[發明專利]一種天然腦蛋白水解物注射劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201010176378.9
• 申請日: 2010-05-19
• 公開（公告）號: CN101829050A
• 公開（公告）日: 2010-09-15
• 發明（設計）人: 彭長福;陳先東
• 申請（專利權）人: 云南盟生藥業有限公司
• 主分類號: A61K9/08
• 分類號: A61K9/08;A61K38/01;A61P3/02;A61P25/00;A61P9/00;A61P25/28
• 代理公司: 昆明正原專利代理有限責任公司 53100
• 代理人: 金耀生

技術領域

本發明涉及藥品技術領域，特別是一種天然腦蛋白水解物注射劑及其制備方法。

背景技術

腦蛋白水解物是由健康豬腦組織經現代控制水解技術制備的低分子肽類神經營養藥物。低分子肽具有生物活性，能調節人體腦代謝、神經傳遞及神經生長，能提高葡萄糖分解酶活性，增加腦對葡萄糖的無氧能量代謝。降低腦內乳酸的濃度，在缺血缺氧時對神經細胞的線粒體有保護作用。臨床主要用于顱腦外傷、腦血管病后遺證、老年性癡呆癥等。

現有腦蛋白水解物注射劑原料均是采用豬腦提取后，外源性“補加”或“修飾”氨基酸而得，并非天然提取氨基酸。而外源性“補加”或“修飾”的氨基酸都是屬于生物發酵氨基酸和部分石油副產品合成氨基酸，和動物蛋白質的水解氨基酸有很大的區別。用其專屬性指標“比旋度”測定天然提取物和添加物有極大差異(P＜0.001)。

發明內容

本發明的目的是克服在腦蛋白水解物注射劑中外源性“補加”或“修飾”氨基酸的做法，提供一種產品質量穩定可控的經天然提取腦蛋白水解物注射劑及其制備方法。

本發明是在原腦蛋白水解物原料提取工藝的基礎上進行了創新性的改進。具體技術方案為：本發明的腦蛋白水解物注射劑原料是以豬腦中經控制水解獲得的淡黃色至棕黃色液體，有效成份為小分子多肽和游離氨基酸，為天然水解物。是一種不含蛋白質的腦組織水解物，腦多肽分子量小于10000的占15％，游離氨基酸占85％，包括各種必需和非必需以及其它特殊氨基酸，其氨基酸的恒定比例為天然豬腦組織的恒定比例。

上述腦蛋白水解物注射劑原料的制備方法按以下步驟進行：

1、粗提取：

1)胃蛋白酶水解：豬腦組織加入等量水勻漿，50～90℃保溫30～50分鐘，冷卻至20～50℃攪拌加入豬腦重量1～5％[按2800～5000Eu/g計(活性要求)]的胃蛋白酶，30～50℃攪拌，加入鹽酸調pH3.0～5.0，攪拌30～50℃保溫1～5小時后停止攪拌，再30～50℃保溫1～4小時，收集上清液，沉淀離心，合并上清液；

2)高溫滅活：上清液減壓濃縮到豬腦重1/4～1/2的量，100～125℃滅活3～6小時，加水至豬腦重，調pH值5.0～7.0，布袋過濾，加入活性炭(1Kg豬腦加入10～20g)，微沸10～30分鐘，冷卻至40～60℃脫炭，調pH值6.7～7.5；

3)再酶解：上述脫炭液加入豬腦重量1～3％(按2000～3500Eu/g計)的胰酶，35～45℃保溫1～4小時，調pH值2.0～4.5，靜置10～16小時，取上清液，沉淀過濾，合并上清液；

2、精提取：

1)柱層析：上述上清液上柱后，用水沖洗至pH值2.0～4.0，用1mol/L氨水洗脫，收集洗脫液，pH值在8.0～12.0，每公斤豬腦加入1.0～3.0g氫氧化鈉減壓濃縮去氨水，濃縮至豬腦重1/5～1/3的量，過夜，去除沉淀，得原液，-20℃凍結保存；

2)超濾：調配前解凍超濾，用10000分子量超濾膜超濾，收集過濾液，定容，按原液標準檢定含量后即為調配用原液；

3)上述原液的檢定：

(1)性狀：為淺黃色至棕黃色液體；

(2)鑒別：供試品溶液色譜圖與對照品溶液色譜圖基本一致；

(3)pH值：8.0～10.0；

(4)16種游離氨基酸含量應符合標準規定；(在不添加氨基酸的情況下，總N?5.49～6.71mg/ml時，16種氨基酸總量為28.08～42.14mg/ml，)

3、調配：

根據檢測結果計算需加入原液量，計算方法如下：

原液加入量(ml)＝藥液總量(ml)×35.6mg/ml÷原液氨基酸含量(mg/ml)

量取上述計算量的原液，加注射用水至藥液總量的90％，混勻，用鹽酸溶液調pH值至6.9～7.5，加藥液總量0.035％的亞硫酸氫鈉，加注射用水至藥液總量，混勻，即可。

4、灌封：

用安瓿洗烘灌聯動機組灌裝，每支灌裝10.0ml。

5、滅菌：

將已灌封的腦蛋白水解物注射液放入滅菌柜內，115℃滅菌30min；

6、燈檢。

7、包裝。

本發明的腦蛋白水解物注射劑原料及其制備方法有以下特點：

1.通過工藝改進，得到天然水解的游離氨基酸，而不是外源性“添加”或“修飾”的氨基酸。

2.雖然創新的工藝與原工藝相比發生變化，但其藥品標準完全符合國家對該產品的標準要求，且質量更穩定可靠。