[發明專利]一種金葉黃楊的組織培養方法

有效

• 申請號: 201010207123.4
• 申請日: 2010-06-22
• 公開（公告）號: CN102293150A
• 公開（公告）日: 2011-12-28
• 發明（設計）人: 陳建華;黃建榮;沈勤
• 申請（專利權）人: 上海上房園藝有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 趙志遠

1.一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，該方法是摘取金葉黃楊上部的小芽依次進行無菌化處理、芽的分化和增殖、不定芽壯苗培養、生根培養和煉苗與移栽得到金葉黃楊種苗。

2.根據權利要求1所述的一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，所述的無菌化處理是：將摘取金葉黃楊上部的小芽，用自來水沖洗2h后于超凈工作臺上，用濃度為75wt％的乙醇浸泡20-40s，1wt‰的升汞溶液浸泡10-20min，經無菌水沖洗5-6次后用無菌濾紙吸干表面水份，取小芽基部切成1cm長接種于誘導培養基上；

所述的芽的分化和增殖是：小芽接種于誘導培養基上6周后，小芽基部開始膨大，出現黃綠色突起，1周后可見明顯的愈傷組織，培養1個月，然后切下帶芽愈傷組織放入不定芽增殖培養基進行培養；

所述的不定芽壯苗培養是：在不定芽增殖培養基中誘導出的叢生芽，將大叢芽分成小叢或單芽后，放入壯苗培養基上，不定芽迅速伸長，20天后可以長成2-3cm的小植株；

所述的生根培養是：取高度為2-3cm的小植株，轉接入生根培養基中誘導生根，20天后幼苗基部分化出許多白色的根原基，30天后可以長至4-6cm；

所述的煉苗與移栽是：生根培養20-30天，根系長至1-2cm時，選擇根系發達生長健壯的無菌苗，室內開瓶煉苗5天，取出后洗凈根部瓊脂，在溫室中馴化40天后，即可移栽室外，給予肥水管理即可。

3.根據權利要求2所述的一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，所述的小芽誘導培養基的成分為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。

4.根據權利要求3所述的一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，所述的小芽誘導培養基的成分優選MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

5.根據權利要求2所述的一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，所述的增殖培養基的成分為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。

6.根據權利要求5所述的一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，所述的增殖培養基的成分優選MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

7.根據權利要求2所述的一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，所述的壯苗培養基的成分為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L??或MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L??，優選MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

8.根據權利要求2所述的一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，所述的生根培養基的成分為MS+NAA0.05mg/L、MS+NAA0.1mg/L或MS+NAA0.2mg/L。

9.根據權利要求8所述的一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，所述的生根培養基的成分優選MS+NAA0.1mg/L。

10.根據權利要求1所述的一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，所述的小芽誘導培養基、增殖培養基、壯苗培養基和生根培養基成分還包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L，該培養基的培養溫度為24-26℃，光照為70-90μmol/ms，pH值為5.5-6.0。