[發(fā)明專利]白細胞介素3衍生片段的融合蛋白及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010234598.2
• 申請日: 2010-07-23
• 公開（公告）號: CN102336835A
• 公開（公告）日: 2012-02-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 盧圣棟;肖衛(wèi)純;王湛;盧麗;陳偉京;李濤;王欣;路金芝
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學科學院基礎(chǔ)醫(yī)學研究所
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12P21/02;A61K48/00;A61K47/48;A61P35/02;A61K47/42
• 代理公司: 北京戈程知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

1.一種包含突變改型的白細胞介素3衍生片段的融合蛋白，其選自：1)IL2_mIL3_m2SON3，2)IL2_mIL3_m3SON3或3)IL2_mIL3_m1SON3，其中IL2_m是IL2的突變改型的衍生片段，其相應(yīng)的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.9所示，其中IL3_m2是IL3的突變改型的衍生片段2，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.10所示，IL3_m3是IL3的突變改型的衍生片段3，其相應(yīng)的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.11所示，IL3_m1是IL3的突變改型的衍生片段1，其相應(yīng)的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.12，其中SON3是DNA結(jié)合蛋白SON的衍生片段且富含堿性氨基酸，其相應(yīng)的氨基酸序列如SEQID?NO.13所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包含突變改型的白細胞介素3衍生片段的融合蛋白作為非病毒載體的用途，該用途是指所述融合蛋白利用其自身堿性氨基酸所帶的正電荷與攜帶負電荷的核苷酸序列相互結(jié)合并利用融合蛋白中與細胞表面特異性受體結(jié)合的成分將所述核苷酸序列轉(zhuǎn)運至特定的靶細胞，從而起到靶向性運輸工具的作用。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包含突變改型的白細胞介素3衍生片段的融合蛋白的編碼核苷酸序列，其特征在于編碼所述IL2_m、IL3_m2、SON3的核苷酸序列在不改變所述融合蛋白氨基酸序列的情況下，根據(jù)使用的宿主細胞的密碼子偏愛性相應(yīng)調(diào)整所述核苷酸序列的密碼子，優(yōu)選地，IL3_m2的DNA編碼序列如SEQ?ID?NO.2所示，IL3_m3的DNA編碼序列如SEQ?ID?NO.3所示，IL3_m1的DNA編碼序列如SEQID?NO.4所示，IL2_m的DNA編碼序列如SEQ?ID?NO.1所示，SON3的DNA編碼序列如SEQ?ID?NO.5所示。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包含突變改型的白細胞介素3衍生片段的融合蛋白，其特征在于IL2_mIL3_m2SON3的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.14所示，和/或IL2_mIL3_m3SON3的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.15所示，和/或IL2_mIL3_m1SON3的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.16所示，優(yōu)選地，IL2_mIL3_m2SON3的DNA編碼序列如SEQID?NO.6所示，和/或IL2_mIL3_m3SON3的DNA編碼序列如SEQ?ID?NO.7所示，和/或IL2_mIL3_m1SON3的DNA編碼序列如SEQ?ID?NO.8所示。

5.將根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的包含突變改型的白細胞介素3衍生片段的融合蛋白的編碼核苷酸序列或根據(jù)權(quán)利要求3所述的編碼核苷酸序列重組連接到原核或真核表達載體后獲得的表達重組體，優(yōu)選地，所述表達重組體是由原核質(zhì)粒載體pCW111構(gòu)建而成的表達型重組體pCW-IL2_mIL3_m2SON3、pCW-IL2_mIL3_m3SON3或pCW-IL2_mIL3_m1SON3。

6.包含根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的包含突變改型的白細胞介素3衍生片段的融合蛋白的編碼核苷酸序列或根據(jù)權(quán)利要求3所述的編碼核苷酸序列或根據(jù)權(quán)利要求5所述的表達重組體的工程細胞或工程菌，其中所述細胞為適用于表達重組體表達的植物細胞、昆蟲細胞或哺乳動物細胞，所述菌為適用于表達重組體表達的細菌、放線菌、霉菌或酵母菌，優(yōu)選地，所述菌為細菌，更優(yōu)選地，所述菌為大腸桿菌，最優(yōu)選地，所述菌為大腸桿菌DH5α。