[發明專利]一種冬花有效組分的制備方法和應用

無效

• 申請號: 201010214788.8
• 申請日: 2010-06-29
• 公開（公告）號: CN101856379A
• 公開（公告）日: 2010-10-13
• 發明（設計）人: 程翼宇;瞿海斌;吳斌
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K36/28
• 分類號: A61K36/28;A61P35/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高;趙杭麗

技術領域

本發明屬中藥提取物，具體地說涉及從冬花中提取有效組分的制備方法，以及該有效組分在制備治療、預防腫瘤藥物中的應用。

背景技術

腫瘤是一種常見病、多發病，其中惡性腫瘤是目前危害人類健康最嚴重的一類疾病。目前業內對惡性腫瘤的治療主要還是以手術、放療、化療為主，但許多化學抗癌藥物在作用于靶細胞時往往累及正常細胞，造成嚴重的副反應。植物藥的遺傳毒性不明顯，中草藥在抗癌抗突變方面有獨特的優勢和廣闊的應用前景，而且中藥在對腫瘤的輔助治療中也起到不容忽視的作用。紫杉醇即是典型的從植物中獲得的具有良好抗癌活性的天然化合物，現已開發為抗腫瘤藥物。目前我國危害性最為嚴重的腫瘤為肺癌、鼻咽癌、食管癌、胃癌、大腸癌、肝癌、乳腺癌、宮頸癌、白血病及淋巴瘤等。特別是肝癌的發生率近年來有所增加。值得重視，這些腫瘤的病因學、發病學及其防治，均為我國腫瘤研究的重點。尋找高效低毒的抗癌藥物以及抗癌輔助藥物是當前腫瘤研究的重要內容。

我國藥用生物資源十分豐富，其生理活性物質是研究和發現新藥先導化學物，開發新藥的天然寶庫。目前，我國從天然產物中提取活性物質，用于開發成治療腫瘤疾病、安全性好、毒性低的新藥還很少，從天然產物中提取活性物質，開發成具有抗腫瘤療效的新藥，具有重要應用價值和廣闊發展前景。

發明內容

本發明的目的是提供一種冬花有效組分的制備方法，通過以下步驟實現：將冬花藥材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加熱回流提取得提取液，將提取液濃縮成浸膏，用反相硅膠柱(ODS)對其進行分離，首先用低濃度乙醇作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改換高濃度乙醇作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續分離得到的樣品；制備色譜的分離條件：色譜柱為制備柱，流動相為水和乙腈，梯度洗脫，收集溶液，溶液經濃縮干燥后得到冬花有效組分。

優選的冬花有效組分制備方法，通過以下步驟實現：將冬花藥材粉碎后加入體積比為1∶0.8～1.2的乙酸乙酯和乙醇，加熱回流0.8～1.2小時，提取1～3次，合并濾液得提取液，將提取液濃縮成浸膏，用反相硅膠柱(ODS)對其進行分離，首先用體積比20％-40％的乙醇溶液作為流動相，得洗脫液I，棄之，再用體積比90％-100％的乙醇溶液作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續分離得到的目的物；制備液相色譜的分離條件為：色譜柱為制備柱(Zorbax?SB-C18；21.2mm×250mm)，流動相為水和乙腈，梯度洗脫，流速為9～11ml/min，柱溫為室溫，收集溶液，溶液經濃縮干燥后得到有效組分。

最佳的冬花有效組分制備方法，通過以下步驟實現：將冬花藥材粉碎后加入體積比為1∶1的乙酸乙酯和乙醇，加熱回流1小時，提取2次，合并濾液得提取液，將提取液濃縮成浸膏，用反相硅膠柱(ODS)對其進行分離，首先用30％(體積比)的乙醇溶液作為流動相，得洗脫液I，棄之，再用95％(體積比)的乙醇溶液作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續分離得到的目的物；制備色譜的分離條件為：色譜柱為制備柱(Zorbax?SB-C18；21.2mm×250mm)，流動相為水和乙腈，梯度洗脫，流速為10ml/min，柱溫為室溫。梯度洗脫程序如下：0分鐘時，流動相為80％的水溶液和20％的乙腈溶液；4分鐘時，流動相為80％的水溶液和20％的乙腈溶液；19分鐘時，流動相為50％的水溶液和50％的乙腈溶液；54分鐘時，流動相為5％的水溶液和95％的乙腈溶液；64分鐘時，流動相為5％的水溶液和95％的乙腈溶液。在時間段48.0～52.0min收集溶液，溶液經濃縮干燥后得到有效組分。

本發明的再一個目的是提供該冬花有效組分在制備治療、預防肝臟腫瘤藥物中的應用。本發明的冬花有效組分可以作為活性成分，加入藥劑學上接受的藥物賦形劑或載體，按照藥劑學上記載的方法制成制劑。所制備的藥物的制劑形式為液體制劑、固體制劑、膠囊劑或膠丸劑，給藥方式為口服給藥或注射給藥。

本發明的冬花有效組分還可以作為活性成分之一，加入其他抗腫瘤藥物，加入藥劑學上接受的藥物賦形劑或載體，按照藥劑學上記載的方法制成制劑。

本發明的有益之處是：通過本方法制得冬花有效組分方法簡便，質量穩定。且現有技術中尚未有冬花抗腫瘤活性的報道，本發明為研發冬花抗腫瘤新藥提供一定基礎。

具體實施方式

本發明結合下面實施例進一步詳細說明本發明的實質內容，該實施例僅用于說明本發明而并非對本發明的限制。

實施例一冬花有效組分的制備