[發明專利]一種大腸桿菌-枯草芽孢桿菌穿梭表達載體及其應用

有效

• 申請號: 201010181347.2
• 申請日: 2010-05-25
• 公開（公告）號: CN102002509A
• 公開（公告）日: 2011-04-06
• 發明（設計）人: 陳堅;趙慶新;吳敬
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N15/75
• 分類號: C12N15/75;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21
• 代理公司: 北京匯信合知識產權代理有限公司 11335
• 代理人: 王秀麗

1.一種大腸桿菌-枯草芽孢桿菌穿梭表達載體，包括如下元件：人工設計的表達調控元件、枯草芽孢桿菌信號肽的編碼序列、大腸桿菌的復制起始序列、抗生素抗性基因。

2.根據權利要求1所述的表達載體，其特征在于其DNA序列如以下1)或2)所示；

1)DNA序列為SEQ?ID?NO：1所示核苷酸序列；

2)與1)限定的DNA序列具有90％以上同源性。

3.根據權利要求1所述的表達載體，其特征在于所述人工設計的表達調控元件由枯草芽孢桿菌P43啟動子、枯草芽孢桿菌脫乙酰幾丁質酶信號肽的編碼序列CSN、F1噬菌體的終止子序列，人工設計的能被枯草芽孢識別的核糖體結合序列序列RSB、人工設計的枯草芽孢桿菌信號肽酶的酶切位點、人工設計的多克隆位點MCS組成。

4.根據權利要求2所述的表達載體，其特征在于所述表達調控元件DNA序列如以下3)或4)或5)所示；

3)其DNA序列為SEQ?ID?NO.2所示核苷酸序列；

4)在嚴格條件下與3)限定的DNA序列能夠雜交且能促進目的基因轉錄和翻譯的DNA序列；

5)與3)或4)限定的DNA序列具有90％以上同源性，且能促進目的基因轉錄和翻譯的DNA序列。

5.根據權利要求1-4任一所述的表達載體，其特征在于所述抗生素抗性基因為卡那霉素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因。

6.根據權利要求1-4任一所述的表達載體，其特征在于所述表達載體的出發載體為pMA5。

7.含有權利要求1-4任一所述表達載體的轉基因細胞系。

8.含有權利要求1-4任一所述表達載體的基因工程菌株。

9.權利要求1-4任一所述表達載體在促進在目的基因轉錄和翻譯中的應用。