[發明專利]一種新型殼聚糖納米顆粒及其制備方法

有效

• 申請號: 201010179253.1
• 申請日: 2010-05-21
• 公開（公告）號: CN101838467A
• 公開（公告）日: 2010-09-22
• 發明（設計）人: 曾曉雄;胡冰;王舒舒;孫怡
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C08L89/00
• 分類號: C08L89/00;C08L5/08;C08J3/24;C12P21/06;A23L1/30
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1.一種新型殼聚糖-酪蛋白磷酸肽納米顆粒的制備方法，其特征是殼聚糖與酪蛋白磷酸肽的質量比為1/5，粒徑為100-200nm，Zeta電位為0-30mV。

2.一種新型殼聚糖-酪蛋白磷酸肽納米顆粒的制備方法，通過離交聯反應在室溫下合成，其特征是：(1)殼聚糖溶于1％的醋酸溶液；(2)將酪蛋白磷酸肽以去離子水溶解后，調節溶液pH為6；(3)攪拌條件下，在酪蛋白磷酸肽溶液中逐滴滴加殼聚糖溶液，使酪蛋白磷酸肽與殼聚糖互相交聯，形成納米顆粒，此時溶液呈現乳光。

3.根據權利要求2所述的殼聚糖-酪蛋白磷酸肽納米顆粒的制備方法，其特征是殼聚糖的醋酸溶液在使用前要加堿調節pH至6。

4.根據權利要求2所述的殼聚糖-酪蛋白磷酸肽納米顆粒的制備方法，其特征是殼聚糖是市售產品，分子量為100kDa，脫乙酰度為90％。

5.根據權利要求2所述的殼聚糖-酪蛋白磷酸肽納米顆粒的制備方法，其特征是所用的酪蛋白磷酸肽是酪蛋白以胰蛋白酶水解后經等電點沉淀及陰離子交換樹脂純化后的富含磷酸基團的多肽。

6.根據權利要求5所述的酪蛋白磷酸肽的制備方法，其特征是：酪蛋白以1∶10(w/v)溶于0.05M的NaOH溶液，調節pH至8.0。加入33％(w/v)胰蛋白酶水溶液，胰蛋白酶與酪蛋白質量比為1∶200，50℃水浴恒溫反應，并且不斷以1M的NaOH溶液調節水解液的pH，使水解液的pH恒定g.0。當水解液的pH最后一次調回8.0后，保持半小時以上不再變化時，認為反應結束。反應結束后，以沸水浴5min滅酶。水解液溫度回到室溫后，用1M的HCl將水解液的pH調至4.6，以2000r/min離心30min，取上清液，即為CPP粗提產物。調節CPP初產物pH值至pH8.9，通過HiPrep?column(16/10?QXL，Amersham?Biosciences)陰離子交換柱分離純化CPP，凍干后得到富含磷酸基團的酪蛋白磷酸肽。

7.根據權利要求2所述的殼聚糖-酪蛋白磷酸肽納米顆粒的制備方法，其特征是酪蛋白磷酸肽用去離子水復溶后，要調節pH值至6。

8.根據權利要求2所述的殼聚糖-酪蛋白磷酸肽納米顆粒的制備方法，其特征是殼聚糖與酪蛋白磷酸肽的最終質量比為1/5，且溶液呈現乳光。