[發明專利]一種不帶電兩親性殼聚糖納米藥物載體及其制備和應用

無效

• 申請號: 201010213696.8
• 申請日: 2010-06-30
• 公開（公告）號: CN102309761A
• 公開（公告）日: 2012-01-11
• 發明（設計）人: 馬小軍;周火飛;劉袖洞
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: A61K47/36
• 分類號: A61K47/36;A61K9/14;A61K31/337;C08B37/08;A61P35/00
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

1.一種不帶電兩親性殼聚糖納米藥物載體，其特征在于：

它先后由脫氧膽汁酸和縮水甘油分別與殼聚糖中的氨基葡萄糖進行酰胺化反應和親電加成反應從而制備得到由N-[(2，3)-二羥丙基]氨基葡萄糖單元、脫氧膽汁酸酰胺化氨基葡萄糖單元、乙酰氨基葡萄糖單元和氨基葡萄糖單元組成的水溶性好兩親性不帶電的嵌段殼聚糖衍生物。

2.一種權利要求1所述藥物載體的制備方法，其特征在于：在催化劑EDC和NHS的催化作用下，用生物相容性好的親水性高分子殼聚糖(Mw15KDa-100KDa)和親油性小分子脫氧膽汁酸通過酰胺化反應，從而形成生物相容性好、可降解的兩親性殼聚糖衍生物CS-DCA；通過在CS-DCA的基礎上進行一步通過親電反應接枝季胺鹽形小分子縮水甘油(Glycidol)，形成季胺鹽形兩親性殼聚糖衍生物；在廣泛pH溶液中，利用分子自組裝的原理，在超聲條件下制備得到粒徑150-350nm且分布均勻的納米膠束；由于該膠束特殊是表面親水、內部親油，因此可以實現親油性藥物如紫杉醇的包埋裝載，形成納米藥物釋放系統。

3.按照權利要求2所述的制備方法，其特征在于：具體操作過程如下，

1)室溫下，將1-4g殼聚糖溶解于50-200mL鹽酸水溶液中，隨后用1-10N的NaOH將溶液pH調整到5.0-6.0，形成透明的1-2％(w/v)的殼聚糖溶液；

2)取一定量脫氧膽汁酸，使脫氧膽汁酸的物質量與殼聚糖中氨基葡萄糖殘基的物質量之比為0.10-0.30，將之加入到50-100mL的DMSO溶液中，隨后向脫氧膽汁酸溶液中加入等物質量的EDC和NHS，并且保持EDC與脫氧膽汁酸的物質量之比恒定在1.0∶1-1.5∶1；脫氧膽汁酸、EDC與NHS在室溫下于500-1500rpm反應30-60min；

3)將脫氧膽汁酸、EDC與NHS于DMSO中反應30-60min的混合溶液于30-60min內緩慢滴加到殼聚糖溶液中，在500-1500rpm的攪拌速度下反應18-36h；

4)將上述反應混合溶液加入到200-500mL甲醇中，并且用NaOH溶液將pH值調節至中性使殼聚糖接枝產物沉淀。隨后離心收集沉淀；

5)將上述沉淀重新溶于50-200mL?pH1-5酸性的水溶液中，并且重復操作步驟中4)3-5次，但是最后一次將甲醇換為乙醇即可；將得到的白色凝膠產物于室溫下真空干燥從而制備得到CS-DCA；

6)將上述產物CS-DCA取0.5-4g加入到25-200mL水溶液中(0.25-2.0mL乙酸)并于500-1500rpm攪拌至充分混均，隨后將上述混合液加熱至40-60℃，并向其中滴加一定量的縮水甘油(Glycidol)，反應18-36h；并且GTMAC與CS-DCA中氨基葡萄糖的物質的量比例，控制為3∶1至6∶1；

7)將上述反應液取出，并且用NaOH溶液將其pH值調節到中性，離心；將上清液置于透析袋中于大量清水透析3-5天，最后將透析液冷凍干燥，得到白色棉狀產物G-CS-DCA。

4.按照權利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述得到白色棉狀產物G-CS-DCA可進一步制備得到一定粒徑均勻分布的納米顆粒溶液，

具體為：取合成產物G-CS-DCA，加入到pH＝5.0-7.8的PBS溶液中，使得G-CS-DCA的濃度在0.5-5mg/mL，于18-40℃下低速振蕩至溶解，隨后用探針型超聲儀于冰水浴中超聲1-3min，工作時5-3s，停1-3s，重復2-4次，即可制備得到一定粒徑均勻分布的納米顆粒溶液。

5.按照權利要求4所述的制備方法，其特征在于：所述產物濃度為1-4mg/mL，超聲的功率為40-100W。

6.一種權利要求1所述藥物載體的應用，其特征在于：

1)取一定量的G-CS-DCA溶解于水中，G-CS-DCA的濃度為2mg/mL，在500-1500rpm攪拌的條件下并向其中滴加一定量的紫杉醇(PTX)甲醇溶液，使得甲醇溶液的體積與G-CS-DCA溶液的體積比為1∶5-1∶20，隨后將之用探針型超聲儀超聲10-40min，工作時5-3s，停1-3s；紫杉醇與材料G-CS-DCA的質量比為0.10∶1至0.3∶1；

2)將上述溶液置于透析袋于大量清水中透析24小時，隨后用0.8μm濾膜過濾，并將濾液冷干燥即得到載有PTX的納米藥物載體材料。