[發明專利]一種乙烯基修飾的基因芯片、其制備方法及應用有效
| 申請號: | 201010186945.9 | 申請日: | 2010-05-21 |
| 公開(公告)號: | CN101831503A | 公開(公告)日: | 2010-09-15 |
| 發明(設計)人: | 劉迎春;高源 | 申請(專利權)人: | 北京歐凱納斯科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飛;王加嶺 |
| 地址: | 100094 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 乙烯基 修飾 基因芯片 制備 方法 應用 | ||
1.一種乙烯基修飾的基因芯片,其特征在于,所述基因芯片的基片載體表面上帶有末端含碳碳雙鍵的活性官能團,其結構如式1所示,
式1
其中,n為1-10的整數,m為大于1的整數。
2.根據權利要求1所述的基因芯片,其特征在于,制備所述基片載體的材料包括玻璃、硅片、金、銀、鐵、鋅、銅、殼聚糖、葡聚糖、聚乙烯醇、纖維素、聚丙烯酰胺、聚碳酸酯、聚苯乙烯、聚乳酸或聚丙烯酸酯。
3.制備權利要求1或2所述的基因芯片的方法,其特征在于,其包括步驟:
1)用乙醇將基片載體洗凈;
2)采用分子自組裝技術將10-15mM的三乙氧基硅基烯組裝在羥基化或氨基化的基片載體表面,形成一層末端為雙鍵的單分子自組裝膜,在無水乙醇中漂洗兩遍,氮氣吹干;
3)將上述所得基片載體放置在烘箱中,50-120℃下烘烤30-60min,即得。
4.權利要求1或2所述的基因芯片在固定寡核苷酸中的應用,其具體方法為:
1)將1當量5’-端帶有末端雙鍵修飾的寡核苷酸和0.5%-1%當量Grubbs催化劑溶于DMSO中,配制成寡核苷酸濃度為1mM的點樣液;
2)用點樣儀吸取上述點樣液,在基片上設定的矩陣上點樣,點樣量是5-20nL,點樣后的基片放置在37℃相對濕度為75%的恒溫恒濕箱中避光固定8-12小時;
3)清洗,甩干。
5.根據權利要求4所述的應用,其特征在于,所述的5’-端帶有末端雙鍵修飾的寡核苷酸,其3’-端還帶有熒光基團,其結構如式2所示,
式2
其中,n為1-10的整數,F代表熒光基團。
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