[發明專利]流加底料發酵罐生產納他霉素的方法無效
| 申請號: | 201010227917.7 | 申請日: | 2010-07-13 |
| 公開(公告)號: | CN101985643A | 公開(公告)日: | 2011-03-16 |
| 發明(設計)人: | 敬科舉;曾憲海;馬尼拉法沙·伊馬努兒;郝曉兵;盧英華;姚傳義;凌雪萍;陳翠雪 | 申請(專利權)人: | 廈門大學 |
| 主分類號: | C12P19/62 | 分類號: | C12P19/62;C12R1/465 |
| 代理公司: | 廈門南強之路專利事務所 35200 | 代理人: | 陳永秀;馬應森 |
| 地址: | 361005 *** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 流加底料 發酵 生產 霉素 方法 | ||
1.流加底料發酵罐生產納他霉素的方法,其特征在于包括以下步驟:
1)搖瓶種子培養
無菌條件下,取褐黃孢鏈霉菌孢子涂布于高氏1號瓊脂培養基斜面中,置于培養箱中培養,然后將培養好的孢子塊接入盛有搖瓶種子培養基的三角瓶中,搖床培養;
2)一級種子罐培養
將種子液按5%~10%的接種量接入盛有一級種子罐培養基的種子罐中培養;
3)二級種子罐培養
將種子液按10%~30%的接種量接入盛有二級種子罐培養基的種子罐中培養;
4)底料流加發酵罐培養
將種子液按5%~10%的接種量接入盛有發酵培養基發酵罐中,培養溫度28~30℃,轉速為100~200rpm,發酵時間120~160h,分別在發酵培養24~48h、60~80h、90~100h時,恒速流加初始培養液質量體積的5%~20%發酵培養基,待發酵液呈米黃色稍深,菌絲衰老,趨于自溶,染色淺時放罐,得納他霉素。
2.如權利要求1所述的流加底料發酵罐生產納他霉素的方法,其特征在于在步驟1)中,所述培養箱中培養的溫度為28~30℃,培養的時間為5~9d。
3.如權利要求1所述的流加底料發酵罐生產納他霉素的方法,其特征在于在步驟1)中,所述搖瓶種子培養基為可溶性淀粉20.0~0.0g/L,葡萄糖8.0~15.0g/L,黃豆餅粉10.0~20.0g/L,酵母粉8.0~20g/L,蛋白胨5.0~10.0g/L,碳酸鈣2.0~10.0g/L,pH?7.0。
4.如權利要求1所述的流加底料發酵罐生產納他霉素的方法,其特征在于在步驟1)中,所述搖床培養的轉速為150~220rpm,搖床培養的溫度為25~30℃,搖床培養的時間為36~48h。
5.如權利要求1所述的流加底料發酵罐生產納他霉素的方法,其特征在于在步驟2)中,所述一級種子罐培養基為可溶性淀粉50.0~100g/L,葡萄糖5.0~25.0g/L,黃豆餅粉5.0~15.0g/L,蛋白胨5.0~10.0g/L,酵母粉5.0~10.0g/L,氯化鈉2.0~5.0g/L,碳酸鈣5.0~15.0g/L,消泡劑1~2g/L,pH?7.0±0.5。
6.如權利要求1所述的流加底料發酵罐生產納他霉素的方法,其特征在于在步驟2)中,所述種子罐中培養的轉速為200~400rpm,培養的溫度為28~30℃,種子罐的罐壓為0.03~0.05MPa,培養的時間為24~48h。
7.如權利要求1所述的流加底料發酵罐生產納他霉素的方法,其特征在于在步驟3)中,所述二級種子罐培養基為可溶性淀粉50.0~100g/L,葡萄糖5.0~25.0g/L,黃豆餅粉5.0~15.0g/L,蛋白胨5.0~10.0g/L,酵母粉5.0~10.0g/L,氯化鈉2.0~5.0g/L,碳酸鈣5.0~15.0g/L,消泡劑1~2g/L,pH?7.0±0.5。
8.如權利要求1所述的流加底料發酵罐生產納他霉素的方法,其特征在于在步驟3)中,所述種子罐中培養的轉速為200~400rpm,培養的溫度為28~30℃,種子罐的罐壓為0.03~0.05MPa,培養的時間為24~48h。
9.如權利要求1所述的流加底料發酵罐生產納他霉素的方法,其特征在于在步驟4)中,所述發酵培養基為可溶性淀粉50.0~100g/L,葡萄糖5.0~25.0g/L,黃豆餅粉5.0~15.0g/L,蛋白胨5.0~10.0g/L,氯化鈉2.0~5.0g/L,碳酸鈣5.0~15.0g/L,消泡劑0.5~2g/L,pH7.0±0.5。
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