[發明專利]1,4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯對照品的制備方法

無效

• 申請號: 201010199208.2
• 申請日: 2010-06-04
• 公開（公告）號: CN101863935A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發明（設計）人: 李霄;李澤琳;艾萍;孫媛媛;王小利
• 申請（專利權）人: 北京工業大學
• 主分類號: C07H15/203
• 分類號: C07H15/203;C07H1/08
• 代理公司: 北京思海天達知識產權代理有限公司 11203
• 代理人: 張燕慧

1.一種4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯對照品的制備方法，包括以下步驟：

(1)將白及藥材粉碎成粗粉，按照白及粗粉∶溶劑＝1∶4～20(重量)的比例，回流提取1～8小時，濾液回收溶劑，得到流浸膏，其中所述溶劑為甲醇或乙醇，濃度為30～80％；

(2)將上述白及流浸膏加水稀釋，白及流浸膏∶水＝1∶4～10(重量)，稀釋液經大孔吸附樹脂柱富集，以20～80％乙醇為解吸附劑進行洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，得到濃縮液，加硅膠混合均勻，硅膠加入量按白及粗粉∶硅膠＝1∶0.02～0.1(重量)計，室溫干燥，得到干燥粉末；

(3)將上述干燥粉末轉入層析柱，依次以不同比例氯仿-甲醇為洗脫劑進行洗脫，氯仿∶甲醇＝1∶0～0.2、1∶0.2～0.4、1∶0.5～0.9(體積)，依次收集洗脫液，薄層層析檢識，合并1，4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯組分，回收溶劑，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯粗品；

(4)將上述1，4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯粗品進行凝膠柱層析，甲醇或水為洗脫劑進行洗脫，收集洗脫液，薄層層析檢識，合并1，4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯組分，回收溶劑，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯精品；

(5)將上述1，4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯精品進行反相硅膠柱層析，以甲醇-水洗脫，甲醇占水的30～70％(體積)，收集洗脫液，經高效液相檢測，將純度≥98％的1，4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯組分合并，回收溶劑，得到1，4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯對照品。

2.根據權利要求1的方法，其特征在于步驟(1)中所述白及藥材選自蘭科植物白及Bletilla?striata(Thunb.)Reichb.f.的干燥塊莖。

3.根據權利要求1的方法，其特征在于步驟(2)中所述大孔吸附樹脂為非極性或弱極性大孔吸附樹脂。

4.根據權利要求3的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂型號為D101或AB-8型大孔吸附樹脂。

5.根據權利要求1的方法，其特征在于步驟(3)和步驟(4)中薄層層析的顯色條件為10％硫酸乙醇溶液，105℃下加熱顯色。

6.根據權利要求1的方法，其特征在于步驟(4)中所述凝膠為葡聚糖凝膠或羥丙基葡聚糖凝膠。

7.根據權利要求6的方法，其特征在于所述凝膠型號為Sephadex?G-25或Sephadex?LH-20型凝膠。

8.根據權利要求1的方法，其特征在于步驟(5)中所述反相硅膠為C8或C18型反相硅膠。

9.根據權利要求1的方法，其特征在于步驟(5)中高效液相檢測條件：流動相為24％乙腈-水，檢測波長為222nm。