[發明專利]一種金葉黃楊的組織培養方法

有效

• 申請號: 201010207123.4
• 申請日: 2010-06-22
• 公開（公告）號: CN102293150A
• 公開（公告）日: 2011-12-28
• 發明（設計）人: 陳建華;黃建榮;沈勤
• 申請（專利權）人: 上海上房園藝有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 趙志遠

技術領域

本發明涉及一種草本植物的組織培養方法，尤其是涉及一種金葉黃楊的組織培養方法。

背景技術

金葉黃楊常綠灌木，株形緊湊，新葉亮黃色，繁茂成熟后變為深綠色具黃斑。喜光，較耐寒，北京地區可陸地越冬，喜溫暖濕潤氣候及肥沃排水良好大的土壤，是良好的花鏡與庭院觀賞灌木，也可做綠籬或做模紋材料。金葉黃楊為國外引進的品種，觀賞性優良，但引種數量較少，其繁殖慢，市場需求量大，種苗供應受限制。通過組培技術，極大提高繁殖速度和苗的整齊度，更好地保持原有的母本性狀。金葉黃楊在國內組培的報道尚未見。

發明內容

本發明的目的就是為了克服上述現有技術存在的缺陷而提供一種可極大提高繁殖速度和苗的整齊度，更好地保持原有的母本性狀的一種金葉黃楊的組織培養方法。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現：

一種金葉黃楊的組織培養方法，其特征在于，該方法是摘取金葉黃楊上部的小芽依次進行無菌化處理、芽的分化和增殖、不定芽壯苗培養、生根培養和煉苗與移栽得到金葉黃楊種苗。

所述的無菌化處理是：將摘取金葉黃楊上部的小芽，用自來水沖洗2h后于超凈工作臺上，用濃度為75wt％的乙醇浸泡20-40s，1wt‰的升汞溶液浸泡10-20min，經無菌水沖洗5-6次后用無菌濾紙吸干表面水份，取小芽基部切成1cm長接種于誘導培養基上；

所述的芽的分化和增殖是：小芽接種于誘導培養基上6周后，小芽基部開始膨大，出現黃綠色突起，1周后可見明顯的愈傷組織，培養1個月，然后切下帶芽愈傷組織放入不定芽增殖培養基進行培養；

所述的不定芽壯苗培養是：在不定芽增殖培養基中誘導出的叢生芽，將大叢芽分成小叢或單芽后，放入壯苗培養基上，不定芽迅速伸長，20天后可以長成2-3cm的小植株；

所述的生根培養是：取高度為2-3cm的小植株，轉接入生根培養基中誘導生根，20天后幼苗基部分化出許多白色的根原基，30天后可以長至4-6cm；

所述的煉苗與移栽是：生根培養20-30天，根系長至1-2cm時，選擇根系發達生長健壯的無菌苗，室內開瓶煉苗5天，取出后洗凈根部瓊脂，在溫室中馴化40天后，即可移栽室外，給予肥水管理即可。

所述的小芽誘導培養基的成分為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。

所述的小芽誘導培養基的成分優選MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

所述的增殖培養基的成分為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。

所述的增殖培養基的成分優選MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。

所述的壯苗培養基的成分為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L或MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L，優選MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

所述的生根培養基的成分為MS+NAA0.05mg/L、MS+NAA0.1mg/L或MS+NAA0.2mg/L。

所述的生根培養基的成分優選MS+NAA0.1mg/L。

所述的小芽誘導培養基、增殖培養基、壯苗培養基和生根培養基成分還包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L，該培養基的培養溫度為24-26℃，光照為70-90μmol/ms，pH值為5.5-6.0。

與現有技術相比，本發明通過組培技術，可大大提高繁殖速度和苗木的整齊度，更好地保持原有的母本性狀，并且能夠提高成活率，從而提高產量。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明進行詳細說明。

實施例1

一種金葉黃楊的組織培養方法，該方法包括以下步驟：

(1)無菌化處理

摘取金葉黃楊上部的小芽，用自來水沖洗2h后于超凈工作臺上，用濃度為75wt％的乙醇浸泡30s，1wt‰的升汞溶液浸泡15min，經無菌水沖洗5-6次后用無菌濾紙吸干表面水份，取小芽基部切成1cm長接種于小芽誘導培養基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L上；

(2)芽的分化和增殖