[發明專利]一種檢測MLH1基因突變的方法及其試劑盒

無效

• 申請號: 201010212048.0
• 申請日: 2010-06-25
• 公開（公告）號: CN102296105A
• 公開（公告）日: 2011-12-28
• 發明（設計）人: 南蓬;徐燁;韋雯倩;劉方奇;劉雷
• 申請（專利權）人: 復旦大學;復旦大學附屬腫瘤醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 吳桂琴;包兆宜

技術領域

本發明屬于分子生物學和醫學領域。涉及人MLH1基因的突變及其用途。具體涉及人MLH1基因(MLH1gene)的突變(Mutations)及其與遺傳性非息肉性結直腸癌(HNPCC)相關性的檢測。

背景技術

″結直腸癌″(CRC)在腫瘤中向來有″富貴病″之稱，表明其與人們的生活習慣有著密切的聯系。在上海，隨著生活水平的提高，結直腸癌的發病率已躍居常見惡性腫瘤的第二位，僅次于肺癌。據復旦大學附屬腫瘤醫院資料統計，近幾年結直腸癌手術量連年攀升，2007年該院結直腸癌手術量近900例，2008年已突破千例，達到了1027例。遺傳性非息肉性結直腸癌(HNPCC)，又稱為林奇綜合癥，是一種常染色體顯性遺傳性疾病，約占結直腸癌的5％[Umar?A，Risinger?JI，Hawk?ET，Barrett?JC.Testing?guidelines?for?hereditary?non-polyposis?colorectal?cancer[J].Nat?Rev?Cancer?2004；4：153-8]，外顯率高達80％-90％。HNPCC是由DNA錯配修復基因(MMR)突變引起的，主要發生在MLH1，MSH2和MSH6，比較少的發生在PMS1和PMS2中[Peltomaki?P，Vasen?HF.Mutations?predisposing?to?hereditary?nonpolyposis?colorectal?cancer：Database?and?results?of?a?collaborative?study-The?International?Collaborative?Group?on?Hereditary?Nonpolyposis?Colorectal?Cancer[J].Gastroenterology?113：1146-1158，1997]。目前，用于篩選HNPCC的方法盡管較多，但只有檢測出胚系(germline)的MMR基因病理性突變才能確診為HNPCC患者[Cai?Q，Sun?MH，Fu?G，et?al.Mutation?investigation?of?h?MLH1?and?hMSH2?genes?in?hereditary?nonpolyposis?colon?cancer?families?from?China[J].J?Chin?Pathol，2003，32：323-328.]。

HNPCC無論是在治療措施上還是在隨訪方案上均與散發性結直腸癌者不同，Syngal?S等研究發現，HNPCC腫瘤對常用化療藥如5-氟尿嘧啶(5-FU)等有耐藥反應[De?Vos?Tot?NederveenCappel?WH，Meulenbeld?HJ，Kleibeuker?JH?et?al.Survival?after?adjuvant?5-FU?treatment?for?stage?III?colon?cancer?in?hereditary?nonpolyposis?colorectal?cancer[J].Internal?J?Cancer?2004：109：468-471.]。因此HNPCC患者的確診對于選擇合適的治療方案、確定隨訪時間及間隔、判斷預后，以及對家族成員進行二級預防等具有重要意義[Liu?SR，Zhao?B，Wang?Z?J，et?al.Cl?inical?features?and?mismatch?repair?gene?mutation?screening?in?Chinese?patients?with?hereditary?nonpolyposis?colorectal?carcinoma.World?J?Gastroenterol，2004，10：2647-2651.]。對于已發現存在遺傳性錯配修復基因突變的患者，可以密切監測異時多原發癌和其他HNPCC相關腫瘤的發生，并對其家族中的其他成員，特別是尚未出現腫瘤的年輕成員進行相應檢測，確認突變基因攜帶者，不但有助于對癌癥易感個體重點進行臨床監測和臨床癥狀出現前的早期診斷，也可為遺傳咨詢和基因治療提供依據，并可使非突變攜帶者免除不必要的精神和經濟負擔，對基因突變攜帶者，可以進行密切隨訪，以做到早期診斷，早期治療。

與HNPCC致病密切相關的錯配修復基因中，MLH1基因位于3p21-23，其突變率是所有相關基因中最高的。全球范圍內對于MMR突變的研究很多，可是中國對此的研究很少。在所有的突變研究中，迄今為止，尚沒有與本發明內容相似的報道。

發明內容