[發(fā)明專(zhuān)利]一種完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體的制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010205892.0
• 申請(qǐng)日: 2010-06-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101843585A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉寧;孫盟璐;江虹銳
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A61K9/127
• 分類(lèi)號(hào): A61K9/127;A61K38/02;A61K47/28;A61K47/02;A61P35/00
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所 23109
• 代理人: 金永煥

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種磁性脂質(zhì)體的制備方法。

背景技術(shù)

近年來(lái)，由于微生態(tài)學(xué)的崛起和醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展，雙歧桿菌的很多重要作用被越來(lái)越多的學(xué)者重視和研究起來(lái)。其中最引人注意的是雙歧桿菌的抗腫瘤作用，普遍認(rèn)為其抗腫瘤機(jī)理是它可以激活吞噬細(xì)胞，提高體細(xì)胞免疫功能，抑制腫瘤細(xì)胞的產(chǎn)生或分化。研究顯示，雙歧桿菌細(xì)胞壁制備完整肽聚糖可以導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的破壞，此后越來(lái)越多的研究顯示，肽聚糖發(fā)揮著多種的生物學(xué)活性，是雙歧桿菌眾多益生作用(免疫調(diào)節(jié)、抗感染、抗腫瘤活性)的效應(yīng)物質(zhì)。

完整肽聚糖易被消化酶分解進(jìn)而活性降低甚至消失，因此采用脂質(zhì)體進(jìn)行保護(hù)，但是以這種形式給藥存在藥物劑量大及對(duì)正常組織有損害的問(wèn)題；文章“雙歧桿菌肽聚糖的提取及其白蛋白磁性微球的制備”中所得白蛋白微球在掃描電鏡下觀察到微球的直徑在6μm左右，微球經(jīng)過(guò)激光粒徑分布測(cè)量?jī)x測(cè)得的平均粒徑為5.32μm，可見(jiàn)磁性微球粒徑大，導(dǎo)致靜脈注射易堵塞血管，口服不易吸收的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是為了解決現(xiàn)有磁性微球制備技術(shù)制備出的磁性微球粒徑大，靜脈注射易堵塞血管，口服不易吸收的問(wèn)題，而提供一種完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體的制備方法。

完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體的制備方法按以下步驟實(shí)現(xiàn)：一、取0.22～0.26g的蛋黃磷脂酰膽堿和0.05～0.07g的膽固醇并用18～22ml的氯仿溶解，得混合液；二、將混合液倒入圓底燒瓶，然后置于50～60℃的水浴中，在真空度為-0.08～0.1MPa的條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至圓底燒瓶?jī)?nèi)形成脂質(zhì)薄膜，再加入0.18～0.22ml的磁性納米顆粒懸液、0.004～0.006g的完整肽聚糖和48～52ml的磷酸鹽緩沖液，在60℃的條件下水化3h，即完成完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體的制備；其中磁性納米顆粒懸液的濃度為26～28mg/ml。

本發(fā)明中應(yīng)用磁性脂質(zhì)體作為完整肽聚糖的載體，可以使抗腫瘤藥物肽聚糖具有控釋性和靶向性的重要功能，這些功能使藥物可以更好的發(fā)揮治療作用可防止藥物在胃酸條件下分解，減少藥物與胃蛋白酶等消化酶的接觸，從而提高藥物在胃腸中的穩(wěn)定性，磁性的載體粒徑小又具有粘附性，使被包封的藥物可以完好的輸送至不同的組織和細(xì)胞，有利于局部用藥時(shí)增加其滯留性，有利于增加藥物與腸壁的接觸面積，延長(zhǎng)接觸時(shí)間，提高藥物的生物利用率，達(dá)到部位特異性和靶向給藥的目的；同時(shí)由于對(duì)磁場(chǎng)有較好的響應(yīng)，磁性脂質(zhì)體可以應(yīng)用于藥物靶向治療，利用體外磁場(chǎng)效應(yīng)引導(dǎo)脂質(zhì)體選擇性的到達(dá)并定位于腫瘤靶區(qū)，可以降低用藥劑量和對(duì)正常組織的損害。

本發(fā)明中采用薄膜法制備完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體，把完整肽聚糖和磁性納米顆粒包埋在脂質(zhì)體中，形成了完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體體系，降低了對(duì)外界環(huán)境對(duì)完整肽聚糖的影響，使完整肽聚糖更加穩(wěn)定，這是肽聚糖發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)的基礎(chǔ)，同時(shí)使整個(gè)體系具有良好的磁響應(yīng)性；完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體的包埋率為64.6～65.5%。

本發(fā)明中所得完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體的磁性微球粒徑為180～200nm，在獲得靶向性的同時(shí)更加有利于人體吸收；同時(shí)靜脈注射不易堵塞血管，口服易吸收，且實(shí)現(xiàn)了在有效保護(hù)肽聚糖結(jié)構(gòu)完整的同時(shí)使其具有磁靶向性這一技術(shù)難題，并且制備工藝簡(jiǎn)單，具有廣泛的應(yīng)用前景。

附圖說(shuō)明

圖1為具體實(shí)施方式十六中所得完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體的透射電鏡圖。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式，還包括各具體實(shí)施方式間的任意組合。

具體實(shí)施方式一：本實(shí)施方式完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體的制備方法按以下步驟實(shí)現(xiàn)：一、取0.22～0.26g的蛋黃磷脂酰膽堿和0.05～0.07g的膽固醇并用18～22ml的氯仿溶解，得混合液；二、將混合液倒入圓底燒瓶，然后置于50～60℃的水浴中，在真空度為-0.08～0.1MPa的條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至圓底燒瓶?jī)?nèi)形成脂質(zhì)薄膜，再加入0.18～0.22ml的磁性納米顆粒懸液、0.004～0.006g的完整肽聚糖和48～52ml的磷酸鹽緩沖液，在60℃的條件下水化3h，即完成完整肽聚糖磁性脂質(zhì)體的制備；其中磁性納米顆粒懸液的濃度為26～28mg/ml。

具體實(shí)施方式二：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是步驟一中取0.22g的蛋黃磷脂酰膽堿和0.07g的膽固醇并用18ml的氯仿溶解，得混合液。其它步驟及參數(shù)與具體實(shí)施方式一相同。

具體實(shí)施方式三：本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式一不同的是步驟一中取0.26g的蛋黃磷脂酰膽堿和0.05g的膽固醇并用22ml的氯仿溶解，得混合液。其它步驟及參數(shù)與具體實(shí)施方式一相同。