[發(fā)明專利]一種提取二十二碳六烯酸油脂的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010182222.1
• 申請(qǐng)日: 2010-05-25
• 公開（公告）號(hào): CN101824363A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃和;朱婧瑤;胡學(xué)超;肖愛(ài)華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C11B1/10
• 分類號(hào): C11B1/10
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 肖明芳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于油脂技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種提取二十二碳六烯酸油脂的方法。

背景技術(shù)

DHA(Docosahexaenoic?acid，22：6Δ4.7.10.13.16.19，全名二十二碳六烯酸)是一種 重要的n-3系長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸(polyunsaturated?fatty?acid，簡(jiǎn)稱PUFA)，具有增強(qiáng) 智力，促進(jìn)腦細(xì)胞發(fā)育，治療心腦血管疾病等作用，被譽(yù)為新一代功能保健因子，廣泛 應(yīng)用于嬰幼兒食品添加劑和醫(yī)藥行業(yè)。

傳統(tǒng)的DHA來(lái)源主要為魚油，但由于受到魚的種類、季節(jié)、地理位置等因素的限 制使得魚油生產(chǎn)的DHA油脂成分等不穩(wěn)定、品質(zhì)也不高。因此，微生物發(fā)酵法制備DHA 工藝受到廣泛關(guān)注。國(guó)內(nèi)外許多企業(yè)均已成功的實(shí)現(xiàn)了微生物發(fā)酵產(chǎn)DHA油脂的工業(yè) 生產(chǎn)，但是生產(chǎn)工藝大多比較傳統(tǒng)。

由于發(fā)酵液中存在大量的水，造成萃取過(guò)程中消耗大量的乙醇和有機(jī)溶劑，因此萃 取前的分水是毛油提取的過(guò)程中的一個(gè)非常重要的步驟。工業(yè)上常用的分水方法為添加 絮凝劑劑，如明礬、硫酸鋁、無(wú)水CaCl₂、三氯化鐵、聚合氧化鋁、聚合硫酸鐵或聚丙 烯酰胺等，然后經(jīng)過(guò)靜置、過(guò)濾、離心或烘干等程序。但是這些方法或需要較長(zhǎng)的時(shí)間 (一般需要放置12h以上，降低了生產(chǎn)效率)或耗費(fèi)較大的能量(離心機(jī)等屬于耗材， 遠(yuǎn)轉(zhuǎn)耗能，設(shè)備的投入和維護(hù)也需要成本，烘干則需要更大能耗)，對(duì)于工業(yè)生產(chǎn)來(lái)說(shuō) 不夠經(jīng)濟(jì)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種提取二十二碳六烯酸油脂的方法。該方法是 基于酶法破壁提取DHA油脂的方法，能夠大大降低生產(chǎn)過(guò)程的能耗并節(jié)約成本。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種提取二十二碳六烯酸油脂的方法，將含有二十二碳六烯酸的發(fā)酵液經(jīng)酶法破壁 后，先進(jìn)行一級(jí)分水，對(duì)菌體進(jìn)行富集，再進(jìn)行二級(jí)萃取，蒸發(fā)除去萃取溶劑后得到粗 油；

其中，

所述的一級(jí)分水為，將破壁后的發(fā)酵液、乙醇和有機(jī)溶劑按體積比1∶0.5～1.5∶0.1～0.8 混合、靜置，棄下層水相；通過(guò)靜置，所得混合液會(huì)快速分層，下層為水相，上層為有 機(jī)相以及菌體，如果靜置時(shí)間加長(zhǎng)，溶液將會(huì)分為三層，從上到下分別為有機(jī)溶劑層、 菌體層和水層，只要除去下層水相即可，保留上層的混合物料或者上層有機(jī)溶劑層及中 層菌體層；

所述的二級(jí)萃取為，將一級(jí)分水得到的上層油相(即棄去水相的部分)、乙醇和有 機(jī)溶劑按體積比1∶0.6～1.2∶0.6～1.2混合、靜置，收集上層有機(jī)相；通過(guò)靜置，混合液 會(huì)分層，上層為有機(jī)相，中間層為菌體，下層為包含少量殘留發(fā)酵液的乙醇相；

一級(jí)分水和二級(jí)萃取中所述的有機(jī)溶劑為環(huán)己烷、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、石油 醚、乙醚、甲苯、氯仿、四號(hào)溶劑和六號(hào)溶劑中的任意一種或幾種的任意比例的混合物。 優(yōu)選正己烷、丙酮或石油醚。一級(jí)分水和二級(jí)萃取所使用的有機(jī)溶劑相同。

其中，所述的發(fā)酵液為由破囊壺菌、裂殖壺菌、隱甲藻或雙鞭甲藻經(jīng)過(guò)發(fā)酵得到的 含有二十二碳六烯酸的發(fā)酵液，本發(fā)明方法對(duì)發(fā)酵使用的菌種和采用的發(fā)酵方法并沒(méi)有 任何限制，只要是有能力發(fā)酵生產(chǎn)DHA的菌株都可以使用，只要是能夠發(fā)酵生產(chǎn)出DHA 的方法都可以使用。當(dāng)然，通過(guò)優(yōu)化條件，使得發(fā)酵液中富含DHA，這種富含DHA的 發(fā)酵液更適合用本發(fā)明方法進(jìn)行二十二碳六烯酸油脂的提取。

其中，所述的酶法破壁為使用蛋白酶、溶菌酶、葡聚糖酶、纖維素酶、幾丁質(zhì)酶、 甘露糖酶或半纖維素酶等進(jìn)行破壁。本發(fā)明方法對(duì)破壁的酶無(wú)任何限制，只要是能將菌 株細(xì)胞壁進(jìn)行破碎的破壁酶都可以使用，本發(fā)明方法對(duì)破壁的方法也沒(méi)有任何限制，只 要是利用酶將菌株細(xì)胞壁進(jìn)行破碎的方法都可以使用。

其中，所述的一級(jí)分水中，破壁后的發(fā)酵液、乙醇和有機(jī)溶劑體積比優(yōu)選為1∶ 0.6～1.3∶0.2～0.6。

其中，所述的一級(jí)分水中，破壁后的發(fā)酵液、乙醇和有機(jī)溶劑混合過(guò)程中伴隨攪拌， 攪拌時(shí)間為5min～3h。攪拌的目的是為了促進(jìn)物料的混合均勻，實(shí)現(xiàn)有機(jī)溶劑的部分萃 取功能，本發(fā)明方法對(duì)混合攪拌的速度無(wú)任何限制，以物料混合均勻?yàn)榍疤釘嚢枰欢螘r(shí) 間即可。

其中，所述的一級(jí)分水，靜置時(shí)間為5分鐘以上，本發(fā)明對(duì)靜置時(shí)間無(wú)任何限制， 以實(shí)現(xiàn)分層為準(zhǔn)，可適當(dāng)?shù)目紤]工作時(shí)間安排。