[發(fā)明專利]一種利用個人遺傳信息進(jìn)行防偽的印泥

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010206661.1
• 申請日: 2010-06-23
• 公開（公告）號: CN101885927A
• 公開（公告）日: 2010-11-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 葉欣
• 申請（專利權(quán)）人: 葉欣
• 主分類號: C09D11/10
• 分類號: C09D11/10;C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 常州市維益專利事務(wù)所 32211
• 代理人: 何學(xué)成

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物防偽技術(shù)領(lǐng)域，具體是涉及一種利用個人遺傳信息進(jìn)行防偽的印泥。

背景技術(shù)

隨著防偽技術(shù)的不斷發(fā)展，生物技術(shù)在防偽領(lǐng)域有了新的發(fā)展，目前利用的生物防偽技術(shù)有指紋、眼睛虹膜等個人身份防偽識別技術(shù)、抗原抗體商品防偽技術(shù)和DNA商品防偽技術(shù)。

指紋身份識別是比較古老成熟的防偽技術(shù)，現(xiàn)在通過和計算機(jī)的聯(lián)合應(yīng)用，成為重要的身份識別手段，被廣泛的應(yīng)用。眼睛虹膜身份防偽是通過虹膜的紋理的不同，因為其重復(fù)的可能性更低，相對指紋隱蔽性更好，防偽效果較指紋更勝一籌。但是他們一般主要用于各種證件和信用卡的防偽中，無法用于商品的防偽。抗原抗體商品防技術(shù)是利用抗原抗體見的高度選擇性進(jìn)行顯色從而防偽，但是卻存著其他物質(zhì)顯示類似顯色反應(yīng)的現(xiàn)象。

DNA防偽是利用不同個體的遺傳物質(zhì)DNA具有各不相同的編碼結(jié)構(gòu)的原理，在標(biāo)識中加入某個特定個體的遺傳信息。PCR的成熟使得DNA防偽變得簡單易行，它是一種體外快速擴(kuò)增DNA的方法，用于放大特定的DNA片段，數(shù)小時內(nèi)使基因片段擴(kuò)增到百萬個拷貝。PCR技術(shù)自1983年Kary?Mullis發(fā)明以來，歷經(jīng)三十多年，已成為生物科學(xué)領(lǐng)域不可或缺、運用廣泛的實驗技術(shù)，主要在生物科研和臨床應(yīng)用中廣泛應(yīng)用。具有特異性強(qiáng)，靈敏度高，簡便快速和對樣品純度要求不高的特點，使得DNA防偽在技術(shù)操作上變得完全可行。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于將生物學(xué)手段應(yīng)用于防偽技術(shù)領(lǐng)域，從而提供一種很難被破解和仿制、結(jié)果穩(wěn)定、重復(fù)性好的利用個人遺傳信息進(jìn)行防偽的印泥。

按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案，一種利用個人遺傳信息進(jìn)行防偽的印泥，包括普通印泥，所述印泥還包括基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物混合物和DNA酶抑制劑溶液，所述基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物混合物在印泥中的重量百分含量為0.1～10％，所述DNA酶抑制劑溶液在印泥中的重量百分含量為0.001～0.1％。

所述基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物混合物通過如下方法獲得：

(1)、樣品DNA的提取：選取帶有個人遺傳信息的人體組織如口腔拭子、血液、頭發(fā)毛囊，利用天根生化科技有限公司產(chǎn)品獲取基因組DNA；

(2)引物的設(shè)計：選擇基因組DNA上的不同基因片段，利用primer?premier5.0、BLAST?primer和GeneBank軟件，查詢設(shè)計出與不同基因片段相對應(yīng)的上游引物和下游引物的序列；

(3)熒光定量PCR擴(kuò)增：在熒光PCR儀上進(jìn)行DNA聚合酶鏈反應(yīng)，獲得不同基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

(4)基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的混合：將上述獲得的基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物混合，即得到基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物混合物。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物混合物中的DNA濃度為0.1-10000ng/ul。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物混合物中的DNA濃度為10-100ng/ul。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述DNA酶抑制劑采用金屬離子螯合劑。

所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法詳細(xì)如下：

1)、擴(kuò)增反應(yīng)體系(25ul)：模板(基因組DNA)，2ul；10mM上游引物和下游引物，2ul；2×Taq?PCR?MasterMix(0.1U?Taq?Polymerase/ul，500uM?dNTP，20mM?Tris-HCl?pH8.3，100mM?KCl，3mM?MgCl₂)，12.5ul；ddH₂O：8.5ul；

2)、循環(huán)反應(yīng)：根據(jù)步驟(1)中的擴(kuò)增反應(yīng)體系加樣，將加好樣的PCR試劑管放入熒光PCR儀中，設(shè)置相應(yīng)的熒光采集條件后進(jìn)行擴(kuò)增，反應(yīng)循環(huán)程序為：(a)、94℃預(yù)變性，1個循環(huán)；(b)、94℃變性，52-60℃退火，72℃延伸，30個循環(huán)后反應(yīng)結(jié)束，得到反應(yīng)產(chǎn)物；所述預(yù)變性、變性、退火和延伸階段的反應(yīng)時間根據(jù)引物的不同和目的條帶的大小不同而有所差異，最后一個循環(huán)后，反應(yīng)在72℃維持5-15分鐘，使引物延伸完全，并使單鏈產(chǎn)物退火成雙鏈。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述金屬離子螯合劑為EDTA，EDTA溶液的濃度為0.001％-5％。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述EDTA溶液的濃度為0.01-0.02％。

作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物混合物包括任意兩種基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，兩種基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的比例為1∶1～10∶1。，優(yōu)選地，所述任意兩種基因片段PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的比例為1∶1。