[發明專利]軍曹魚頭蛋白降血壓肽及其制備方法

無效

• 申請號: 201010177435.5
• 申請日: 2010-05-12
• 公開（公告）號: CN101851655A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 洪鵬志;楊萍;章超樺;曹文紅;曾少葵;周春霞
• 申請（專利權）人: 廣東海洋大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 湛江市三強專利事務所 44203
• 代理人: 龐愛英

技術領域

本發明涉及生物技術應用及保健食品領域，特別是一種軍曹魚頭蛋白降血壓肽及其制備方法。

背景技術

高血壓是最常見的心血管疾病，是導致心、腦、腎等重要靶器官損害的重要原因。在我國，高血壓患者約為1.6億人，且有逐年增多趨勢。這與我國人民生活水平提高、生活節奏加速和人口老齡化等因素有較密切關系。因此，治療和預防高血壓是當今社會十分關注的課題之一。人體內的血壓受許多因素調節，而血管緊張素轉化酶(Angiotensin?Converting?Enzyme，ACE)在血壓調節中扮演重要角色。降血壓肽是一類血管緊張素轉化酶抑制劑(ACEI)，通過抑制ACE活性而達到降血壓的作用。

食物蛋白質序列中的某些活性肽段可以通過降解的方法釋放出來，來源于食物中的血管緊張素轉化酶抑制肽具有降壓效果顯著、沒有毒副作用、安全性高、成本低、易吸收等優點，特別是對高血壓者有降血壓作用，對血壓正常者無而降血壓作用的特點，而常規的降血壓藥類藥物等都有明顯的副作用，因而在高血壓已成為危及人類身體健康的主要的疾病的今天，食物來源的血管緊張素轉化酶抑制肽更加符合人們的需求。

軍曹魚(Rachycentron?canadum?Linnaeu)隸屬鱸形目、軍曹魚科、軍曹魚屬。俗稱海竺魚、海鱺，廣泛分布于印度洋、太平洋和大西洋，棲息于熱帶及亞熱帶較深海區，我國產于南海、東海與黃渤海。該魚個體大、生長快、抗病性強，肌肉中氨基酸含量豐富，脂肪酸的不飽和度大，微量元素組成全面，具有較高的營養價值和藥用價值。上世紀80年代末期我國臺灣的研究人員偶然發現軍曹魚生長快速和巨大的市場潛力之后，其網箱養殖在臺灣得以迅速發展；90年代中期開始，大陸開始從臺灣輸入軍曹魚魚苗。隨著大陸人工繁殖和育苗技術的突破以及養殖技術的發展，軍曹魚已經成為廣東、海南、福建沿海的重要海水養殖對象，被稱為海水網箱養殖中最有養殖前景的魚類之一。由于軍曹魚肉質鮮美，個體較大，常可加工成魚片冷藏運輸，因而魚頭等下腳料的利用研究是迫切且十分有意義的。

酶水解蛋白質具有反應條件溫和、水解過程易控制、安全性高等優點。利用酶水解法從天然食物蛋白尤其是食品加工下腳料蛋白中提取的具有營養與生理活性的功能肽，可以應用到保健食品及營養強化食品中，滿足不同消費者的需要，不但可以全面利用食品中的優質蛋白質，而且提高了蛋白質原料的附加值，將產生良好的經濟與社會效益。

發明內容

本發明的目的是提供一種軍曹魚頭蛋白降血壓肽及其制備方法，用木瓜蛋白酶進行酶解，利用酶技術將軍曹魚頭降解為分子量大小不等的多肽、低聚肽及游離氨基酸的混合液，采用不同的離心分離方法去除渣及魚油，再經不同截留限的多級超濾膜分離，得到的75％多肽分子量在3000道爾頓以下，低聚肽占40％以上的軍曹魚頭蛋白肽產品。

本發明是將軍曹魚頭清洗后攪碎；采用木瓜蛋白酶水解，水解條件為軍曹魚頭與水重量比為1∶1～1∶3，pH5.5～6.5，溫度65～72℃，時間3～4小時，水解結束后升溫至90℃～95℃滅酶15分鐘，冷卻后調pH值為7.0～8.3；水解液經離心機去渣、離心機油水分離，得到蛋白水解液；超濾分級分離蛋白水解液，透過液經濃縮、干燥得到軍曹魚頭降血壓肽。

本發明以軍曹魚頭重量計，添加木瓜蛋白酶2000IU/g～2500IU/g。

本發明超濾分離條件為壓力0.20Mpa～0.4Mpa、溫度20℃～25℃、截留限8000～3000道爾頓的多級超濾膜分離。

本發明制備的軍曹魚頭蛋白降血壓肽，75％多肽分子量在3000道爾頓以下，低聚肽占40％，對血管緊張素轉換酶(ACE)的有較強抑制作用，并可顯著降低原發性高血壓大鼠的血壓。

本發明優點：(1)本發明工藝簡單，操作容易，利用生物酶法水解制備降血壓肽，反應過程溫和、易于控制，安全性高；(2)本發明制備的軍曹魚頭降血壓肽降血壓能力強，ACE半數抑制濃度(IC₅₀)達到0.24mg/mL，并可顯著降低原發性高血壓大鼠的血壓，以150mg/kg體重灌胃原發性高血壓大鼠，在灌胃2h、4h、6h、8h后血壓均顯著降低，最大降幅32mmHg；(3)本發明制備的軍曹魚頭水解蛋白是天然魚蛋白經過生物酶降解得到的產物，具有一般活性多肽營養豐富、易于吸收的特點，可廣泛用于營養保健食品、醫藥行業等，也可作為營養添劑及康復食品。

具體實施方式

本發明結合實施工藝實例做進一步說明：

軍曹魚頭解凍清洗后，經絞肉機絞碎后放入反應器中，加入魚頭重量2倍的水，用鹽酸調pH值為6.0，加入2300IU/g原料的木瓜蛋白酶，在72℃水解4小時，水解結束，升溫至95℃滅酶15分鐘，用氫氧化鈉調pH值為8.3；水解液經離心機過濾去渣、濾液由離心機進行油水分離得蛋白水解液，蛋白水解液經0.25Mpa、23℃、截留限8000～3000道爾頓的多級超濾膜分離后，經減壓蒸發濃縮、冷凍干燥得到軍曹魚頭降血壓肽，77.81％多肽分子量在3000道爾頓以下，低聚肽占45.61％。