[發明專利]一種門冬氨酸鳥氨酸雜質的分析檢測方法

有效

• 申請號: 201010204754.0
• 申請日: 2010-06-21
• 公開（公告）號: CN102288687A
• 公開（公告）日: 2011-12-21
• 發明（設計）人: 陳蔚江;王朝東
• 申請（專利權）人: 武漢啟瑞藥業有限公司;上海美悅生物科技發展有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/60
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技術領域

本發明屬于分析化學領域，具體涉及一種使用HPLC法分析檢測門冬氨酸鳥氨酸雜質的方法，更具體地說，涉及一種分析檢測鳥氨酰胺、或含鳥氨酰胺雜質的藥物或其制劑的方法。

背景技術

鳥氨酸或其鹽已廣泛應用于食品、藥品中，經研究發現，游離的鳥氨酸在溶液中有自身聚合現象，通過自身聚合會形成一個內酰胺結構，即鳥氨酰胺，其結構式如下所示：

門冬氨酸鳥氨酸是由鳥氨酸與門冬氨酸反應形成的一種穩定的鹽，可作為藥物治療肝性昏迷。在對門冬氨酸鳥氨酸原料藥和其制劑進行質量研究后發現，門冬氨酸鳥氨酸在溶液中存在游離的鳥氨酸，游離的鳥氨酸也會發生自身聚合現象，而且鳥氨酰胺是其主要的雜質。

鳥氨酰胺無治療作用，容易引起人體不良反應及藥物刺激性，其含量多少直接影響了門冬氨酸鳥氨酸或其制劑的質量，也決定了藥品的保質期長短。然而，現有的門冬氨酸鳥氨酸及其制劑的藥品質量標準中沒有明確收錄有關該雜質的定量和定性的方法，尚無文獻報道能準確分析檢測該雜質的方法。

上述問題同樣會出現在其他含雜質鳥氨酰胺的藥物或制劑中，如鹽酸鳥氨酸。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是解決如何準確地分析檢測含鳥氨酰胺雜質的藥物或其制劑中的雜質鳥氨酰胺。本發明為解決以上技術問題，提供了一種鳥氨酰胺的分析檢測方法，用于分析檢測含鳥氨酰胺雜質的藥物或其制劑中的雜質鳥氨酰胺，本方法特別適合分析檢測鳥氨酸鹽或其制劑、門冬氨酸鳥氨酸或其制劑，也適合分析檢測鳥氨酰胺或其鹽。

本發明提供的技術方案是：

一種鳥氨酰胺的分析檢測方法，包括：

a.取鳥氨酰胺或其鹽、或含鳥氨酰胺雜質的藥物或其制劑，用水、與水混溶的有機溶劑或流動相溶解，配成含鳥氨酰胺1～200μg/mL的溶液；

b.取上述溶液適量，注入到高效液相色譜柱中，用流動相進行沖洗，所述高效液相色譜柱的填充劑為硅烷鍵合硅膠；

c.使用波長為190～250nm的紫外光檢測。

所述鳥氨酰胺鹽選自鳥氨酰胺無機酸鹽、鳥氨酰胺有機酸鹽、鳥氨酰胺金屬鹽和鳥氨酰胺銨鹽；優選鹽酸鳥氨酰胺、硫酸鳥氨酰胺、乙酸鳥氨酰胺、甲磺酸鳥氨酰胺、對甲苯磺酸鳥氨酰胺，更優選鹽酸鳥氨酰胺。

所述的含鳥氨酰胺雜質的藥物或其制劑，優選鳥氨酸鹽或其制劑、門冬氨酸鳥氨酸或其制劑，例如鹽酸鳥氨酸、門冬氨酸鳥氨酸以及門冬氨酸鳥氨酸凍干粉針劑、注射液、顆粒劑、片劑、散劑等。

上述鳥胺酰胺溶液的配制可使用水、與水混溶的溶劑或流動相，優選用水或流動相作為溶劑；配制的含鳥氨酰胺的濃度優選1～100μg/mL。

上述與水混溶的有機溶劑選自醇類、腈類或含氧雜環類有機溶劑，優選甲醇、乙醇、乙腈或四氫呋喃，更優選甲醇或乙腈。

所述流動相由無機鹽水溶液與色譜純有機溶劑組成，所述無機鹽水溶液含離子對試劑0.01％～10％g/L、含無機鹽0.01～1mol/L，無機鹽水溶液與色譜純有機溶劑的體積比為99∶1～80∶20。

所述離子對試劑選自烷基磺酸鹽、烷基鹵化銨、烷基磷酸銨和烷基硫酸銨；所述無機鹽選自鉀或鈉的磷酸鹽、碳酸鹽、枸櫞酸鹽、C₂-C₆羧酸鹽、馬來酸鹽和富馬酸鹽；所述色譜純有機溶劑為醇類或腈類有機溶劑。

上述流動相中：

無機鹽水溶液與色譜純有機溶劑的體積比優選99∶1～99∶10，最優選95∶5；

無機鹽水溶液優選含離子對試劑0.01％～1％g/L，更優選0.1％～0.5％g/L；

無機鹽水溶液優選含無機鹽0.05～0.5g/L。

所述離子對試劑優選己烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、任烷磺酸鈉或癸烷磺酸鈉，更優選庚烷磺酸鈉。

所述無機鹽優選磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、枸櫞酸鈉、乙酸鈉、馬來酸鈉或富馬酸鈉，更優選磷酸二氫鉀。

所述色譜純有機溶劑優選甲醇或乙腈，更優選乙腈。

本發明還提供以下優選的流動相：

由磷酸二氫鉀水溶液與乙腈組成，磷酸二氫鉀水溶液與乙腈的體積比為99∶1～90∶10，最優選95∶5；磷酸二氫鉀水溶液含庚烷磺酸鈉0.01％～1％g/L，優選0.1～0.5％g/L；磷酸二氫鉀水溶液含磷酸二氫鉀0.01～1mol/L，優選0.05～0.5mol/L。