[發明專利]膽甾化殼聚糖納米載體及其載藥納米粒子和制造方法

有效

• 申請號: 201010178962.8
• 申請日: 2010-05-21
• 公開（公告）號: CN101850122A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 張其清;陳名懋;李學敏;劉玲蓉;楊文智;劉*
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院生物醫學工程研究所
• 主分類號: A61K47/36
• 分類號: A61K47/36;C08B37/08;A61P35/00
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 王小靜

技術領域：

本發明涉及一種選擇性膽甾化殼聚糖納米載體及其載藥納米粒子和制造方法。

背景技術：

作為新型藥物輸送和控緩釋載體，可生物降解聚合物的納米粒子，特別是基于多糖的納米粒子，因其具有良好的生物相容性、超微尺寸、合理的體內分布和高效的藥物利用率，近年來日益受到廣泛關注。可生物降解聚合物納米粒子不僅可增強藥物的穩定性、提高療效、降低毒副作用，而且由于EPR效應(Enhanced?Permeability?and?Retention?Effect)能在腫瘤病變部位富集，實現對腫瘤組織的“被動靶向”，是包埋抗癌藥物、多肽、蛋白質、核酸、疫苗和基因的理想載體。

殼聚糖(chitosan，CS)是一類由2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖通過β-1，4糖甙鍵連接而成的帶正電荷的直鏈共聚物，是天然多糖中唯一的堿性多糖，來源豐富，其年產量僅次于纖維素。殼聚糖具有良好的生物相容性、生物可降解性、抗菌性和無毒性等特點，已被廣泛應用于生物、醫藥、化工、食品、紡織、農業等領域。然而，由于殼聚糖的結晶性較高，溶解性較差，僅能溶于稀酸性水溶液和特殊的含鹵素的有機溶劑中，大大限制了殼聚糖的應用。因此，對殼聚糖進行化學改性，提高其溶解性，擴大其應用領域是殼聚糖研究的一個重要方向。由于殼聚糖分子中含有羥基、氨基等功能基團，因此，在適當條件下可對其進行多種化學修飾，如酰基化、羧甲基化、烷基化、酯化、醚化、交聯和接枝共聚等反應。

近年來，由化學改性的兩親性殼聚糖制備納米粒子受到人們的廣泛關注。目前，大部分研究集中于殼聚糖氨基的修飾改性以及該類衍生物納米粒子的制備和應用方面(Liu?CG，et?al：J.Agric.Food?Chem.，2005，53：437-441)，而有關對其羥基進行化學改性的殼聚糖衍生物制備納米粒子的研究報道則較少。殼聚糖的游離氨基具有重要的生物學特性和陽離子聚合物特點(Liu?L，et?al：Carbohyd.Polym.，2005，60：351-356)，保留殼聚糖的游離氨基可進行進一步的化學修飾或交聯；膽甾醇作為生物內源性物質，對于維持正常的細胞功能和新陳代謝起了重要作用，是體內多種激素合成不可缺少的重要原料。迄今為止，對殼聚糖進行選擇性膽甾化，并制備該殼聚糖衍生物納米粒子作為藥物載體的研究尚未見報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種選擇性膽甾化殼聚糖納米載體及其載藥納米粒子和制造方法。由本發明方法制備的納米載體，可增強藥物的靶向性和穩定性、提高藥物緩釋性、降低藥物的毒副作用，且其制備過程簡單、價廉易得，克服了現有載體的一些不足。本發明制備的選擇性膽甾化殼聚糖載藥納米粒子，載藥量高，緩釋性能好，既提高了藥物的溶解性，又降低了藥物在體內的毒副作用，是一種較好的藥物載體材料。

本發明提供一種選擇性膽甾化殼聚糖納米載體是以膽甾醇、琥珀酸酐和鄰苯二甲酸酐、殼聚糖為原料，制備出膽甾醇琥珀酸酯(CHS)和鄰苯二甲酰化殼聚糖(PHCS)，二者再進行反應制備，粒徑為100～200nm，膽甾醇/琥珀酸酐的摩爾比為1～30∶3～90；殼聚糖/鄰苯二甲酸酐的摩爾比為1～60∶3～180。

本發明提供一種選擇性膽甾化殼聚糖納米載體的制備方法包括的步驟：

1)膽甾醇琥珀酸酯(CHS)的合成：將膽甾醇與琥珀酸酐溶解于吡啶中，反應液于室溫下攪拌反應48～96h，傾入冰鹽酸溶液，過濾，于乙酸乙酯/乙醇體系重結晶，其中，膽甾醇/琥珀酸酐的摩爾比為1∶3，鹽酸/冰水的體積比為1∶10～20，乙酸乙酯/乙醇體積比為1∶0.5～1。

2)鄰苯二甲酰化殼聚糖(PHCS)與膽甾醇琥珀酸酯(CHS)接枝共聚物的合成：將殼聚糖與鄰苯二甲酸酐分散于N，N’-二甲基甲酰亞胺(DMF)或二甲基亞砜(DMSO)，氮氣保護下100～120℃反應7～8h，即得PHCS；將CHS與PHCS溶解于DMF或DMSO，在N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)與碳二亞胺類活化劑作用下反應48～96h，其中，殼聚糖/鄰苯二甲酸酐的摩爾比為1∶3，PHCS/CHS的摩爾比為10∶1～5，CHS/NHS/碳二亞胺的摩爾比為1∶1～1.5∶1～1.5。

所述殼聚糖的分子量為50000～200000，脫乙酰度為70～99％。

所述碳二亞胺類活化劑選自：1-乙基-(3-甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC·HCl)、N，N’-二環己基碳二亞胺(DCC)或N，N’-二異丙基碳二亞胺(DIC)。