[發(fā)明專利]一種納米纖維固定化β-D-半乳糖苷酶的制備方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010190222.6 | 申請日： | 2010-05-25 |
| 公開（公告）號： | CN101864408A | 公開（公告）日： | 2010-10-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 蘇志國;張羽飛;張松平;鄭國建 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國科學(xué)院過程工程研究所 |
| 主分類號： | C12N11/08 | 分類號： | C12N11/08;D01D5/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100190 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 納米 纖維 固定 半乳糖 制備 方法 | ||
1.一種納米纖維固定化β-D-半乳糖苷酶的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
(1)靜電紡絲法制備苯乙烯-馬來酸酐共聚物(PSMA)納米纖維：將一定量的PSMA溶解于有機溶劑中，在室溫磁力攪拌的條件下充分溶解制得濃度為20～40％(w/v)的電紡液；將電紡液吸入注射器內(nèi)進行靜電紡絲，控制注射器針頭至接收板的距離為10～30cm，電紡液流速為250～1000μL/h，電壓在15～50kV之間調(diào)節(jié)，制得PSMA納米纖維，室溫放置直至溶劑完全揮發(fā)；
(2)PSMA納米纖維的預(yù)處理：取PSMA納米纖維在25％(V/V)的乙醇水溶液中浸泡15min以增加其親水性，再分別用水和緩沖溶液沖洗；
(3)β-D-半乳糖苷酶的固定化：用pH值介于2.5～8.0的緩沖溶液配制0.1～5.0mg/mL的β-D-半乳糖苷酶溶液；將乙醇處理后的PSMA納米纖維浸入β-D-半乳糖苷酶溶液中，在4～25℃條件下于搖床振蕩固定化0.5～15h；取出固定化酶用緩沖溶液充分洗去纖維表面未固定化的酶，最后浸泡在0.2mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液中(pH4.5)，于4℃保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的有機溶劑是N，N-二甲基乙酰胺、N，N二甲基甲酰胺、四氫呋喃、二甲基亞砜中的一種、或其中任意兩種的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的納米纖維可以是納米纖維膜、納米纖維絲、納米纖維球或表面偶聯(lián)納米纖維絲的纖維球，優(yōu)選的是納米纖維膜和納米纖維絲。
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