[發明專利]黃臘果皂苷類成分及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201010196515.5
• 申請日: 2010-06-10
• 公開（公告）號: CN101880306A
• 公開（公告）日: 2010-11-10
• 發明（設計）人: 孟大力;陳超;耿劍亮;李銑;李寧
• 申請（專利權）人: 沈陽藥科大學
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00;C07J17/00;A61K36/185;A61K31/704;A61K31/56;A61P35/00;A61P29/00;A61P7/10
• 代理公司: 沈陽杰克知識產權代理有限公司 21207
• 代理人: 李宇彤

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，涉及一種藥物原料的提取制備方法及其應用，具體涉及黃臘果皂苷類成分的制備方法及其應用。

背景技術

黃臘果(Stauntonia?brachyanthera?Hand-Mazz)為木通科野木瓜屬植物，在我國貴州、廣西等省(區)有分布，為常綠木質藤本，其莖在民間主要作木通藥用，具有清熱利尿、通經活絡、鎮痛排膿、通乳等功效，與木通功效相同；果實形態與預知子基本相同，不同點在于預知子成熟后開裂，故又名八月扎、羊開口，黃臘果成熟后不開裂，色黃，民間也把其當作預知子藥用；果皮含有眾多石細胞，民間用于結石。葉在民間亦入藥，用于外感風寒，頭痛胸悶，吐瀉腹脹，黃臘果整個植物都具有一定的藥用價值。(謝宗萬、余友芩.全國中草藥名鑒(上冊)[M].北京：人民衛生出版社，1996：176.)

有關黃臘果的開發與利用近年來越來越受到人們的重視。因為它不僅具有很好的藥用價值，而且其果實也是一種有高營養價值的美味水果。目前以有報道將其果實開發成黃臘果醋，其莖作為木通入藥(汪冶，陳超，梅樹模。侗藥豬腰子(黃臘果)藤莖的生藥學鑒定。)但迄今為止，其在化學研究領域仍是一片空白，本專利將是首次對該植物進行化學成分分離，分析和研究。

發明內容

本發明的目的是提供一系列以齊墩果烷型、降甲基齊墩果烷型和羽扇豆烷型為母核的三萜苷元及其糖苷類化合物，其母核結構如下：

本發明的另一個目的在于應用簡便、安全、價廉和實用的方法制備黃臘果皂苷類成分，并說明其應用，該方法能制備純度較高的一系列以齊墩果烷型和降甲基齊墩果烷型為母核的三萜類化合物。

本發明目的的實現方式如下：

(1)黃臘果原料粗粉1千克，用12倍，10倍和8倍的20％～95％的乙醇溶液80℃下溫浸提取三次(第一次3小時，第二次2小時，第三次2小時)或超聲提取，過濾，合并濾液，濃縮至1升總提取液。

(2)將總提取液采用下述a)或b)方法之一對有效部位進行富集：

a將上述總提取液按大孔吸附樹脂∶藥材為1∶1的比例上已處理好的非極性或弱極性大孔吸附樹脂柱層析分離，采用梯度洗脫法，依次用水、40％、70％、90％的含水乙醇或甲醇洗脫，每個梯度洗脫4～10個柱床體積，合并洗脫液，過濾，濃縮至1升，得黃臘果乙醇洗脫液。

b.將上述總提取液按藥材∶正丁醇為1∶1的比例，用0.5-3倍體積的水飽和正丁醇萃取3-8次，合并正丁醇，得黃臘果正丁醇萃取液。

(3)將上述乙醇洗脫液或正丁醇萃取液經氧化鎂脫色，按每升80克加入氧化鎂回流脫色1小時，過濾，濾液經減壓濃縮、真空干燥得黃臘果總皂苷。

(4)將上述黃臘果總皂苷經正相硅膠柱色譜法、反相柱色譜法、制備高效液相色譜法中的一種方法或多種方法聯合使用，可除去雜質，純化，得到所需的三萜類單體化合物及其純度更高的總皂苷混合物。一般以不同比列的氯仿-甲醇或丙酮-甲醇作為洗脫劑洗脫，可得到部分三萜單體及三萜混合物，如將黃臘果總皂苷提取液經正丁醇萃取、氧化鎂脫色后，用硅膠柱色譜法以二氯甲烷和甲醇為洗脫劑進行梯度洗脫，在二氯甲烷∶甲醇＝100∶5得到一新天然產物3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-3-O去甲齊墩果-12?20(29)-二稀-28-羧酸，在二氯甲烷∶甲醇＝100∶8得到一單體化合物胡蘿卜苷。

(5)將從黃臘果中分離得到的皂苷類單體或混合物單獨或與其它藥物組合作為原料藥應用于抗腫瘤、抗炎、利尿和相關疾病治療的藥劑中。

上述濃縮操作可采用常規濃縮和減壓濃縮，干燥可采用50℃下常規干燥、真空干燥、噴霧干燥或冷凍干燥。

步驟(2)中的大孔吸附樹脂選用非極性樹脂(XAD-4，Diaion?HP-20，D101、D102、D401，D1、D2、D3、D4，HPD-100，X-5)、弱極性樹脂(D-201，HPD-300，AB-8)和中等極性(XAD-6、XAD-7、XAD-8等)的吸附樹脂。

步驟(4)中正相硅膠色譜柱所使用的流動相可以是氯仿或二氯甲烷和甲醇，采用氯仿或二氯甲烷∶甲醇＝50∶1～1∶1的比例梯度洗脫；反相色譜柱的填料可為RP-18，RP-8或RP-2.；所述的高效液相制備方法所使用的流動相為5％～95％的含水甲醇；高效液相色譜柱的填料為八烷基硅烷鍵合硅膠或十八烷基硅烷鍵合硅膠。

本方法為首次對黃臘果植物中的化學成分進行分離、純化和醫藥用途等方面的研究，應用本方法得到的黃臘果總皂苷提取物的收率為23％以上，總皂苷的含量大于35％，含量測定方法可采用香草醛-硫酸法。