[發明專利]地榆皂苷Ⅰ的含量測定方法

有效

• 申請號: 201010170728.0
• 申請日: 2010-04-30
• 公開（公告）號: CN101810705A
• 公開（公告）日: 2010-08-25
• 發明（設計）人: 姬建新;黎秀麗;劉志勇;白紅艷;鄒文俊;王軍;姚華
• 申請（專利權）人: 成都地奧集團天府藥業股份有限公司
• 主分類號: A61K36/739
• 分類號: A61K36/739;A61P7/00;G01N30/02;A61K125/00
• 代理公司: 北京邦信陽專利商標代理有限公司 11012
• 代理人: 黃澤雄;劉東方

技術領域

本發明涉及一種中藥地榆藥材及其提取物和制劑中地榆皂苷I的含量測定方法，屬于中藥技術領域。?

背景技術

中藥地榆為薔薇科植物地榆Sanguisorba?officinalis?L.或長葉地榆Sanguisorba?officinalis?L.var.longifolia(Bert.)Yüet?Li的干燥根。?

中國藥典2005版收載該品種，其中記載了鞣質的含量測定方法，具體含量測定項下內容為：“取本品粉末(過四號篩)約0.4g，精密稱定，照鞣質含量測定法(附錄XB)測定，即得。按干燥品計算，不得少于10.0％。”。?

中華人民共和國國家藥品監督管理局WS-11020(ZD-1020)-2002地榆升白片標準(試行)記載了地榆升白片中的沒食子酸的含量的測定方法：“照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相；甲醇-乙腈-0.05mol/L磷酸溶液(5∶6∶89)為流動相；檢測波長為270nm。理論塔板數按沒食子酸峰計算應不低于6000。對照品溶液的制備精密稱取沒食子酸對照品適量，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細，取適量(約相當于10片的重量)，精密稱定，精密加入50％甲醇25ml，稱定重量，加熱回流1小時，放冷至室溫，再稱定重量，用50％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5μl～10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每片含地榆以沒食子酸(C₇H₅O₅)計，不得少于24μg。”以上標準分別公開了地榆藥?材及地榆制劑——地榆升白片中鞣質和沒食子酸的含量測定。?

而地榆藥材應用廣泛、適應癥較多，而不同的適應癥其所發揮作用的有效成分也是不同的，特別是針對地榆在升高白細胞水平的適應癥方面，僅通過檢測地榆制劑中的鞣質或沒食子酸來判定制劑的是否合格是不適宜的，原因為現有研究已證明：地榆皂苷是地榆發揮升高白細胞作用的活性成分，特別是地榆皂苷I，而鞣質和沒食子酸并不起升高白細胞水平的主要作用【高小平等，地榆促造血作用的有效部位篩選.中國天然藥物，2006(2)：137-140；成都地奧制藥集團有限公司.地榆總皂苷提取物及其制備方法和用途[P].中國專利：200310119248.1，2004-11-25；成都地奧制藥集團有限公司.烏索烷型三萜皂苷在制備升高白細胞和/或血小板藥物中的應用[P].中國專利：03135776.8，20030908ZL03135776.8】，因此，通過檢測地榆制劑中地榆皂苷I的含量則更為合理，也更能反應產品的質量。然而實踐中發現，現有的鞣質和/或沒食子酸含量的檢測方法并不適于地榆皂苷I的檢測。?

鄒盛勤等公開了地榆中的烏索酸和齊墩果酸含量的高效液相色譜測定法【鄒盛勤，陳武.地榆中烏索酸和齊墩果酸含量的高效液相色譜測定，時珍國醫國藥，2006，17(8)：1373～1374】；解軍波等公開了用HPLC-ELSD法四季青中3種三萜及其皂苷，包括地榆皂苷I的含量測定方法【解軍波，畢志明，李萍.HPLC-ELSD法測定四季青中三萜及其皂苷的含量】，雖然四季青中也含有地榆皂苷I，但是由于四季青與地榆為不同的植物，除地榆皂苷I外，二者含有的其他化學成分不同，因此適用于四季青中地榆皂苷I的含量測定方法并不適用于地榆藥材、地榆提取物或地榆制劑中地榆皂苷I的含量測定；沙明等公開了地榆皂苷類成分、黃酮類成分的HPLC指紋圖譜，其中地榆皂苷類成分的HPLC色譜條件為：色譜柱：Shim-pack?CLC?ODS柱(6.0mm×150mm，5μm)，流動相：乙腈-水(30∶70)檢測波長：206nm，流速：1.0ml/min，柱溫：25℃。【沙明，張東方，孟憲生等.DNA指紋譜與HPLC指紋譜對中藥地榆質量評價研究，中國藥學雜志，2002，37(11)：815～818】，但使用該方法出峰時間過長(20min)，分析效率較低，且不能將地榆皂苷I與其結構相近的皂苷類成分有效的?分離。以上報道的分析方法均存在出峰時間長達20min，分析效率較低，且不能將地榆皂苷I與其結構相近的皂苷類成分有效分離的技術缺陷?

因此，到目前為止，國內外尚無能夠快速、準確測定地榆藥材及其提取物或制劑中地榆皂苷I含量的方法。?

發明內容