[發明專利]一種5’-核苷酸二鈉的制備方法

有效

• 申請號: 201010231924.4
• 申請日: 2010-07-16
• 公開（公告）號: CN101891772A
• 公開（公告）日: 2010-11-24
• 發明（設計）人: 任洪發;王海波;林曉;魯立;王曉明;歐仁樹;黃桂基;寧異真
• 申請（專利權）人: 廣東肇慶星湖生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07H1/00
• 分類號: C07H1/00;C07H1/02;C07H19/20;C07H19/10
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 羅曉林;楊利娟

技術領域

本發明涉及食品和醫藥技術領域，特別是5’-核苷酸二鈉的一種新的制備方法。

背景技術

核苷酸在農業、食品和醫藥行業有著廣泛的用途。尤其是在嬰兒食品和醫藥領域的應用中，有著不可替代的功能。在醫藥領域，臨床實驗表明，核苷酸參與人體代謝，促進內臟器官改進和恢復，改善骨髓造血功能，可作為治療癌癥病毒的輔助藥物，是一種非常重要的醫藥原料。除在醫藥行業應用外，在精細化工及食品行業中核酸類物質也有重要作用。核酸類物質作為化妝品的成分之一，有護膚、防皺等功效。核酸類物質用做植物營養添加劑，使用后可以明顯提高水稻、大豆等農作物的產量，最高增產可以達40％。用于動物的飼養可以提高動物的增重率及飼料使用率，料耗明顯降低。5′-核苷酸用途廣泛，與人們的生活息息相關，研究其不同的合成路徑對醫藥，食品，農業等都有著非常重要的意義。目前核苷酸制備生成方法有：化學合成法、微生物發酵法、酶解法以及酶催化法，分別是從不同的角度研究了核苷酸的合成，但也各有利弊。化學法，主要是以核苷為原料進行常規磷酸化反應。當核苷如肌苷或鳥苷用三氯氧磷在磷酸三乙酯存在下磷酸化時，在得到所需的5’-單核苷酸的同時會產生2’位磷酸酯、3’位磷酸酯、二磷酸酯、嘌呤和其他副產物。這是因為核苷磷酸化雖然主要發生在5’位羥基，但是2’位羥基和3’位羥基也同時進行了磷酸化，這樣就產生了2’位磷酸酯、3’位磷酸酯雜質。并且還存在其他副反應。因為副反應多，雜質多，所以提純困難，純度低，收率低(US3413282，1968)。微生物發酵法，主要是利用微生物菌株的生物合成途徑來生產核苷酸，副產物少，成本低，但此法的應用受到微生物特性的很大限制。酶解法，酶解法生產核苷酸是歷史最長、技術最成熟的生產方法，已成為制備各種天然核苷酸的經典方法，但是此法由于反應器的膜易堵塞而且膜反應器維護費用高，故不適用于大規模工業生產。酶催化方法，同時具有微生物法的產物單一，成本低的優點，又有化學法的作用范圍廣泛的特點，正受到越來越多的重視。此法的不足之處在于對酶的篩選工作量很大，同時酶的底物作用范圍也有一定的限制。

發明內容

針對上述缺點，本發明要解決的技術問題是提供一種高純度、高收率的5’-核苷酸二鈉的制備方法。

為解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是：一種5’-核苷酸二鈉(I)的制備方法，首先制備磷酰二鹵(II)，然后將核苷與磷酰二鹵(II)反應得到核苷磷酸二酯(III)，核苷磷酸二酯(III)，再經R基取代和成鹽兩步反應制得5’-核苷酸二鈉(I)，

所述的5’-核苷酸二鈉(I)的分子結構式為：

所述磷酰二鹵(II)的分子結構式為：

所述核苷磷酸二酯(III)的分子結構式為：

上式中其中，R(CH₃)₃C-、(C₆H₅)₃C-烷基、CH₂CH₂Cl、CNCH₂CH₂、2，2，2-Cl₃CCH₂烷基中的一種，X為核苷中的堿基。

進一步：在上述5’-核苷酸二鈉(I)的制備方法，它的具體步驟為

(1)、將三氯氧磷溶于惰性溶劑中，冷卻至0℃以下，滴加醇，然后自然升溫至室溫反應3-4小時，先減壓蒸餾去掉低沸點溶劑，再用油泵減壓蒸餾，收集餾分，得到磷酰二鹵(II)；

(2)、將磷酰二鹵(II)溶于惰性溶劑中，冷卻至0℃以下，在氮氣保護下，加入核苷，再加入除酸劑，然后升溫于20-50℃反應4-6小時，將反應物倒入冰水中，用有機溶劑提取出核苷磷酸二酯(III)，減壓蒸掉溶劑，得到核苷磷酸二酯(III)；所述的核苷與除酸劑的重量比是100∶10-20；

(3)、將核苷磷酸二酯(III)溶于惰性溶劑中，根據R基的不同，選擇下述a或b方案的去除R取代基的方法，于30-50℃反應。再與碳酸氫鈉或者氫氧化鈉在甲醇中成鹽，過濾，減壓干燥即得5’-核苷酸二鈉(I)；

所述的去除R取代基的方法分別為：

a，R＝(CH₃)₃C-，(C₆H₅)₃C-烷基時，采用酸水解的方法脫除；