[發明專利]靶向性白細胞介素融合蛋白及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201010185503.2
• 申請日: 2010-05-28
• 公開（公告）號: CN102260352A
• 公開（公告）日: 2011-11-30
• 發明（設計）人: 周兵;姜靜;周宇;鄧磊修;劉武
• 申請（專利權）人: 山東先聲麥得津生物制藥有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/19;C12N1/21;A01K67/00;A61K38/20;A61K47/48;A61P35/00;C12R1/19
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 馮瓊;李玉秋

1.一種融合蛋白，包括：(1)特異性結合腫瘤細胞或者腫瘤血管內皮細胞的靶向結合區；(2)白細胞介素。

2.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白還包含由不多于10個氨基酸組成的連接區，用于連接所述靶向結合區和白細胞介素。

3.如權利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述白細胞介素為人源白細胞介素2，具有如SEQ?ID?NO：1所示的氨基酸序列。

4.如權利要求1或2或3所述的融合蛋白，其特征在于，所述靶向結合區為不少于3個但不多于50個氨基酸的氨基酸序列。

5.如權利要求4所述的融合蛋白，其特征在于，所述靶向結合區為人源氨基酸序列。

6.如權利要求4所述的融合蛋白，其特征在于，所述靶向結合區與生長抑素同源。

7.如權利要求6所述的融合蛋白，其特征在于，所述靶向結合區的氨基酸序列與生長抑素同源性不低于60％。

8.如權利要求6或7所述的融合蛋白，其特征在于，所述靶向結合區的氨基酸序列為FCYWKSCT，如SEQ?ID?NO：2所示，或為SEQ?ID?NO.2所示的氨基酸序列經過取代、缺失、或添加一個或幾個氨基酸衍生的與SEQ?IDNO.2所示的氨基酸序列至少有80％的一致性，且具有特異結合腫瘤細胞或者腫瘤血管內皮細胞的活性。

9.如權利要求8所述的融合蛋白，其特征在于，將如SEQ?ID?NO：2所示的靶向結合區中酪氨酸由任一含苯環或雜環的氨基酸替換，優選替換為苯丙氨酸或色氨酸。

10.如權利要求9所述的融合蛋白，其特征在于，將如SEQ?ID?NO：2所示的靶向結合區中絲氨酸由任一含有羥基的氨基酸替換或缺失，優選替換為蘇氨酸。

11.如權利要求1-8任一項所述的融合蛋白，其特征在于，其中所述融合蛋白含有如SEQ?ID?NO：3的氨基酸序列。

12.編碼權利要求1-11任一項所述融合蛋白的DNA分子。

13.根據權利要求12所述的DNA分子，其特征在于，其含有如SEQ?IDNO：4所示的核苷酸序列。

14.一種表達盒，包括：轉錄起始區；受轉錄起始區調控的編碼權利要求1-11任一項所述融合蛋白的DNA分子；以及轉錄中止區。

15.重組了編碼權利要求1-11任一項所述融合蛋白DNA分子的表達載體。

16.如權利要求15所述的表達載體，其特征在于，所述表達載體為質粒或病毒。

17.重組了編碼權利要求1-11任一項所述融合蛋白的DNA分子的細胞。

18.如權利要求17所述的細胞，其特征在于，所述細胞為哺乳動物細胞、昆蟲細胞、酵母菌或細菌。

19.根據權利要求17所述的細胞，其特征在于，所述細胞屬大腸桿菌，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.3867。

20.一種轉基因動物，其特征在于，轉染了編碼權利要求1-11任一項所述融合蛋白的DNA分子且表達所述融合蛋白。

21.權利要求1-11任一項所述融合蛋白的制備方法，包括：

提供權利要求17-19任一項所述細胞或權利要求20所述轉基因動物；

使細胞或者轉基因動物表達所述融合蛋白；以及分離所述融合蛋白。

22.如權利要求1-11任一項所述融合蛋白在制造治療細胞過度增生導致的疾病的藥物中的用途。

23.如權利要求22所述的用途，其特征在于，所述疾病為癌癥。