[發明專利]一種制作微生物肥料高濃度菌粉的方法

在審

• 申請號: 201010192330.7
• 申請日: 2010-06-07
• 公開（公告）號: CN101863685A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發明（設計）人: 王來福
• 申請（專利權）人: 王來福
• 主分類號: C05F11/08
• 分類號: C05F11/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種制作微生物肥料高濃度菌粉的方法。

背景技術

膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus?mucilaginosus)是一種能分解硅酸鹽礦物的細菌，國內一些學者也把它稱為硅酸鹽細菌。這種細菌的形態特征為：菌體粗長呈桿狀，有厚莢膜；芽孢大，孢囊壁厚，成熟孢囊不膨大；在硅酸鹽細菌專用培養基平板上菌落為圓形，無色透明，5-6天后中部有渾濁點，邊緣透明，表面光滑，粘稠，彈性大，可拉成絲狀。

膠凍樣芽孢桿菌的重要特性是具有轉化土壤中的無效鉀、磷及鎂、鐵、鉬等微量元素的機能，改善植物鉀、磷和某些微量元素的營養水平，同時產生多種生理活性物質，促進植物生長發育，改善品質，增強植株的抗寒耐旱和抵御病蟲害的作用。目前，在促進土壤無效磷鉀的轉化、增加土壤磷鉀的供給、提高作物產量的生物肥料中，這類細菌是最好的菌種。

側孢芽孢桿菌(Bacillus?laterosporus)屬于芽孢桿菌屬，革蘭氏染色陽性，可變為陰性，芽孢為橢圓形，側生、中生或近中生，孢囊膨大，游離芽孢一邊比另一邊厚(獨木舟形)。

側孢芽孢桿菌能促進植物根系生長，增強根系吸收能力，從而提高作物產量；抑制植物體內外病原菌繁殖，減輕病蟲害，降低農藥殘留；改良疏松土壤，解決土壤板結現象，從而活化土壤，提高肥料利用率；增強植物新陳代謝，促進光合作用和強化葉片保護膜，抵抗病原菌；增強光合作用，提高化肥利用率，降低硝酸鹽含量。固化若干重金屬，降低植物體內重金屬含量。

目前，對于微生物肥料含菌濃度低，使用不方便，運輸不便捷等缺陷，因此如何得到高濃度菌粉成為如何得到高效、方便的微生物肥料的重要技術之一。

發明內容

本發明的目的是通過設計采用一套參數合理、工藝穩定、工業化程度高且符合生物菌種特點的生產設備和生產工藝方法，利用成熟的、已商品化的膠凍樣芽孢桿菌、側孢芽孢桿菌來生產復合生物肥料用芽孢菌粉。本發明提供的芽孢菌粉生產投資成本低；技術工藝要求低；生產靈活機動，使用方便快捷；菌粉生物穩定性好，濃度高，運輸方便，耐貯藏。

本發明是這樣實現的：

膠凍樣芽胞桿菌發酵工藝流程

將膠凍樣芽孢桿菌種接種在適宜的斜面培養基上，待菌種生長完全后，置于4℃左右的冰箱中保藏，制做斜面菌種。取少量菌種，轉接至克氏瓶斜面培養基上，進行擴大培養(30℃恒溫培養2-5天)，待菌種生長完全后，置于4℃左右的冰箱中保藏，制成克氏瓶斜面菌種。將菌種于30℃恒溫培養2-5天，加40-50ml無菌水洗滌，制成芽孢懸液。將500L種子罐中培養基于0.11MPa，蒸汽壓力實罐消毒30分鐘，將芽孢懸液接種到種子罐中，30℃培養15-20h，罐壓0.05MPa，通氣比1∶1V/Vm，菌體培養至對數生長后期。將5m³發酵罐中培養基于0.11MPa，蒸汽壓力實罐消毒30分鐘。將菌體及培養液一并轉移至5m³發酵罐中，30℃培養30-40h，罐壓0.05MPa，通氣比1∶0.7-1V/Vm，菌體90％以上形成芽孢后，芽孢脫落50-60％，發酵結束，最終得到芽孢含量在6-7億/克的發酵液。

側孢芽孢桿菌發酵工藝流程

將側孢芽孢桿菌種接種在適宜的斜面培養基上，待菌種生長完全后，置于4℃左右的冰箱中保藏，制做斜面菌種。取少量菌種，轉接至克氏瓶斜面培養基上，進行擴大培養(34-35℃恒溫培養2-5天)，待菌種生長完全后，置于4℃左右的冰箱中保藏，制成克氏瓶斜面菌種。將菌種于34-35℃恒溫培養2-5天，加40-50ml無菌水洗滌，制成芽孢懸液。將500L種子罐中培養基于0.11MPa，蒸汽壓力實罐消毒30分鐘，將芽孢懸液接種到種子罐中，34-36℃培養10-15h，罐壓0.05MPa，通氣比1∶1V/Vm，菌體培養至對數生長后期。將5m³發酵罐中培養基于0.11MPa，蒸汽壓力實罐消毒30分鐘。將菌體及培養液一并轉移至5m³發酵罐中，34-36℃培養18-25h，罐壓0.05MPa，通氣比1∶0.7-1V/Vm，菌體90％以上形成芽孢，發酵結束，最終得芽孢含量在12-14億/克的發酵液。

上述兩種發酵液經高速離心濃縮、混合、噴霧干燥制成菌粉。

優選的，上述高濃度菌粉制作過程中，膠凍樣芽胞桿菌和側孢芽孢桿菌菌種分別是發明者自行從土壤中篩選出的優質菌株。