[發明專利]一種檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒及其制備方法

無效

• 申請號: 201010197684.0
• 申請日: 2010-06-10
• 公開（公告）號: CN102279259A
• 公開（公告）日: 2011-12-14
• 發明（設計）人: 陳韶紅;陳家旭;李浩;周曉農;張永年;郭儉
• 申請（專利權）人: 中國疾病預防控制中心寄生蟲病預防控制所
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/531;G01N21/78
• 代理公司: 上海世貿專利代理有限責任公司 31128
• 代理人: 嚴新德

1.一種檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒，其特征在于：含有兔抗衛氏并殖吸蟲成蟲可溶性抗原的多克隆抗體、酶標記的兔抗衛氏并殖吸蟲成蟲可溶性抗原的多克隆抗體、硝酸纖維薄膜、小牛血清白蛋白的PBST溶液、PBST洗滌液、底物顯色液、陽性對照樣本、陰性對照樣本和聚乙烯反應板。

2.如權利要求1所述的檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒，其特征在于：所述的聚乙烯反應板采用96孔聚乙烯反應板。

3.如權利要求1所述的檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒，其特征在于：所述的小牛血清白蛋白的PBST溶液由小牛血清白蛋白和PBST洗滌液組成，所述的小牛血清白蛋白和PBST洗滌液的重量比為：1∶99。

4.如權利要求1或3所述的檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒，其特征在于：所述的PBST洗滌液由氯化鈉、KH₂PO₄、Na₂HPO₄、KCl、吐溫-20和水組成，在配制PBST洗滌液的過程中，包括一個先配制基液的步驟，所述的基液由氯化鈉、KH₂PO₄、Na₂HPO₄、KCl和水組成，所述的氯化鈉在所述的基液中的重量百分比為0.8％，所述的KH₂PO₄在所述的基液的重量百分比為0.02％，所述的Na₂HPO₄在所述的基液中的重量百分比為0.29％，所述的KCl在所述的基液中的重量百分比為0.02％，余量為水，配制好基液后，再加入吐溫-20，每100ml中加入0.5ml吐溫-20，所述的PBST洗滌液的PH值為7.4。

5.如權利要求1所述的檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒，其特征在于：所述的試劑盒中的底物顯色液由A液、B液和C液組成，所述的A液由3-3-二氨基鄰苯胺、氯化鈉、KH₂PO₄、Na₂HPO₄、KCl和水組成，所述的3-3-二氨基鄰苯胺在A液中的重量百分比為0.1％，所述的氯化鈉在A液中的重量百分比為0.8％，所述的KH₂PO₄在A液中的重量百分比為0.02％，所述的Na₂HPO₄在A液中的重量百分比為0.29％，所述的KCl在A液中的重量百分比為0.02％，余量為A液中的水，所述的B液由4-氯-1-萘酚、甲醇、氯化鈉、KH₂PO₄、Na₂HPO₄、KCl和水組成，所述的4-氯-1-萘酚在B液中的重量百分比為0.05％，所述的甲醇在B液中的重量百分比為20％，所述的氯化鈉在B液中的重量百分比為0.8％，所述的KH₂PO₄在B液中的重量百分比為0.02％，所述的Na₂HPO₄在B液中的重量百分比為0.29％，所述的KCl在B液中的重量百分比為0.02％，余量為B液中的水；所述的C液為過氧化氫的水溶液，所述的過氧化氫在水溶液中的重量百分比或者濃度為30％。

6.如權利要求1所述的檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒，其特征在于：所述的陽性對照樣本為并殖吸蟲病人血清。

7.如權利要求1所述的檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒，其特征在于：所述的陰性對照樣本為正常人血清。

8.一種制備如權利要求1所述的檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒的方法，其特征在于：所述的方法中包括了一個制備兔抗衛氏并殖吸蟲成蟲可溶性抗原的多克隆抗體的步驟、一個制備酶標記的兔抗衛氏并殖吸蟲成蟲可溶性抗原的多克隆抗體的步驟和一個在試劑盒中放置硝酸纖維薄膜、小牛血清白蛋白、PBST洗滌液、底物顯色液、陽性對照樣本、陰性對照樣本、聚乙烯反應板的步驟。

9.如權利要求8所述的檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒的制備方法，其特征在于：在所述的制備兔抗衛氏并殖吸蟲成蟲可溶性抗原的多克隆抗體的步驟中，首先從感染衛氏并殖吸蟲囊蚴的家犬肺部分離取成蟲，制備成蟲可溶性抗原，免疫家兔，純化兔抗衛氏并殖吸蟲成蟲可溶性抗原的多克隆抗體。

10.如權利要求8所述的檢測并殖吸蟲病的診斷試劑盒的制備方法，其特征在于：在所述的制備酶標記的兔抗衛氏并殖吸蟲成蟲可溶性抗原的多克隆抗體的步驟中，采用雙擴散法檢測兔抗衛氏并殖吸蟲成蟲可溶性抗原的多克隆抗體的效價，收取兔血清，純化抗體，提取IgG，用過碘酸鹽標記法標酶。