[發明專利]一種枯草芽孢桿菌、其菌劑、以及其制劑在水果保鮮領域的應用有效

申請號：	201010197538.8	申請日：	2010-06-11
公開（公告）號：	CN101870959A	公開（公告）日：	2010-10-27
發明（設計）人：	宋水山;關軍鋒;宋聰;張霞;馬宏;邱健;黃媛媛;趙芊	申請（專利權）人：	河北省科學院生物研究所;河北省農林科學院遺傳生理研究所
主分類號：	C12N1/20	分類號：	C12N1/20;A23B7/155;A01N63/02;A01P3/00;A01N25/12;A01N25/00;C12R1/125
代理公司：	石家莊新世紀專利商標事務所有限公司 13100	代理人：	董金國
地址：	050051 河***	國省代碼：	河北;13
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種枯草芽孢桿菌及其制劑水果保鮮領域應用
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及一種對采后水果的病菌有抑制作用的具有廣譜抗病原真菌活性的枯草芽孢桿菌，及以所述枯草芽孢桿菌為活性菌的菌劑及其制備方法，及菌劑在水果保鮮領域的應用。

背景技術

我國水果采后腐爛損失嚴重，造成了巨大經濟損失，采后病原微生物的侵染是造成采后腐爛損失的最主要原因，在水果保鮮領域，大量使用化學殺菌劑以防止水果腐敗，但是在水果保鮮中大量使用化學殺菌劑給水果的食用安全造成了很大的影響，如何減少水果保鮮中化學殺菌劑的使用成為公眾十分關注的食品安全問題。

枯草芽孢桿菌Bacillus?subtilis是自然界中廣泛的一種非致病細菌，在土壤、植物根際和植物體內存在有大量的枯草芽孢桿菌，據文獻報道，這些菌株會對植物病原菌起到抑制作用，或是誘導植物產生抗性，有一些菌株對植物還有促生作用，就是常報道的PGPR(Plant?growth?promoting?rhizobacteria)。由于其具有廣譜抗菌活性、極強的抗逆能力、存活時間長、而且對人畜無毒害作用等優點，這就有利于制劑的加工，而且大規模生產工藝簡單，成本較低，運輸也方便，因此，枯草芽孢桿菌越來越多的被引入植病生防領域，是目前一種較為理想的具有生防功能的微生物。

國內研究現狀

河南農科院植保所孔建等從果園中分離到的枯草芽孢桿菌B-903對多種果蔬上的病菌有抑制作用，如番茄早疫病菌、蘋果輪紋病菌等。用于植病生防研究的枯草芽孢桿菌還包括防治蘋果和梨采后青霉病的枯草芽孢桿菌H110，防治西瓜枯萎病菌的B₁₁，防治桃和油桃褐腐病的菌株B-912，防治蘋果霉心病的BL03和XM16等。

國外研究現狀

美國Agraquest公司用枯草芽孢桿菌QST713菌株開發出活菌制劑殺菌劑Sernade，并于2000年通過美國環保局(EPA)的登記，QST713葉面施用能防治蔬菜、櫻桃、葡萄、葫蘆和胡桃的細菌和真菌病害。

發明內容

本發明的目的是提供一種對采后水果的病原菌有抑制作用的具有廣譜抗病原真菌活性的枯草芽孢桿菌，以及以所述枯草芽孢桿菌為活性菌的菌劑，及菌劑的應用。

本發明是采用如下技術方案實現的：枯草芽孢桿菌，命名為枯草芽孢桿菌Bacillus?substilis?J18，保藏單位為中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為CGMCC?No：3665。

一種以枯草芽孢桿菌Bacillus?substilis?J18為活性菌制成的發酵液，其是由如下步驟制成：

(1)制備活化的菌液；

(2)種子培養；

(3)發酵培養：將所述種子培養得到的種子培養液按照接種量為1％～3％加入到發酵培養基中，發酵溫度為25℃～30℃，通氣量為0.3～0.6m³/h，pH值為6.8～7.2，流加食用豆油消泡，不流加調節pH值的酸堿性物質。

流加培養基：葡萄糖15g，酵母膏10g，食用豆油50mL，水1000mL制成混合液滅菌后一起流加；

流加時間：發酵8h開始流加；

發酵周期：34±2h，得發酵液。