[發明專利]油菜餅抗菌肽

有效

• 申請號: 201010176000.9
• 申請日: 2010-05-18
• 公開（公告）號: CN101849608A
• 公開（公告）日: 2010-10-06
• 發明（設計）人: 楊志榮;馮甦;趙建;侯若彤;聶遠洋;顏亮
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: A23K1/00
• 分類號: A23K1/00;A23L3/3472
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一、技術領域

本發明涉及可用于生產飼料和食品防腐劑的油菜餅抗菌肽。

二、背景技術

在飼料中添加防腐劑、防霉劑等是延長飼料保質期的有效措施之一，但這些飼料保存劑都是化學藥劑，存在殘留問題，產生毒副作用，會間接影響到人體健康?？股刈鳛榭咕L劑添加到飼料中由來已久。它能夠減少動物的發病率；抑制腸道中有害微生物，提高動物對養分的吸收率具有明顯的經濟效益。但是，抗生素在動物體內和動物產品中的殘留，以及病原菌產生的抗藥性問題，對人類的健康和環境產生了負面的影響。隨著抗生素的大量、廣泛地用于飼料中和人們對食品質量的要求越來越高，人們對其使用的副作用認識日益加深，抗生素在飼料業已面臨著淘汰或禁用的局面。而化學防腐劑、防霉劑以及抗生素隨著飼料到達胃腸道，會影響體內正常的微生物菌群，破壞其間的平衡，造成消化功能紊亂，進而引起慢性腹瀉等消化道疾病，尋找新型、安全的抗菌劑代替抗生素，已成為當前國內外飼料學科的一項重要內容。

抗菌肽(antimicrobial?peptides，AMPs)因具有廣譜的抗細菌活性，高效的抗真菌、病毒和原蟲的活性；熱穩定性好；抗菌機理獨特，不易產生抗藥性等特性，正引起人們的關注，有望成為替代抗生素的產品之一。研究發現抗菌肽廣泛存在于原核生物、植物及動物體內，并在生物的天然防御系統中起著重要的作用。抗菌肽包括抗細菌多肽(antibacterial?peptides)和抗真菌多肽(antifungal?peptides)。

目前，不少研究者對抗菌肽做了一些相關的研究。實驗研究發現，鱟素對多種飼料中的有害微生物包括致病性和相對致病性飼料細菌、飼料霉菌等均有高效的殺菌作用，有望成為一種新型高效、環保的綠色飼料添加劑應用于飼料的保鮮防腐。馬衛明等發現豬小腸抗菌肽對雞、豬大腸桿菌株、雞白痢沙門氏菌株、白色葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、魚致病性嗜水氣單胞菌等11株細菌均有不同程度的抑制作用。溫劉發等人通過在畜禽魚的飼料中添加抗菌蛋白或抗菌肽，發現無論是在日生長速度、相對增重率、飼料系數、成活率，還是抗病力方面均有顯著提高。此外，國外有報道稱，抗菌肽對飼料防霉也有一定的效果。

國內的抗菌肽研究主要集中在動物和微生物源抗菌肽的理化性質，作用機制以及基因工程應用方面，對植物源抗菌肽的研究相對較少。四川大學資源微生物學及微生物生物技術四川省重點實驗室長期都在對植物源抗菌蛋白和肽進行篩選，通過篩選證實很多植物都含有抗菌蛋白和肽類物質。特別是我國大面積種植的甘藍型油菜，是油菜生產大國，而榨油之后的副產品油菜餅也產量巨大，為抗菌肽的獲取提供了豐富的資源。

本發明提供了油菜餅抗菌肽的分離純化方法和穩定性測試方法、動物急性毒性試驗方法以及提供一種防止飼料中霉菌的應用方法。

三、發明內容

本發明涉及來源于油菜餅(Rape-seed?meal)的抗菌肽，對飼料中引起霉變的某些真菌有較好的抑制效果。

飼料因微生物尤其是霉菌污染而造成飼料品質下降，甚至影響動物的健康，給飼料生產企業和畜牧生產者帶來巨大的經濟損失。飼料霉變是各種霉菌在適宜的溫度、濕度和營養環境下迅速生長而造成的，其結果是使飼料發熱、結塊、有霉味，甚至改變飼料顏色并產生霉菌毒素。受霉菌感染的飼料，由于霉菌生長消耗飼料中的營養物質，以及在霉菌所含酶的作用下使飼料的組成成分發生改變或分解，致使飼料的營養價值嚴重降低。此外，動物食用被霉菌污染的飼料后，霉菌毒素會殘留在動物體及其代謝產物中，因而可能會造成動物性食品污染，再通過食物鏈對人體健康產生極大的危害。因此，采用高效低毒的防霉劑對飼料中霉菌及其毒素進行預防處理，對于保證飼料質量，保護人與動物的生命安全具有十分重要的意義。

近年來研究發現，抗菌肽不僅具有廣譜高效殺菌活性，還具有穩定性好、水溶性好、抗菌機理獨特、對高等動物正常細胞無害等特點。抗菌蛋白(肽)在農業包括飼料生產中的研究也逐漸深入，但研究多集中于在飼料中添加抗菌肽以預防動物疾病，從而成為傳統抗生素的代替物等方面，但是將其開發成為飼料防霉劑方面的研究卻很少。

本發明的目的是提供一種新的抗菌肽，可用于飼料甚至食品的腐敗真菌的防治。從油菜餅的水溶性物質中分離到具有抗真菌活性的小肽。該活性肽熱穩定性強，在pH7～8的時候抑菌效果最為明顯。動物急性毒性試驗結果表明，提取的抗菌肽為無毒物質。通過與幾種防腐劑對飼料中霉菌抑制作用的比較發現，油菜餅粕抗菌肽提取物的防霉性能優于恩拉鼎(Enradin)、富馬酸，僅次于復合型防霉劑霉必克，可以開發成為一種高效的植物源性飼料防腐劑。