[發明專利]一種抗腫瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制備方法及其低溫連續攪拌超濾裝置

有效

• 申請號: 201010205840.3
• 申請日: 2010-06-22
• 公開（公告）號: CN102058527A
• 公開（公告）日: 2011-05-18
• 發明（設計）人: 陳堅;李新霞
• 申請（專利權）人: 新疆埃樂欣藥業有限公司
• 主分類號: A61K9/08
• 分類號: A61K9/08;A61K31/255;C12P11/00;A61P35/00;A61P31/04;A61P31/10
• 代理公司: 北京中恒高博知識產權代理有限公司 11249
• 代理人: 夏晏平

技術領域

本發明涉及制藥領域，具體地，涉及一種抗腫瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制備方法及其低溫連續攪拌超濾裝置。

背景技術

大蒜(Alliium?sativun?L.)及其制劑已列入美國、歐盟藥典。確認蒜氨酸(Alliin)及大蒜辣素(Allicin)為主要功效成分。但是目前國內外上市的大蒜制劑蒜氨酸或大蒜辣素的含量很低。研發安全、有效、質量可控的大蒜高效新制劑成為各國藥學家的研究熱點。

1、蒜氨酸(Alliin)化學名：S-烯丙基-L-半胱氨酸亞砜(S-Allyl-L-cysteine)。熔點：163-165℃(分解、炭化)，[α]D＝+60o，白色結粉末，幾乎無臭。

C₆H₁₁NO₃S＝177.22

依據發明專利：從鮮蒜中制備蒜氨酸的方法(ZL?001012444)及從鮮蒜中制備蒜氨酸的生產工藝(ZL?03100420·2)：符合藥典規定的大蒜，經脫皮、純水洗凈，微波照射5-10分鐘或沸水煮沸5-10分鐘使蒜酶滅活。打漿、純水或5-70％乙醇提取、濃縮、精濾、離子交換柱吸附、氨水洗脫、濃縮、噴霧干燥、重結晶等步驟，制備蒜氨酸原料藥。HPLC測定含量≥90％。

2、蒜酶(Alliinase，EC?4.4.1.4)又名蒜氨酸裂解酶、烯丙基半胱氨酸亞砜酶(Alliin?lyase，S-allyl-L-cysteine?sulfoxide?lyase)。屬二聚體糖蛋白，兩個亞基分子量均為51.5KDa。結晶呈黃色，無臭，等電點pH：4.9。

依據發明專利：從鮮蒜中制備蒜酶的生產工藝(ZL?03100419·9)：在低溫車間(0-3℃)，符合藥典規定的大蒜，經脫皮、純水洗凈、膠體磨破壁打漿、緩沖保護液提取蒜酶，經(NH4)2SO4或PEG-4000～8000沉淀蒜酶，連續式低溫管式離心機收集沉淀，緩沖保護液復溶。兩組超濾裝置除去大分子和小分子，冷凍干燥，得到蒜酶原料藥。以蒜氨酸為底物，經HPLC測定，蒜酶活力≥1000IU/g。

3、大蒜辣素(Alliicin)化學名：二烯丙基硫代亞磺酸酯(2-propene-1-sulfinothioic?acid?S-2-propenyl?ester)。常溫下為淡黃色易揮發粘稠液體，有濃烈氣味。密度：1.112g/cm³。熔點：25℃(分解)，微溶于水。在空氣中數小時即分解變質。

2[C₆H₁₁NO₃S]＝2×177.2＝354.4?????[C₆H₁₀OS₂]＝162.3

兩分子蒜氨酸被蒜酶催化裂解生成一分子大蒜辣素。即354.4克蒜氨酸(2[C₆H₁₁NO₃S]＝2×177.2＝354)可生成大蒜辣素162.3克([C₆H₁₀OS₂]＝162)。加入蒜氨酸純度“C”及反應系數(0.9)。得到以下關系式：

發明內容

本發明的目的在于，針對上述問題，提出一種抗腫瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制備方法，以實現配方合理、制備簡單、純度高、性能穩定的優點。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：

一種抗腫瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制備方法，分兩步：

第一步，提取大蒜辣素，步驟為：

(1)、在充滿氬氣或高純氮的容器中加入脫氧純水和蒜酶，其中脫氧純水∶蒜酶＝1000～2000ml∶35.4g，此比例可按照產量和濃度的不同要求，加以擴大或縮小。充分攪拌使蒜酶充分溶解，調節水浴溫度至25-35℃，控制pH值在6.5-8.5范圍內；

(2)、配制蒜氨酸溶液，其中蒜氨酸∶脫氧純水＝35.4∶500～1000ml，將蒜氨酸溶液緩慢滴加入上述容器，其中蒜氨酸∶蒜酶＝1mg∶1～2IU，充分攪拌，并連續通入氬氣或高純氮使容器內充滿高純氮或氬氣；；

(3)、滴加完畢后繼續攪拌，反應總時間20～40分鐘。得到含大蒜辣素等成分的酶解反應溶液，立即用冰水置換水浴中的溫水，水浴溫度降至0℃(有過量冰塊)，最后利用1000～5000D超濾膜除去蒜酶得到大蒜辣素水溶液。

第二步，在潔凈生物安全柜(無菌)環境下，將步驟一中提取的大蒜辣素用預冷至0-4℃的溶劑稀釋得到大蒜辣素溶液；