[發明專利]禽IL-2與新城疫病毒HN基因重組融合蛋白及其應用無效
| 申請號: | 201010172224.2 | 申請日: | 2010-05-14 |
| 公開(公告)號: | CN101870733A | 公開(公告)日: | 2010-10-27 |
| 發明(設計)人: | 張春杰;王臣;程相朝;李銀聚;吳庭才;劉一塵;丁軻;余祖華;趙戰勤 | 申請(專利權)人: | 河南科技大學 |
| 主分類號: | C07K19/00 | 分類號: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/81;C12N1/19;A61K39/39;A61K39/17;A61P31/14;C12R1/84 |
| 代理公司: | 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛愛周 |
| 地址: | 471003 河*** | 國省代碼: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | il 新城 疫病 hn 基因 重組 融合 蛋白 及其 應用 | ||
1.chIL-2-HN融合蛋白,其特征在于:包括禽白細胞介素2(chIL-2)的氨基酸序列、新城疫病毒血凝素-神經氨酸酶(HN蛋白)的氨基酸序列、以及位于禽白細胞介素2氨基酸序列和新城疫病毒HN蛋白的氨基酸序列之間的柔性Linker肽氨基酸序列。
2.根據權利要求1所述的chIL-2-HN融合蛋白,其特征在于:由禽白細胞介素2(chIL-2)基因和雞新城疫病毒HN基因通過柔性Linker肽串聯連接而成。
3.根據權利要求1或2所述的chIL-2-HN融合蛋白,其特征在于:該蛋白具有SEQIDNO.7所示的氨基酸序列。
4.根據權利要求1或2所述的chIL-2-HN融合蛋白,其特征在于:所述的柔性Linker肽具有SEQIDNO.6所示的氨基酸序列。
5.一種分離的DNA序列,其特征在于:編碼具有序列為SEQIDNO.7所示的氨基酸序列的融合蛋白。
6.根據權利要求5所述的DNA序列,其特征在于:具有SEQIDNO.5所示的核苷酸序列。
7.一種重組畢赤酵母載體,其特征在于:它含有權利要求6所述的DNA序列。
8.一種宿主細胞,其特征在于:它含有權利要求6所述的DNA序列。
9.一種重組融合蛋白,其特征在于:由以下方法獲得:
(a)獲得編碼chIL-2-HN融合蛋白的基因序列;
(b)將步驟(a)獲得的chIL-2-HN融合蛋白的基因序列,插入到畢赤酵母載體pPICZαA中,得到重組表達的畢赤酵母載體,命名為pPICZαA-chIL-2-HN;
(c)將步驟(b)獲得的重組表達的畢赤酵母載體pPICZαA-chIL-2-HN,電擊轉化入畢赤酵母菌X-33感受態細胞中,高抗性篩選和PCR鑒定,獲得表達重組融合蛋白的基因畢赤酵母X-33菌株;
(d)將步驟(c)獲得的表達重組融合蛋白的基因工程酵母X-33菌株,在適宜的培養條件下培養,分離培養液上清,獲得重組融合蛋白。
10.如權利要求9所述重組融合蛋白在雞新城疫預防和治療中的應用。
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