[發明專利]一種新型鏈霉菌分泌表達質粒及應用

無效

• 申請號: 201010196933.4
• 申請日: 2010-06-10
• 公開（公告）號: CN102002510A
• 公開（公告）日: 2011-04-06
• 發明（設計）人: 洪斌;朱元軍;王麗非;杜郁;余騰斐;王松梅
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院醫藥生物技術研究所
• 主分類號: C12N15/76
• 分類號: C12N15/76;C12N1/21;C12P21/00;C12R1/465
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 程泳

1.一種表達載體，其為環狀，且可操作地連接有：

源于pSGL1的復制子序列：其由SEQ?ID?NO：1中第5086-7372位所示序列的互補序列構成；

大腸桿菌復制起始區ori序列：其由SEQ?ID?NO：1中第2497-3164位所示序列構成；

氨芐青霉素抗性基因bla序列：其由SEQ?ID?NO：1中第3315-4172位所示序列的互補序列構成；

多克隆酶切位點序列：其由SEQ?ID?NO：1中第1452-1481位所示序列構成；

阿普霉素抗性基因aac(3)IV序列：其由SEQ?ID?NO：1中第204-980位所示序列的構成；

源于鏈霉菌接合轉移的必需區oriT序列：其由SEQ?ID?NO：1中第8602-8713位所示序列構成；

cagAp和ermE*p串聯的強啟動子序列：其由SEQ?ID?NO：1中第1581-2057位所示序列的互補序列構成；和

信號肽序列：其由SEQ?ID?NO：1中第1482-第1580位所示序列的互補序列構成或者由SEQ?ID?NO：1中第1482-第1580位所示序列中第1572位至第1574位的CTG替換為TTA的互補序列構成。

2.權利要求1的表達載體，其為環狀，且由SEQ?ID?NO：1所示序列構成。

3.權利要求1或者2的表達載體，其中還可操作地插入有表達外源蛋白的基因。

4.權利要求3的表達載體，其中的外源蛋白選自細胞因子、肽類生物藥物和功能蛋白。

5.權利要求4的表達載體，其中的外源蛋白是白細胞介素6。

6.宿主細胞，其含有權利要求1或2所述的表達載體。

7.權利要求6的宿主細胞，其為鏈霉菌。

8.權利要求1或2所述的表達載體在鏈霉菌中表達外源蛋白的用途。

9.權利要求8的用途，其中所述的外源蛋白選自細胞因子、肽類生物藥物和功能蛋白，優選白細胞介素6。

10.權利要求8的用途，其中的表達為分泌型表達。