[發(fā)明專利]一類交鏈孢菌生物堿及其制備方法和用途

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010180422.3
• 申請日: 2010-05-24
• 公開（公告）號: CN101921711A
• 公開（公告）日: 2010-12-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 譚仁祥;張愛華;谷文;宋勇春;王玉蓉;胥蘇海
• 申請（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/12;C07D221/16;A61K31/473;A61P35/00;C12R1/645
• 代理公司: 南京知識律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 胡錫瑜

1.一種交鏈孢菌，其特征是由苔草葉片分離純化獲得。菌落深綠色至黑色，菌絲淡色，生長迅速；分生孢子梗暗色，單枝，長短不一，頂生不分枝或偶爾分枝的孢子鏈；分生孢子暗色，有縱橫隔膜，倒棍棒形、橢圓形或卵形，常形成鏈，頂端有喙?fàn)畹母綄俳z。經(jīng)宋勇春副教授鑒定為交鏈孢屬，現(xiàn)保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址：武漢市武昌珞珈山武漢大學(xué)內(nèi)，專利菌種保藏編號為CCTCC?NO.M?2010064，保藏日期為2010年3月27日。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述交鏈孢菌制備的交鏈孢菌生物堿，其特征是具有下述結(jié)構(gòu)通式：

其中1，2，3，3a，4，5，5a，6，7，8，9，9a，9b，10為碳原子序數(shù)編號，4為氮原子序數(shù)編號。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述交鏈孢菌生物堿的制備方法，其特征是：

在PDA平板培養(yǎng)基中活化的苔草葉片交鏈孢屬真菌的菌絲體接種于20瓶PD培養(yǎng)基中每瓶300mL，在28℃、150rpm旋轉(zhuǎn)式搖床上振蕩培養(yǎng)6天，將發(fā)酵液接種于400瓶小米固體培養(yǎng)基中，每瓶15mL菌液，接種后的固體培養(yǎng)基在28℃下靜置培養(yǎng)30天；所得的固體培養(yǎng)物干燥、磨碎后稱重，得2000克固體；將固體培養(yǎng)物用3L的氯仿/甲醇混合溶劑，體積比1∶1，提取5次，將提取液濃縮，得粗浸膏F1；將粗浸膏F1用適量的甲醇溶解，然后把溶液置于-4℃的冰箱過夜，過濾除去析出的蠟狀固體，將濾液減壓濃縮，得浸膏F2；對浸膏F2進行硅膠柱層析，先用10倍體積的氯仿洗脫，得浸膏F3；然后用體積比為100/1的氯仿/甲醇混合溶液繼續(xù)對浸膏F2進行洗脫，合并白色部分洗脫液得白色浸膏F4；對浸膏F4，用體積比1/1的氯仿/甲醇凝膠柱層析得到左旋交鏈孢菌生物堿。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述交鏈孢菌生物堿的化學(xué)合成方法，其特征是由以下步驟構(gòu)成：

1)以3，5-二甲氧基苯胺為原料，通過兩步反應(yīng)制得中間體A：2-氨基-4，6-二甲氧基苯甲酸，

2)再以3-甲基環(huán)戊酮為原料，通過鄰位氯代然后氧化兩步反應(yīng)生成中間體B：4-甲基-1，2-環(huán)戊二酮，

3)將中間體A通過重氮化反應(yīng)生成相應(yīng)的重氮鹽，再加入中間體B即可生成3環(huán)的內(nèi)酯C，

4)在甲酰胺存在的情況下，通入氨氣，將化合物C轉(zhuǎn)化為3環(huán)內(nèi)酰胺D，

5)再通過對化合物D進行選擇性脫甲基，得外消旋化合物交鏈孢菌生物堿[(±)-alternarlactam]，

6)對浸外消旋交鏈孢菌生物堿[(±)-alternarlactam]，用手性高壓液相色譜法，手性柱：Chiralpak?AD-H?column；流動相：甲醇/二乙醇胺體積比為100/0.1，流速：1.0mL/min分離得到一對對應(yīng)異構(gòu)體左旋交鏈孢菌生物堿[(-)-alternarlactam]和右旋交鏈孢菌生物堿[(+)-alternarlactam]。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的交鏈孢菌生物堿在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。