[發(fā)明專利]蘇云金芽孢桿菌檢測試劑盒及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010173609.0
• 申請日: 2010-05-17
• 公開（公告）號: CN102253202A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發(fā)明（設計）人: 李鋒;陳立柱
• 申請（專利權）人: 北京庫爾科技有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/531
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種蘇云金芽孢桿菌檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于由樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維素膜、吸樣墊和PVC支撐板組成，樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維素膜、吸樣墊依次粘貼在PVC支撐板上，膠體金墊為膠體金標記的蘇云金芽孢桿菌多抗玻璃纖維或無紡布，硝酸纖維素膜上依次包被了蘇云金芽孢桿菌多抗作為檢測線(T線)，羊抗鼠IgG抗體作為質(zhì)控線(C線)。

2.一種權利要求1所述的蘇云金芽孢桿菌檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的樣品墊為玻璃纖維或無紡布，吸樣墊為吸水濾紙。

3.一種權利要求1所述的蘇云金芽孢桿菌檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的膠體金是由氯金酸(HAuCl₄)在還原劑枸櫞酸三鈉作用下制成大小為20-40nm的膠體金顆粒。

4.一種權利要求1所述的蘇云金芽孢桿菌檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的膠體金墊的制備方法為：取顆粒大小為20-40nm的膠體金溶液5ml，用0.1mol/L?K₂CO₃將膠體金溶液的pH值調(diào)至9.0，室溫放置10分鐘；逐滴加入蛋白濃度為0.2mg/ml的蘇云金芽孢桿菌多抗0.04ml，混合均勻，室溫放置30分鐘；加入0.075ml?10％牛血清蛋白(BSA)溶液，混合均勻，室溫放置10分鐘；11000轉離心30分鐘，仔細吸取上清液，棄去，用含5％蔗糖的0.002mol/L?pH?9.0的硼酸鹽緩沖液5mL復溶，重復2次；最后用硼酸鹽緩沖液溶解至3mL，得到蘇云金芽孢桿菌多抗-膠體金標記物；將蘇云金芽孢桿菌多抗-膠體金標記物按1mL鋪56cm²的比例均勻鋪在無紡布上，再置干燥間，在溫度38℃，濕度小于30％的條件下干燥2-4小時，制成膠體金墊。

5.一種權利要求1所述的蘇云金芽孢桿菌檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的硝酸纖維素膜上的兩條線的包被方法為：設定劃膜儀涂覆參數(shù)1μL/cm，分別用微量進樣器取0.2mL蘇云金芽孢桿菌多抗、羊抗鼠IgG，按順序接到劃膜儀的A、B管道接口。將貼有硝酸纖維素膜的PVC板置于劃膜儀的往復運動平臺上，開啟劃膜儀，在硝酸纖維素膜上涂覆蘇云金芽孢桿菌多抗(T線)、羊抗鼠IgG(C線)。劃線后將硝酸纖維素膜放置在烘箱中，溫度38℃，干燥24小時，備用。

6.一種權利要求1所述的蘇云金芽孢桿菌檢測試劑盒及其制備方法，其特征在于所述的蘇云金芽孢桿菌檢測試劑盒的組裝方法為：將樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維素膜、吸樣墊由一端依次黏附在PVC支撐板上，即可形成檢測蘇云金芽孢桿菌的試劑條，試劑條也可以裝入塑料卡中形成卡型包裝。