[發(fā)明專利]特定長(zhǎng)度的肝素寡糖的制備方法及用途

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010199546.6
• 申請(qǐng)日: 2010-06-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102277396A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃欣
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 黃欣
• 主分類號(hào): C12P19/00
• 分類號(hào): C12P19/00;C12N9/88;C12R1/15
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種用微生物肝素酶生產(chǎn)肝素寡糖的方法：該方法涉及如下步驟：一種用于生產(chǎn)肝素酶的棒桿菌，培養(yǎng)后制備肝素酶I，取肝素鈉使用反應(yīng)緩沖液進(jìn)行溶解，30℃恒溫水浴10min，加入肝素酶I進(jìn)行恒溫酶解反應(yīng)。控制反應(yīng)在32小時(shí)左右，于100℃的沸水中煮沸4分鐘，滅活肝素酶I終止反應(yīng)，得到肝素寡糖的反應(yīng)液。經(jīng)超濾得分子量小于10kD的低分子肝素，采用Bio-GelP6凝膠色譜柱分離，收集所需分子量的肝素寡糖合并濃縮，經(jīng)脫鹽后，采用制備高效液相進(jìn)行純化，收集，凍干，制成肝素寡糖。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的培養(yǎng)棒桿菌的培養(yǎng)基組成為：每升含NaCL?1g、K₂HPO₄?2.5g、MgSO₄?0.5g、肝素2g，pH至6.5。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，在制備肝素寡糖中的應(yīng)用。