[發(fā)明專利]一種馬來酸桂哌齊特中氯乙酰吡咯啶哌嗪的測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010202975.4
• 申請日: 2010-06-18
• 公開（公告）號: CN101887050A
• 公開（公告）日: 2010-11-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周芳;王穎
• 申請（專利權(quán)）人: 王穎
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/36
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所 11130
• 代理人: 王為

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種化學(xué)藥物的檢測方法，特別是一種馬來酸桂哌齊特的高效液相色譜測定方法。

背景技術(shù)：

馬來酸桂哌齊特，化學(xué)名為：(E)-1-{4-[〔3′、4′、5′-三甲氧基肉桂酰基)]-1-哌嗪}乙酰吡咯啶順丁烯二酸鹽，英文名為Cinepazide?Maleate。是一種具有多種藥物作用的新藥，療效確切，不良反應(yīng)小，具有擴(kuò)張血管和促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)代謝的雙重作用，是一種末梢血管擴(kuò)張劑，臨床上用于治療心腦血管病。

馬來酸桂哌齊特的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

馬來酸桂哌齊特的合成可以采用以下方法：

以3，4，5-三甲氧基肉桂酸為原料，與氯乙酰吡咯啶哌嗪反應(yīng)生成桂哌齊特游離堿，再與馬來酸成鹽，在該合成方法中氯乙酰吡咯啶哌嗪作為原料可能存留在最終產(chǎn)物中，所以馬來酸桂哌齊特產(chǎn)品中可能帶有氯乙酰吡咯啶哌嗪雜質(zhì)。

氯乙酰吡咯啶哌嗪(簡稱B+C)結(jié)構(gòu)式如下：

現(xiàn)有國家標(biāo)準(zhǔn)中采用的方法，B+C色譜峰與馬來酸桂哌齊特中的馬來酸的色譜峰保留時(shí)間相同，無法對馬來酸桂哌齊特產(chǎn)品中殘存或產(chǎn)生的B+C有效檢出，進(jìn)行控制。我們經(jīng)過研究，采用本發(fā)明的方法可以有效檢出產(chǎn)品中可能殘留的B+C。

為此，本發(fā)明公開了一種馬來酸桂哌齊特中氯乙酰吡咯啶哌嗪(以下簡稱B+C)的分離測定方法，本發(fā)明采用高效液相色譜法，用兩種色譜柱分離測定馬來酸桂哌齊特中含有的B+C。本方法能準(zhǔn)確測定B+C的含量，有效控制馬來酸桂哌齊特的質(zhì)量，從而確保了藥品的安全性、有效性和可靠性，具有實(shí)際意義。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明提供一種馬來酸桂哌齊特產(chǎn)品中作為雜質(zhì)的氯乙酰吡咯啶哌嗪的分離測定方法。

本發(fā)明的測定方法1，其特征在于選用親水作用色譜(Hydrophilic?InteractionChromatography，HILIC)色譜柱，采用一～四根串聯(lián)，優(yōu)選一～兩根串聯(lián)。以甲醇、乙腈或其混合物為有機(jī)相，與水相混合的溶劑作為流動相。甲醇與水相的比例為：90～10∶10～90。優(yōu)選：40～10∶60～90。最優(yōu)選為10∶90。或有機(jī)相為乙腈，與水相混合的溶劑作為流動相，乙腈與水相的比例為：90～10∶10～90。優(yōu)選：40～10∶60～90。最優(yōu)選為10∶90。

本發(fā)明的測定方法2，其特征在于選用型號為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以甲醇為有機(jī)相，與水相混合的溶劑作為流動相。甲醇與水相的比例為：90～10∶10～90。優(yōu)選：40～20∶60～80。最優(yōu)選為20∶80。

本發(fā)明的測定方法，其特征是水相可以為磷酸鹽溶液，所述磷酸鹽選自磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、磷酸氫二銨中的一種或其混合物。所述磷酸鹽溶液為磷酸氫二鈉溶液，其濃度為0.05mol/L。優(yōu)選的所述磷酸鹽溶液為0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液，用磷酸調(diào)pH值為3.0～6.0。最優(yōu)選的所述磷酸鹽溶液為0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液。

本發(fā)明的測定方法，其特征是檢測波長為200nm～400nm，優(yōu)選的檢測波長為210nm。

本發(fā)明的測定方法，其特征是柱溫為10～50℃。優(yōu)選的柱溫為25℃。

本發(fā)明的測定方法，其特征是流速為0.1ml/min～5ml/min。優(yōu)選的流速為0.5ml/min～1.0ml/min。

本發(fā)明的測定方法，其特征是供試品溶液為每1ml約含馬來酸桂哌齊特0.5～10mg的溶液。優(yōu)選0.5mg；B+C對照品溶液為每1ml約含0.5～10μg的溶液。優(yōu)選0.5～2.5μg。

本發(fā)明的測定方法，其特征是精密量取供試品溶液、對照品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，按外標(biāo)法以峰面積(或峰高)或峰面積歸一化法計(jì)算B+C的含量。

本發(fā)明的測定方法，優(yōu)選采用以下步驟：取馬來酸桂哌齊特適量，加流動相溶解并稀釋制成每1ml約含0.5mg的溶液，作為供試品溶液；流速為1.0ml/min，檢測波長210nm。取供試品溶液20μl，注入高效液相色譜儀，完成馬來酸桂哌齊特與B+C的分離測定。

因此，本發(fā)明的測定方法包括以下三種優(yōu)選的方法：

方法1、采用親水作用色譜(Hydrophilic?Interaction?Chromatography，HILIC)色譜柱，(5μm，100，4.6×250mm)，以乙腈-0.05mol/L磷酸氫二鈉緩沖液(用磷酸調(diào)節(jié)pH至4.5)(10∶90)為流動相，流速為1.0ml/min，檢測波長為210nm。