[發明專利]硫酸軟骨素提取工藝

無效

• 申請號: 201010205175.8
• 申請日: 2010-06-19
• 公開（公告）號: CN101851300A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 陳高峰
• 申請（專利權）人: 江西海鑫貿易有限公司
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08;A61P9/10;A61P13/12;A61P19/02;A61P25/06;A61P27/16;A61P29/00;A61P37/04
• 代理公司: 宜春贛西專利代理事務所 36121
• 代理人: 朱兵

技術領域：本發明涉及一種硫酸軟骨素提取工藝。

背景技術：硫酸軟骨素(Chondroitin，CS)以下簡稱CS，是動物細胞外基質中一種重要的糖胺聚糖，是一種聚陰離子酸性粘多糖。硫酸軟骨素為白色或微黃色粉末，無臭，無味，具有吸濕性，易溶于水，難溶于甲醇，乙醇，乙醚，丙酮和冰醋酸等有機溶劑。應用廣泛具有促進冠狀動脈血液循環，降血脂、抗凝血、抗炎癥及抗腫瘤等生理活性、臨床上可用于預防動脈粥狀硬化、提高機體免疫力、治療風濕病、腎炎、關節炎、偏頭痛、神經痛、腰痛、老年肩痛、四肢麻木及由鏈霉素引起的聽覺障礙等病癥。作為食品添加劑，硫酸軟骨素CS可用于食品的乳化、保濕和祛除異味，可制成美容產品和保健食品。

目前硫酸軟骨素的提取大多采用堿提取，酶法，超聲輔助法等方法，如專利號為200410072346.9《硫酸軟骨素的提取方法》及200510027279.3《硫酸軟骨素的制備方法》，這些發明工藝在提取過程中加入單一的胰蛋白酶進行酶解，其在生產過程中去除溶液中蛋白質效果差，生產的CS產品純度不高。且采用真空濃縮噴霧干燥設施和工序，得率低，還需要使用亞硝酸鹽為保護劑等，這些工藝存在步驟繁瑣，操作困難，生產周期長，設備投資大，成本高，產品純度和得率都偏低，質量不穩定，活性不夠的問題，影響企業生產的經濟效益。

發明內容：本發明的目的就是要提供一種硫酸軟骨素提取工藝，利用復合酶解，冷凍干燥技術，現實工藝生產操作方便，生產周期短，分離效率及得率高，硫酸軟骨素活性強的提取工藝方法。

本發明的技術方案按下列工藝步驟進行：(1)原料處理：將畜禽結締組織，于80-100℃水中煮10-80min，去除雜質，于50-90℃溫度下干燥并粉碎；

(2)堿提：于粉碎后的結締組織中按料液體積比1∶5-8比例加入濃度為2-6wt％的一價金屬氫氧化物溶液，浸提、過濾除渣得堿提液，并調整堿提液PH至6.5-8；

(3)酶解：于所述堿提液中加入占其重量0.5-1.5％的復合酶，控制酶解溫度40-60℃，時間2-4h后，制得粗酶解液，滅酶處理，得酶解液；

(4)吸附：將所述的酶解液其PH值調整至6-7，用活性炭吸附1-2h后，靜置，過濾得吸附濾液；

(5)脫蛋白：向吸附濾液中加入占其重量5-12％的蛋白沉淀劑，并不斷攪拌，沉淀，得上清液；

(6)醇沉，干燥：于上清液中加入乙醇以體積比上清液∶乙醇為1∶2-6；攪拌后靜置5小時以上，至沉淀完全，過濾；沉淀物用乙醇洗滌后用堿金屬鹽溶液溶解，離心分離，得離心溶液，將離心溶液再用乙醇沉淀得沉淀物，沉淀物經冷凍干燥制得硫酸軟骨素。所述堿金屬鹽溶液是NaCl和/或KCl溶液。

冷凍干燥是工業化生產中常用的干燥技術。

本發明所述一價金屬氫氧化物溶液為NaOH和/或KOH溶液，提取過程中采用間歇攪拌。

本發明酶解中使用復合酶是堿性蛋白酶、風味蛋白酶、和/或脂肪酶的復合。也可以是胰酶、木瓜蛋白酶、和/或脂肪酶的復合。酶解過程在加入復合酶后于恒溫下不斷攪拌進行酶解2小時以上，制得粗酶解液；滅酶處理是將粗酶解液于80-95℃下滅酶5-20min；滅去酶的活性；再加入脂肪酶水解粗酶解液中的少量脂肪后，再重復上述滅酶處理一次制得酶解液。

本發明所述蛋白沉淀劑為三氯乙酸溶液。

本發明所用乙醇為含量80-90％乙醇質量濃度，所述堿金屬鹽溶液優選濃度為1-5Wt％NaCl或KCl溶液。

本發明提取工藝流程：畜禽結締組織→原料處理→粉碎→堿提→復合酶解→吸附→脫蛋白→醇沉→冷凍干燥→成品。

本發明采用復合酶解，冷凍干燥等工藝技術提取硫酸軟骨素，運用物理和化學技術相結合大大提高了CS提取率及純度和活性，產品純度達95.5％，產率達12％以上。

本發明和傳統提取工藝相比還具如下創新，采用傳統工藝濃堿、稀堿生產工藝存在步驟繁瑣，周期較長，生產過程中CS受到不同程度破壞，產品質量的收率不穩定，收率偏低，溶液顏色加深，乙醇耗量大，生產成本較高。同時生產過程中排放大量酸、堿、鹽等物質，對水環境造成極嚴重污染，且排放處理困難或處理費太高。本發明工藝稀堿-酶解法反應條件溫和，工藝較簡單，CS中的硫酸根離子等成分經酶解后純度均有顯著提高，并且有多種生物活性，多糖純度相應大大提高。本發明采用復合酶解、冷凍干燥技術的提取，可提高硫酸軟骨素的提取率及純度。