[發明專利]草莓腋芽組織培養的方法

無效

• 申請號: 201010197820.6
• 申請日: 2010-06-03
• 公開（公告）號: CN101836591A
• 公開（公告）日: 2010-09-22
• 發明（設計）人: 郭仰東;趙永欽;王玉玨;劉莉莎
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及植物組織培養領域，特別涉及一種用草莓腋芽進行組織培養的方法。

背景技術

草莓屬多年生草本植物，栽培生產中主要靠匍匐莖進行營養繁殖，經多年種植后，由于感染多種病毒，致使品質及產量降低，經濟效益明顯下降。目前，草莓組培苗已在農業生產中廣泛應用。它對于降低生產成本、提高草莓產品的品質、提高農民經濟收入具有舉足輕重的作用。利用組培快繁技術可對草莓脫毒苗進行快速繁殖及推廣，出苗整齊，可進行周年生產，不受季節限制，實現新品種的工廠化育苗并迅速推廣。

現有的研究中，采用的外植體為：莖尖、葉片、葉柄、根、花藥、花瓣、托葉、子房等，雖然都獲得了成功，但均存在各種各樣的缺陷。例如以莖尖為外植體進行的快繁，主要存在繁殖系數較低的問題；而以葉片、葉柄、根、花藥、花瓣、托葉、子房等為外植體，雖然繁殖系數有較大的提高，但存在變異較大的問題，不能很好地保持原有品種的種性。

在前人研究中，多采用的外植體為：莖尖、葉片、葉柄、根、花藥、花瓣、托葉、子房等，雖然都獲得了成功，但均存在各種各樣的缺陷。例如以莖尖為外植體進行的快繁，主要存在繁殖系數較低的問題；而以葉片、葉柄、根、花藥、花瓣、托葉、子房等為外植體，雖然繁殖系數有較大的提高，但存在變異較大的問題，不能很好地保持原有品種的種性。

發明內容

本發明的目的在于克服上述現有技術的不足，提供一種草莓的組織培養的方法。

本發明提供的草莓的組織培養的方法，是以草莓帶托葉的短縮莖為外植體進行組織培養，得到草莓植株。

上述草莓帶托葉的短縮莖是將草莓幼苗去除短縮莖內部的生長點、葉片和葉柄后，得到的含有托葉的短縮莖。

本發明的草莓的組織培養的方法，包括以下步驟：

1)將上述外植體置于誘導腋芽萌發培養基上培養，誘導腋芽萌發，得到萌發的腋芽；

2)將上述步驟1)得到的腋芽轉接到生根培養基上培養，誘導生根，得到完整再生植株。

上述誘導腋芽萌發培養基是在MS基本培養液中添加6-BA、NAA、碳源和凝膠劑得到的固體培養基；其中6-BA的終濃度是0.5-1.5mg/L，NAA的終濃度是0.1-0.3mg/L；MS基本培養液的溶劑是水、溶質如表1所示。

表1.MS基本培養液的溶質

上述誘導腋芽萌發培養基中6-BA的終濃度最好是1.0mg/L，NAA的終濃度最好是0.2mg/L。

上述腋芽的生根培養是在生根培養基中進行的，該生根培養基是在1/2MS基本培養液中添加IBA、碳源和凝膠劑得到的固體培養基；其中IBA的終濃度是0.1mg/L；

上述1/2MS基本培養液的溶劑是水、溶質如表2所示。

表2.1/2MS基本培養液的溶質

上述草莓植株可以是不同品種的草莓植株，特別是甜查理、豐香、童子一號、紅顏。

上述誘導腋芽萌發培養基和生根培養基中的碳源均可為葡萄糖、麥芽糖或蔗糖等；在誘導腋芽萌發培養基中優選為蔗糖，蔗糖在誘導腋芽萌發培養基中的終濃度可為30g/L；在生根培養基中優選也是蔗糖，蔗糖在生根培養基中的終濃度可為15g/L。

上述誘導腋芽萌發培養基和生根培養基中的凝膠劑均可為瓊脂、卡拉膠或Gelrite等；在兩培養基中均可優選為瓊脂，瓊脂的終濃度均可為8-9g/L。

在本發明中培養基的凝膠劑的用量以能達到培養基的硬度為基礎，可適當調整用量。

本發明是以草莓無菌的帶托葉的短縮莖為外植體，先誘導草莓的腋芽萌發，進而誘導生根獲得再生植株。本發明中腋芽的萌發率均達90.0％以上，生根率可達92.5％以上。本發明可用于多個品種草莓的快速繁殖，如甜查理、童子一號、豐香等。

本發明以腋芽為基礎進行快速繁殖，不僅繁殖系數較高，平均可達5.8以上，而且很好的保持了原由品種的特性，尤其對轉基因珍貴草莓植株的短期擴繁，種質庫保存植株的快繁殖具有廣闊的應用前景。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步說明，但本發明并不限于以下實施例。

下述實施例中，如無特殊說明，均為常規方法。

實施例1、草莓腋芽組織培養獲得再生植株

一、外植體的預處理

在無菌的條件下，將無菌的甜查理幼苗(購自北京市小湯山特菜基地)的葉片、葉柄全部剪除，只保留基部短縮莖和托葉部分，然后用鑷子小心將包裹在短縮莖內部的生長點去除，即得到用于組織培養的帶托葉的短縮莖(外植體)。

二、腋芽的萌發及統計觀察