[發明專利]一種制作微生物肥料高濃度菌粉的方法

在審

• 申請號: 201010192330.7
• 申請日: 2010-06-07
• 公開（公告）號: CN101863685A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發明（設計）人: 王來福
• 申請（專利權）人: 王來福
• 主分類號: C05F11/08
• 分類號: C05F11/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種制作微生物肥料高濃度菌粉的方法，其特征在于利用成熟的、以商品化的膠凍樣芽胞桿菌、側孢芽孢桿菌來生產復合生物肥料用芽孢菌粉。

1.1膠凍樣芽胞桿菌發酵工藝流程

將膠凍樣芽孢桿菌種接種在適宜的斜面培養基上，待菌種生長完全后，置于4℃左右的冰箱中保藏，制做斜面菌種。取少量菌種，轉接至克氏瓶斜面培養基上，進行擴大培養(30℃恒溫培養2-5天)，待菌種生長完全后，置于4℃左右的冰箱中保藏，制成克氏瓶斜面菌種。將菌種于30℃恒溫培養2-5天，加40-50ml無菌水洗滌，制成芽孢懸液。將500L種子罐中培養基于0.11MPa，蒸汽壓力實罐消毒30分鐘，將芽孢懸液接種到種子罐中，30℃培養15-20h，罐壓0.05MPa，通氣比1∶1V/Vm，菌體培養至對數生長后期。將5m³發酵罐中培養基于0.11MPa，蒸汽壓力實罐消毒30分鐘。將菌體及培養液一并轉移至5m³發酵罐中，30℃培養30-40h，罐壓0.05MPa，通氣比1∶0.7-1V/Vm，菌體90％以上形成芽孢后，芽孢脫落50-60％，發酵結束，最終得到芽孢含量在6-7億/克的發酵液。

1.2側孢芽孢桿菌發酵工藝流程

將側孢芽孢桿菌種接種在適宜的斜面培養基上，待菌種生長完全后，置于4℃左右的冰箱中保藏，制做斜面菌種。取少量菌種，轉接至克氏瓶斜面培養基上，進行擴大培養(34-35℃恒溫培養2-5天)，待菌種生長完全后，置于4℃左右的冰箱中保藏，制成克氏瓶斜面菌種。將菌種于34-35℃恒溫培養2-5天，加40-50ml無菌水洗滌，制成芽孢懸液。將500L種子罐中培養基于0.11MPa，蒸汽壓力實罐消毒30分鐘，將芽孢懸液接種到種子罐中，34-36℃培養10-15h，罐壓0.05MPa，通氣比1∶1V/Vm，菌體培養至對數生長后期。將5m³發酵罐中培養基于0.11MPa，蒸汽壓力實罐消毒30分鐘。將菌體及培養液一并轉移至5m³發酵罐中，34-36℃培養18-25h，罐壓0.05MPa，通氣比1∶0.7-1V/Vm，菌體90％以上形成芽孢，發酵結束，最終得到芽孢含量在12-14億/克的發酵液。

1.3上述兩種發酵液經高速離心濃縮、混合、噴霧干燥制成菌粉。

2.根據權利要求1，其特征在于：膠凍樣芽胞桿菌菌種和側孢芽孢桿菌菌種分別是發明者自行從土壤中篩選出的優質菌株。

3.根據權利要求1，其特征在于：膠凍樣芽孢桿菌培養中發酵罐培養基和種子罐培養基一致，其組成為：淀粉5克，豆粉3克，糖1克，CaCO₃1克，硫銨0.5克，油2升，水1升，Ph7.0。斜面培養基和克氏瓶培養基一致，均為硅酸鹽細菌培養基，其組成為：蔗糖(C₁₂H₂₂O₁₁)5.0g，磷酸氫二鈉(Na₂HPO₄·12H₂O)2.0g，硫酸鎂(MgSO₄·7H₂O)0.5g，碳酸鈣(CaCO₃)0.1g，三氯化鐵(FeCl₃·6H₂O)0.005g，瓊脂18.0g，蒸餾水1000mL，pH7.5～8.0。

4.根據權利要求1，其特征在于：側孢芽孢桿菌培養中發酵罐培養基和種子罐培養基一致，其組成為：豆餅粉4克，玉米粉4克，紅薯粉4克，CaCO₃2克，水1升，Ph自然。斜面培養基和克氏瓶培養基一致，均為營養瓊脂，其組成為：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化鈉(NaCl)5.0g，瓊脂18.0g，蒸餾水1000mL，pH7.2～7.5。

5.根據權利要求1，其特征在于：高速離心時，將發酵液用碟片式離心機(7302轉/分鐘)，具體控制參數：密封時間3秒，密封周期1分鐘，排渣時間1秒，排渣周期10分鐘，密封水時間3秒進行濃縮，得到濃縮10倍菌液。

6.根據權利要求1，其特征在于：混合時，將兩種菌的濃縮液按照1∶1的比例混合。

7.根據權利要求1，其特征在于：噴霧干燥時，將混合好的菌泥添加按1/0.3-0.4CaCO3進行噴霧干燥，當進口溫度達到140-150℃，開始噴霧，控制流入離心盤漿液的速度，使噴霧的干燥塔中層的溫度保持在60-65℃。