[發明專利]檢測沙門氏菌血清型的復合基因芯片及其檢測方法

無效

• 申請號: 201010201331.3
• 申請日: 2010-06-13
• 公開（公告）號: CN101955993A
• 公開（公告）日: 2011-01-26
• 發明（設計）人: 馮家望;王小玉;胡松楠;成曉維;游淑珠;鄺筱珊;周新朋
• 申請（專利權）人: 中華人民共和國珠海出入境檢驗檢疫局
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/10
• 代理公司: 廣東秉德律師事務所 44291
• 代理人: 楊煥軍;田學東

1.一種檢測沙門氏菌血清型的復合基因芯片，其特征在于，將用于檢測沙門氏菌血清型的靶基因viaB、tyv、fliC-α、fliC1、rfbJ、fliC2、invA、hilA的探針整合于同一張芯片上，其中各靶基因的探針序列分別為：

TTCAGAATTA?ACCGTAAGGA?TATAGTAAAG?ATGAAATATT；

AGTTTGTACA?TGGTGATATT?CGCAACAAAA?ATGATGTTAC；

ATACTGGTTC?AATTAAGGAT?GGTAAGGTTT?ACTATAACAG；

ACTCTCAGAC?CCTGGGTCTG?GATACGCTGA?ATGTGCAACA；

TTGCGTGAAA?TGTACAACAG?GCGAACAGAT?AAGAGACTTT；

TTACGCGACT?GTCAGTGGAT?ACGATGATGC?CGCAGATACA；

TGTCCTTTGG?TATTAATCCA?ACAATCCATC?AGCAAGGTAG；

GGCGATGAAT?TACGCTCACA?ACACCTGCAG?GATAATCCAA。

2.根據權利要求1所述基因芯片，其特征在于，所述芯片采用硅基生物傳感器芯片。

3.一種檢測沙門氏菌血清型的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)提取被檢測物質的染色體DNA；

2)使用生物標記素標記引物；

3)使用上述被標記的引物以聚合酶鏈反應方法來擴增所述染色體DNA中包含靶基因viaB或tyv或fliC-α或fliC1或rfbJ或liC2或invA或hilA的基因片段；

4)將上述擴增產物與權利要求1所述的復合基因芯片進行雜交；

5)檢測復合基因芯片的雜交信號。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟2)中所述的引物為與靶基因viaB、tyv、fliC-α、fliC1、rfbJ、fliC2、invA、hilA分別相應的八種引物，其中八種引物序列分別為：

viaB引物序列：

正：GCGGCAACATCAGTCCAG，反：GCGGCTCACGTACTCCAAAT；

tyv引物序列：

正：GCTTCCTTGGGAGTAATCTTGCC，反：TGTAGTCATTGCCACTTGACCTG；

fliC-α引物序列：

正：CCTTCGGCTACATTAAGCACTAC，反：GACTGCACCATCATCAGCAACAT；

fliC1引物序列：

正：CTCAGTTCAACGGCGTGAAAGTC，

反：CAATCGTAGTATCGGCATATCCTGT；

rfbJ引物序列：

正：AGACACTTTGATGAAATTGGGCATT，

反：TCTTTCAAACTTACCCCAGCACC；

fliC2引物序列：

正：CGATACTGCTGTAGCTGCTTCCT，

反：GCGGCAACAGTGACTTCATAGGT；

invA引物序列：

正：CGTTGATATTACTTGTGCCGAAGA，

反：CGTTACCCAGAAATACTGACTGCTAC；

hilA引物序列：

正：AACTTACTTTCGCCCATTTCTGC，反：GTTATTTCCTGCGTGGATATTTCTT。