腫瘤生長是腫瘤組織中極少見的腫瘤干細胞增殖的結果。腫瘤干細胞具有自我增殖和自我分化能力，在啟動腫瘤形成和生長中起著決定性的作用，對一般的化療與放療不敏感，是腫瘤復發的“源泉”。如要減少腫瘤復發，相對徹底地治愈惡性腫瘤，則必須清除腫瘤干細胞。目前，腫瘤干細胞已經在多種腫瘤組織中得到了驗證。如白血病、乳腺癌、腦癌、前列腺腫瘤、室管膜瘤、皮膚癌等；以腫瘤干細胞為靶標治療腫瘤是治愈腫瘤的新希望。

急性髓性白血病中的腫瘤干細胞又稱之為白血病干細胞。白血病干細胞具有自我更新能力和分化能力，并且基本處于休眠狀態。白血病干細胞在細胞生物學方面不同于較成熟的白血病幼稚細胞，它對常規的化療無反應。這可能是白血病多藥耐藥、早期復發的主要原因。因此，特異地針對白血病干細胞的治療策略，將為AML患者提供更有效的治療。

白血病干細胞表面包含有區別于正常造血干細胞的特異性表面標志CD123(IL-3Rα)。以IL-3Ra為靶點為選擇性清除白血病干細胞的有前途的治療策略。IL3R的配體IL3可以成為特異性結合白血病干細胞的“靶向頭”。

通過靶向白血病細胞和白血病干細胞，將藥物的毒性作用限制于這兩種細胞，可以避免對正常細胞的傷害。

綠膿桿菌毒素PE作為人體異源的毒素蛋白質不應直接應用于導入人體血循環。這是由于其產生的細胞殺傷作用不具備腫瘤細胞特異性，對人體可造成嚴重的毒副作用；同時其作為人體異源蛋白還具有很強的免疫原性，不僅可導致抗體的迅速生成使之被中和失活，并可引起人體發生嚴重的過敏反應，甚至休克與死亡。因此需要把毒素導入血循環的方式由毒素蛋白質改為相應的毒素的編碼基因，從而最大限度地避免毒素蛋白質導入人體血循環時所造成的嚴重的毒副作用問題與免疫原性問題。

因此，存在對特異性靶向白血病細胞核白血病干細胞并特異性殺傷白血病細胞和白血病干細胞的藥物需求。

發明內容

因此，本發明的技術目的在于開發一種能特異性靶向殺傷和/或清除白血病細胞與白血病干細胞的藥物。