[發(fā)明專利]分子印記固相萃取-液相色譜測定體液中可天寧的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010182271.5 | 申請日： | 2010-05-25 |
| 公開（公告）號： | CN101963600A | 公開（公告）日： | 2011-02-02 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 蔡繼寶;楊俊;鄧宇;周平 | 申請（專利權(quán)）人： | 江西中煙工業(yè)有限責任公司 |
| 主分類號： | G01N30/02 | 分類號： | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司： | 南昌佳誠專利事務(wù)所 36117 | 代理人： | 閔蓉;張建新 |
| 地址： | 330096 江西*** | 國省代碼： | 江西;36 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 分子 印記 萃取 色譜 測定 體液 中可天寧 方法 | ||
1.分子印記固相萃取-液相色譜測定體液中可天寧的方法，其特征在于：依次包括以下步驟：
(1)將可天寧、單體、交聯(lián)劑和引發(fā)劑、生孔劑超聲脫氣、通氮氣后密封，在水浴下聚合，然后將聚合物研磨、篩分，收集25-36μm的聚合物，用丙酮反復沉降去除細小顆粒后得到所需顆粒，將所需顆粒裝入玻璃層析柱中，分別用100mL-400mL的有機酸溶液和100mL-300mL醇淋洗，洗脫印跡聚合物中的模板分子可天寧，洗脫后的聚合物顆粒置于烘箱中干燥，得合成的可天寧分子印記聚合物；
(2)將合成的聚合物作為固相萃取吸附劑，稱取200mg-300mg裝填于3mL的SPE聚丙烯空柱中，制備固相萃取小柱；
(3)采用含有機酸、水的乙腈溶液、醇、緩沖溶液依次淋洗固相萃取小柱，采用緩沖溶液調(diào)節(jié)體液樣品pH后上樣，用緩沖溶液和有機胺的乙腈溶液淋洗小柱，去除體液樣品中的鹽及其它基體化合物，采用含有機酸、水的乙腈溶液對小柱進行洗脫；
(4)分別收集步驟(3)淋洗、流出環(huán)節(jié)的溶液，濃縮至近干，加入乙酸鹽緩沖溶液，得檢測液；
(5)利用高效液相色譜測定步驟(4)所得檢測液中的可天寧：
色譜條件：色譜柱：Zorbax?SB-C18(250×4.6mm，5μm，Agilent公司)；流動相：A相為緩沖鹽溶液，B相為乙腈，等度洗脫，洗脫比例：A∶B＝88％∶12％；流動相中包含濃度為0.02mol/L庚烷基磺酸鈉作離子對試劑；流速：1.0mL/min；檢測器：二極管陣列檢測器；檢測波長為260nm；進樣量：20μL。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分子印記固相萃取-液相色譜測定體液中可天寧的方法，其特征在于：所述體液為尿液、血液、血漿或吐液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分子印記固相萃取-液相色譜測定體液中可天寧的方法，其特征在于：所述步驟(1)中單體為包括一個、二個或三個碳原子取代烷基的烯酸；交聯(lián)劑為包括一個、二個或三個碳原子取代烷基的烯酸一元醇酯或多元醇酯；生孔劑為一個、二個或三個碳原子的一取代或多取代氯代烴；引發(fā)劑為一個、二個或三個烴基的一取代或多取代偶氮腈。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分子印記固相萃取-液相色譜測定體液中可天寧的方法，其特征在于：所述步驟(1)中脫氣時間為5-20min；通氮氣時間為5-20min；水浴溫度控制在40℃-80℃；水浴時間為12h-36h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分子印記固相萃取-液相色譜測定體液中可天寧的方法，其特征在于：所述步驟(1)的淋洗液中有機酸為一個、二個或三個碳原子的一元有機酸或多元有機酸；醇為一個、二個或三個碳原子的一元醇或多元醇；聚合物顆粒干燥溫度控制在100℃-150℃；干燥時間控制在12h-36h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分子印記固相萃取-液相色譜測定體液中可天寧的方法，其特征在于：所述步驟(3)的含有機酸、水的乙腈溶液中有機酸為一個、二個或三個碳原子的一取代或多取代氟代有機酸；有機酸比例為1％-5％，水比例為1％-5％。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分子印記固相萃取-液相色譜測定體液中可天寧的方法，其特征在于：所述步驟(3)的調(diào)節(jié)固相萃取小柱的醇為一個、二個或三個碳原子的一元醇或多元醇。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分子印記固相萃取-液相色譜測定體液中可天寧的方法，其特征在于：所述步驟(3)中調(diào)節(jié)、淋洗固相萃取小柱，調(diào)節(jié)體液樣品的緩沖鹽為一個、二個或三個碳原子的一元酸銨或多元酸銨和氨水溶液組成；調(diào)節(jié)體液樣品的pH范圍為8-11；淋洗固相萃取小柱的有機胺乙腈溶液中有機胺為一個、二個或三個烴基取代銨。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種分子印記固相萃取-液相色譜測定體液中可天寧的方法，其特征在于：步驟(4)中的濃縮至干過程是在惰性氣體保護下進行的，溫度為30-50℃。乙酸鹽緩沖溶液pH范圍：3-5，量控制在100-500μL。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于江西中煙工業(yè)有限責任公司，未經(jīng)江西中煙工業(yè)有限責任公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201010182271.5/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
