[發(fā)明專利]一種培養(yǎng)金龜子綠僵菌的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010195687.0
• 申請(qǐng)日: 2010-06-01
• 公開（公告）號(hào): CN101845397A
• 公開（公告）日: 2010-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃俊生;梁昌聰;楊臘英;代鵬;黃志;劉磊;王國(guó)芬;謝玉萍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

1.一種培養(yǎng)金龜子綠僵菌(Metarhizium?anisopliae)的方法，包括如下步驟：1)用液體培養(yǎng)基對(duì)金龜子綠僵菌(Metarhizium?anisopliae)進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng)，將容器內(nèi)的所有物質(zhì)記作液體發(fā)酵產(chǎn)物；2)將所述液體發(fā)酵產(chǎn)物接種于固體發(fā)酵培養(yǎng)基，進(jìn)行固體發(fā)酵培養(yǎng)，得到金龜子綠僵菌。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟1)中，所述液體發(fā)酵培養(yǎng)的條件為：溫度為28℃，通入空氣的量為10L/min/35L所述液體培養(yǎng)基和所述容器內(nèi)的氣壓為0.03Mpa。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步驟1)中，液體發(fā)酵培養(yǎng)至液體發(fā)酵產(chǎn)物呈如下狀態(tài)：液體發(fā)酵產(chǎn)物中有菌絲及液生孢子，液體發(fā)酵產(chǎn)物中菌絲體中無液泡，液體發(fā)酵產(chǎn)物中無斷裂的菌絲。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述步驟1)中，液體發(fā)酵培養(yǎng)的時(shí)間為65小時(shí)～72小時(shí)，具體為65小時(shí)、68小時(shí)或72小時(shí)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述步驟1)中，所述液體培養(yǎng)基由玉米粉、豆餅粉、蛋白胨、KH₂PO₄、MgSO₄、KCl、FeSO₄·7H₂O和水組成；所述各組分的配比為：20g玉米粉∶40g豆餅粉∶2.5g蛋白胨∶0.5gKH₂PO₄∶0.5gMgSO₄∶0.5gKCl∶0.01gFeSO₄·7H₂O∶1000ml水。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中，所述固體發(fā)酵培養(yǎng)的方式按照如下a階段、b階段和c階段依次進(jìn)行：

a階段：在溫度為24℃和濕度為95％(體積百分含量)的條件下培養(yǎng)；

b階段：在溫度為28℃和濕度為80％(體積百分含量)的條件下培養(yǎng)；

c階段：在溫度為28℃和濕度為40％(體積百分含量)的條件下培養(yǎng)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中，所述a階段的培養(yǎng)時(shí)間為2天-3天；所述b階段的培養(yǎng)時(shí)間為2天；所述c階段的培養(yǎng)時(shí)間為2天。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中，所述接種的量為：使所述液體發(fā)酵產(chǎn)物與固體發(fā)酵培養(yǎng)基的體積比為20∶80。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任一所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中，所述固體發(fā)酵培養(yǎng)基由甘蔗渣、麩皮、玉米粉、KH₂PO₄、MgSO₄、KCl和水組成；所述各組分的質(zhì)量份數(shù)比為：300-400份甘蔗渣∶150-200份麩皮∶90-150份玉米粉∶0.5份KH₂PO₄∶0.5份MgSO₄∶0.5份KCl∶300-400份水；

所述各組分的質(zhì)量份數(shù)比具體為：300份甘蔗渣∶150份麩皮∶150份玉米粉∶0.5份KH₂PO₄∶0.5份MgSO₄∶0.5份KCl∶300份水，或350份甘蔗渣∶180份麩皮∶120份玉米粉∶0.5份KH₂PO₄∶0.5份MgSO₄∶0.5份KCl∶350份水，或400份甘蔗渣∶200份麩皮∶90份玉米粉∶0.5份KH₂PO₄∶0.5份MgSO₄∶0.5份KCl∶400份水。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一所述的方法，其特征在于：所述麩皮為小麥麩皮；

所述步驟2)中，所述培養(yǎng)過程中包括翻料的步驟；

所述金龜子綠僵菌(Metarhizium?anisopliae)為金龜子綠僵菌(Metarhiziumanisopliae)JF813，ACCC編號(hào)為31518。