[發明專利]酶解法分離提取山豆根多糖的生產工藝

無效

• 申請號: 201010180711.3
• 申請日: 2010-05-24
• 公開（公告）號: CN101857643A
• 公開（公告）日: 2010-10-13
• 發明（設計）人: 胡庭俊;孫蓉;蘇子杰;曾蕓;韋英益
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C12S3/02
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 翁建華

技術領域

本發明涉及一種酶解法分離提取山豆根多糖的生產工藝。

背景技術

山豆根多糖(Sophora?subprosrate?polysaccharide)作為豬的疫苗免疫增強劑，可顯著提高疫苗的保護率和抗病力，應用前景廣闊。然而，目前分離提取山豆根多糖的水提醇沉法存在多糖得率低和總糖含量低的問題，以致于生產效率低、供應不足，難以滿足市場需求。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種粗多糖得率高和總糖含量高的酶解法分離提取山豆根多糖的生產工藝。

為解決上述技術問題采用如下技術方案：A)準確稱取粉碎的山豆根，按質量體積比1∶15加入蒸餾水，浸泡0.5h；B)調節步驟A)中浸泡液的pH至5.0～7.0，加入木瓜蛋白酶使其質量體積濃度為1％～4％，充分混勻后，置于50℃～60℃的水浴中反應120min～180min，過濾，濾液備用，殘渣按質量體積比1∶15加入蒸餾水，置沸水中水浴，過濾，濾液備用；C)合并步驟B)中兩次濾液，將濾液蒸餾濃縮，加入體積5倍于濃縮液的95％乙醇使醇濃度達80％，充分混勻后，低溫靜置過夜，傾出上清液，離心得沉淀；D)取步驟C)中沉淀按質量體積比1∶5加蒸餾水溶解，靜置，離心，傾出上清液備用；E)取步驟D)中上清液，加入體積5倍于上清液的95％乙醇沉淀，低溫靜置過夜，離心，沉淀部分加入95％乙醇攪拌，離心除去乙醇得山豆根粗多糖濕品；F)將步驟E)中山豆根粗多糖濕品冷凍干燥，得山豆根粗多糖干品。

本發明的酶解法分離提取山豆根多糖的生產工藝的粗多糖得率和總糖含量明顯高于目前的水提醇沉法，應用于生產山豆根多糖可提高效率、滿足市場需求。

具體實施方式

以下為用本發明的酶解法分離提取山豆根多糖的實施例：

實施例1

A)準確稱取粉碎的山豆根4g，加入蒸餾水60mL，浸泡0.5h；B)調節步驟A)中浸泡液的pH至5.0，加入木瓜蛋白酶使其質量體積濃度為4％，充分混勻后，置于60℃的水浴中反應150min，過濾，濾液備用；殘渣加入60mL蒸餾水，置沸水中水浴，過濾，濾液備用；C)合并步驟B)中兩次濾液，將濾液蒸餾濃縮，加入體積5倍于濃縮液的95％乙醇使醇濃度達80％，充分混勻后，低溫靜置過夜12h以上，傾出上清液，3000r/min離心10min得沉淀；D)取步驟C)中沉淀按質量體積比1∶5加蒸餾水溶解，靜置，3000r/min離心10min，傾出上清液備用；E)取步驟D)中上清液，加入5倍量的95％乙醇沉淀，低溫靜置過夜12h以上，3000r/min離心10min，沉淀部分加入95％乙醇攪拌，離心除去乙醇得山豆根粗多糖濕品；F)將步驟E)中山豆根粗多糖濕品在-20℃冰箱中冷凍12h以上至凍硬，然后放入冷凍干燥機中凍干，即得山豆根粗多糖干品。

實施例2

其他條件同實施例1，pH為6，木瓜蛋白酶質量體積濃度為1％，水浴溫度為55℃，水浴時間為150min。

實施例3

其他條件同實施例1，pH為7，木瓜蛋白酶質量體積濃度為2％，水浴溫度為50℃，水浴時間為150min。

實施例4

其他條件同實施例1，pH為7，木瓜蛋白酶質量體積濃度為4％，水浴溫度為55℃，水浴時間為120min。

實施例5

其他條件同實施例1，pH為5，木瓜蛋白酶質量體積濃度為2％，水浴溫度為55℃，水浴時間為180min。

以下為用常規的水提醇沉法分離提取山豆根多糖的生產工藝的對照例：