[發(fā)明專利]對四環(huán)素一族具有特異性識別能力的分子印跡聚合物的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010204135.1
• 申請日: 2010-06-21
• 公開（公告）號: CN101857664A
• 公開（公告）日: 2010-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王鵬;荊濤;胡小鐘
• 申請（專利權(quán)）人: 湖北出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心
• 主分類號: C08F222/38
• 分類號: C08F222/38;C08F226/06;C08F220/06;C08J9/26;B01J20/285;B01J20/30
• 代理公司: 武漢華旭知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 42214
• 代理人: 劉榮;周宗貴

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種對四環(huán)素一族具有特異性識別能力的分子印跡聚合物的制備方法，屬于新材料領(lǐng)域。

背景技術(shù)

四環(huán)素類藥物是由鏈霉菌產(chǎn)生或經(jīng)半合成制取的一類堿性廣譜抗生素，可用于防止禽畜病害，促進幼年禽畜生長，因此作為獸藥被廣泛的應用。但是，不合理地使用該類藥物，如用藥劑量過大、用藥時間過長、濫用藥物及不遵守休藥期提前屠宰等，導致該類藥物及其代謝產(chǎn)物殘留于動物的肌肉、蛋、奶、臟器組織中。人類長期攝入含四環(huán)素類抗生素殘留的食品后，藥物不斷在體內(nèi)蓄積，當濃度達到一定量后，就會對人體產(chǎn)生毒性作用，主要表現(xiàn)為對胃、腸、肝臟的損害及牙齒的染色等，還會造成過敏反應，二重感染，致畸胎作用，對人類的健康構(gòu)成潛在的危害。因此，世界食品法典委員會對禽肉中四環(huán)素類抗生素殘留有嚴格的限量要求，國際貿(mào)易中對其限量也有嚴格規(guī)定。因此，開展食品中四環(huán)素類抗生素的殘留檢測具有十分重要的現(xiàn)實意義。

然而，傳統(tǒng)的檢測方法主要依靠固相萃取技術(shù)，但是傳統(tǒng)固相萃取吸附劑與目標物之間的作用力是非特異性的，通常需對萃取和洗脫條件進行仔細選擇，因而對不同基質(zhì)的分離與分析需要選擇不同的柱填料，從而限制了固相萃取技術(shù)的進一步發(fā)展。為了提高柱效與重現(xiàn)性、擴大其應用領(lǐng)域，亟待開發(fā)研制出新型高選擇性識別能力填料基質(zhì)。分子印跡聚合物以其對模板分子特異性的吸附，已成為當前樣品前處理中濃縮和凈化的首選。吳平谷等以鹽酸四環(huán)素為模板分子制備了一種四環(huán)素分子印跡聚合物并制備了一種特異性吸附四環(huán)素固相萃取柱(專利申請?zhí)枺?00710070753)。張大兵等同樣以鹽酸四環(huán)素為模板分子制備了一種四環(huán)素分子印跡聚合物用于水樣品中四環(huán)素的直接進化處理(專利申請?zhí)枺?00810202645)。然而這些分子印跡聚合物只具有一種模板分子，且只對四環(huán)素這種單一物質(zhì)具有特異性的吸附能力。在實際檢測工作中，食品中含有多種四環(huán)素類抗生素的殘留，涉及土霉素、四環(huán)素、去甲金霉素、金霉素、強力霉素、4-差向土霉素、4-差向四環(huán)素、4-差向金霉素、二甲胺四環(huán)素和甲烯土霉素等10種獸藥的殘留檢測。僅特異性識別四環(huán)素的分子印跡聚合物難以滿足實際工作的需要，亟待開發(fā)研制出一種對四環(huán)素一族均有特異性識別能力的的分子印跡聚合物，實現(xiàn)對10種四環(huán)素類抗生素的特異性識別。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于彌補上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種對四環(huán)素一族具有特異性識別能力的分子印跡聚合物的制備方法，該方法采用雙模板分子，操作簡單，制備出的分子印跡聚合物對10種四環(huán)素類抗生素具有特異性的吸附，能夠快速、靈敏、準確、高效地將樣品中的四環(huán)素類抗生素殘留物進行富集凈化。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

一種對四環(huán)素一族具有特異性識別能力的分子印跡聚合物的制備方法，包括以下步驟：

(1)以摩爾比為5∶5～9∶1的金霉素和土霉素為模板分子，以四乙烯吡啶或甲基丙烯酸為功能單體，N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺為交聯(lián)劑，偶氮二異丁腈為引發(fā)劑，將模板分子、功能單體、交聯(lián)劑和引發(fā)劑溶于乙腈中，使模板分子在乙腈中的濃度為0.1～1mol/L，模板分子與功能單體的摩爾比為1∶1～1∶10，功能單體∶交聯(lián)劑∶引發(fā)劑的摩爾比為1∶1～10∶0.01～0.1，得到混合液；

(2)將混合液密封后，于45～60℃攪拌條件下充分反應，生成印跡聚合物；

(3)以乙酸的甲醇溶液為提取液，對印跡聚合物進行提取以去除模板分子，再用甲醇或乙腈提取去除乙酸分子，最后將印跡聚合物置于真空干燥箱中干燥至衡重，得到對四環(huán)素一族具有特異性識別能力的分子印跡聚合物。

步驟(1)中所述功能單體為甲基丙烯酸。

步驟(2)中是將混合液超聲脫氣5～10min，再通氮氣5～10min除去氧分子后密封。

步驟(3)中所述乙酸的甲醇溶液中，乙酸的體積百分比濃度為10～30％，最佳為10％；所述提取方法為索氏提取。

上述方法的最佳制備條件為：將金霉素、土霉素、甲基丙烯酸、N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺和偶氮二異丁腈溶于乙腈中，使金霉素和土霉素在乙腈中的總濃度為1mol/L，金霉素、土霉素、甲基丙烯酸、N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺和偶氮二異丁腈的摩爾比為1mmol∶1mmol∶8mmol∶40mmol∶0.08mmol，得到混合液；將混合液密封后，于50℃攪拌條件下反應18小時。