[發(fā)明專利]一種用于體外測定大豆分離蛋白消化率的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010227451.0
• 申請日: 2010-07-12
• 公開（公告）號: CN102329853A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李樹君;蘇丹;趙鳳敏;曹有福;劉威;楊炳南;張?zhí)m芳;趙小鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)機械化科學(xué)研究院
• 主分類號: C12Q1/37
• 分類號: C12Q1/37;G01N33/68
• 代理公司: 北京律誠同業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11006
• 代理人: 梁揮;趙雁

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食品加工技術(shù)，更具體地涉及用于體外測定大豆分離蛋白消化率的方法。

背景技術(shù)

大豆分離蛋白是以低溫脫溶大豆粕為原料生產(chǎn)的一種全價蛋白類食品。蛋白質(zhì)含量在90％以上，氨基酸種類有近20種，并含有人體必需氨基酸。其營養(yǎng)豐富，不含膽固醇，近年的研究證實，大豆蛋白具有肉類蛋白所不具有的保健價值，是植物蛋白中為數(shù)不多的可替代動物蛋白的品種之一，對維系人類生命和保證人們的健康起著重要作用。但大豆蛋白分子結(jié)構(gòu)緊密，對酶解具有很強的抵抗力，不利于人體內(nèi)的消化和吸收，其生理活性和消化性是開發(fā)大豆蛋白加工技術(shù)的主要難題。因此，測定蛋白在人體內(nèi)的消化率對提高和改善大豆蛋白加工難題具有重要的現(xiàn)實意義。

目前對蛋白質(zhì)消化的研究方法主要有化學(xué)法分析、體內(nèi)消化法(人體及動物實驗法)和體外模擬法等?；瘜W(xué)分析法快速簡便，但這種利用概略養(yǎng)分分析所測得的蛋白養(yǎng)分與人體消化吸收養(yǎng)分間存在很大差異，不足以準確地反映出蛋白的實際營養(yǎng)價值。體內(nèi)消化法(人體及動物實驗法)是測定蛋白質(zhì)消化最好的方法，但是這種方法復(fù)雜、時間長、費用高；且由于很多因素影響而很難做到。與前兩種方法相比，體外模擬法具有快速、簡便、重復(fù)性好等優(yōu)點，雖體內(nèi)消化過程難以精確再現(xiàn)，但是，存在于體內(nèi)的條件是可以在體外再現(xiàn)的。通過對體內(nèi)真實情況的模擬，能很好的反映食物在體內(nèi)消化吸收，可在短時間內(nèi)對多個樣品進行評定。

現(xiàn)有技術(shù)文獻中已有關(guān)于對大豆蛋白進行體外消化率測定的記載。例如，黃滄海等(幾種蛋白質(zhì)原料體外消化率測定方法的比較，飼料工業(yè)，高壓物理學(xué)報，2005年第26卷第20期)分別采用胃蛋白酶-胰蛋白酶兩步法、肉食性魚類(如鱸魚)消化道粗酶提取液消化法和草食性魚類(如草魚)消化道粗酶提取液消化法測定了酪蛋白、魚粉、豆粕、菜籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉等7種蛋白原料的消化率。結(jié)果表明，胃蛋白酶-胰蛋白酶兩步法在測定魚粉蛋白質(zhì)消化率時可以替代魚類消化液粗酶消化法，對于其它蛋白質(zhì)原料使用該方法應(yīng)慎重。Pedersen，B.和Eggum，B.O.(Prediction?ofprotein?digestibility?by?an?in?vitro?enzymatic?pH-stat?procedure，1983年第49期)用體外法測定了61種食物蛋白質(zhì)的消化率，其中57種植物蛋白或植物蛋白與動物蛋白的混合物，體外實驗測的消化率與體內(nèi)實驗(大鼠試驗)有很好的相關(guān)性。李清曉等(豆粕粉碎粒度與蛋白質(zhì)體外消化率的關(guān)系研究，家畜生態(tài)學(xué)報，2005年第26卷第5期)采用胃蛋白酶一胰酶兩步法，通過體外模擬雞體消化道內(nèi)環(huán)境來比較不同粉碎粒度豆粕的蛋白消化率，從而確定適合肉仔雞生長的較適宜豆粕粉碎粒度。

蛋白質(zhì)在體內(nèi)的消化是一個兩步過程，第一步是蛋白質(zhì)與預(yù)可消化性的胃蛋白酶相接觸，第二步是蛋白質(zhì)和氨基酸與胰蛋白酶的接觸消化。目前，胃蛋白酶-胰酶兩步體外消化法是公認的一種較好的測定蛋白質(zhì)消化率的方法。但該方法大多用于飼料的消化率測定，雖有關(guān)于大豆蛋白體外消化的研究，但這些研究中所采用的蛋白酶沒有經(jīng)過酶的標準化，在體外消化中酶的活性變化范圍可能會較大，且對體內(nèi)條件的模擬及仿真度不高。這樣，會使體內(nèi)消化率的測定結(jié)果不穩(wěn)定且無對比參考性。因此，還需要對現(xiàn)有的大豆蛋白體外消化法進行改進以提高其測定結(jié)果的穩(wěn)定性和對比參考性。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種用于體外測定大豆分離蛋白消化率的方法。

本發(fā)明在于提供一種大豆分離蛋白體外消化率的測定方法，該方法是在現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)上加以改進，可提高測定結(jié)果的穩(wěn)定性。

根據(jù)本發(fā)明，所述用于體外測定大豆分離蛋白消化率的方法包括下列步驟：

配制大豆分離蛋白的水溶液(0.01～0.1％，g/100mL)，作為樣品；

使用一種或多種酶模仿人胃腸道的環(huán)境對所述樣品進行體外消化；

終止消化過程，獲得待測樣品；以及

測定所述待測樣品的體外消化率。

在一個較佳實施方式中，在配制大豆分離蛋白的水溶液之前，可首先對所述大豆分離蛋白進行標準化檢測。

在一個較佳實施方式中，所述大豆分離蛋白的蛋白質(zhì)含量優(yōu)選在90％(干基)以上。

在一個較佳實施方式中，所述水優(yōu)選為雙蒸水。

在一個較佳實施方式中，所述酶可選自胃蛋白酶、胰酶、胰蛋白酶、以及胰凝乳蛋白酶。

在一個較佳實施方式中，消化所述樣品的過程可包括以下步驟：

調(diào)節(jié)所述樣品的pH到大約1.5；

加入胃蛋白酶；