[發明專利]地榆皂苷Ⅰ的含量測定方法

有效

• 申請號: 201010170728.0
• 申請日: 2010-04-30
• 公開（公告）號: CN101810705A
• 公開（公告）日: 2010-08-25
• 發明（設計）人: 姬建新;黎秀麗;劉志勇;白紅艷;鄒文俊;王軍;姚華
• 申請（專利權）人: 成都地奧集團天府藥業股份有限公司
• 主分類號: A61K36/739
• 分類號: A61K36/739;A61P7/00;G01N30/02;A61K125/00
• 代理公司: 北京邦信陽專利商標代理有限公司 11012
• 代理人: 黃澤雄;劉東方

1.一種地榆藥材、地榆總苷提取物或地榆制劑中地榆皂苷Ⅰ的含量測定方法，其特征在于，所述方法包括：

1）分別取地榆皂苷I的標準品和含有地榆皂苷I的供試品溶于乙醇水溶液中，分別制成標準溶液和供試品溶液；

2）分別取等體積的標準溶液和供試品溶液注入高效液相色譜儀中，然后測量標準品溶液和供試品溶液的峰面積并進行計算，即得供試品中的地榆皂苷I的含量；

其中，所述高效液相色譜儀的固定相為碳十八烷基鍵合硅膠,?所述碳十八烷基鍵合硅膠的粒徑為≤5μm；流動相為甲醇-水溶液，所述甲醇－水的溶液為：以體積百分比計，60%~80%甲醇的水溶液的梯度溶液、或64％甲醇的水溶液的等度溶液。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的碳十八烷基鍵合硅膠的粒徑為5μm、4μm或3.5μm。

3．根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度溶液為：以體積百分比計，0~17min?60%→70%甲醇的水溶液、17~25min?70%→80%甲醇的水溶液、25~35min?80%甲醇的水溶液；或

0~7min?60%→64%甲醇的水溶液、7~12min?64%→66%甲醇的水溶液、12~17min?66%→80%甲醇的水溶液，17~25min?80%甲醇的水溶液；或

0~7min?60%→64%甲醇的水溶液、7~15min?64%甲醇的水溶液、15~20min?64%→80%甲醇的水溶液、20~25min?80%甲醇的水溶液；或

0~7min?60%→64%甲醇的水溶液，7~12min?64%甲醇的水溶液，12~20min?64%→80%甲醇的水溶液，20~27min?80%甲醇的水溶液；或

0~7min?60%→64%甲醇的水溶液，7~13min?64%甲醇的水溶液。

4．根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙醇的水溶液為以體積計50%-60%乙醇的水溶液。

5．地榆藥材中地榆皂苷Ⅰ的含量測定方法，其特征在于，所述方法包括：

1）供試品溶液的制備：取地榆藥材，粉碎，過四號篩，約0.4g，精密稱定，置100ml量瓶中,加入60%乙醇的水溶液80ml,搖勻,超聲15min,放至室溫,定容至刻度，搖勻，濾過，取續濾液進樣分析或離心取上清液即得；

對照品溶液的制備：取地榆皂苷Ⅰ對照品約50mg，精密稱定，置50ml量瓶中,加60%乙醇的水溶解并定容至刻度，搖勻；分別精密量取5.00ml和25.00ml至50ml量瓶中,加60%乙醇的水溶液稀釋定容至刻度,搖勻即制成每1ml含0.1mg和0.5mg的對照品溶液；

2）含量測定：分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液10μl，注入高效液相色譜儀，測定對照品溶液及供試品溶液的峰面積，將峰面積積分值及濃度分別取常用對數后，按外標兩點法計算地榆皂苷Ⅰ的含量；

其中，高效液相色譜以碳十八烷基鍵合硅膠為固定相，粒徑小于或等于5μm，流動相為甲醇與水體積為64%：36%的等度洗脫液或甲醇體積濃度為60-64%的甲醇水混合溶液的梯度洗脫液，洗脫程序為0~7min?60%→64%甲醇的水溶液，7~13min?64%甲醇的水溶液，流速0.8?ml/min，柱溫25℃，ELSD漂移管溫度為80℃，氣體流速2.5L/min，不分流模式，理論塔板數按地榆皂苷Ⅰ計算應不低于4×10³。

6．地榆片劑中地榆皂苷Ⅰ的含量測定方法，其特征在于，所述方法包括：

1）供試品溶液的制備：取地榆升白片20片，精密稱定，研細，精密稱取相當于2mg地榆皂苷Ⅰ的量，置150ml具塞錐形瓶中，準確加入50%乙醇的水溶液20ml，搖勻，稱重，超聲10min，放至室溫，用50%乙醇的水溶液補足減失的重量，搖勻，離心取上清液即得；

對照品溶液的制備：取在105℃干燥至恒重的地榆皂苷Ⅰ對照品適量，加50%乙醇的水溶液溶解并定容制成每1ml含0.05mg和0.2mg的對照品溶液；

2）含量測定：分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液20μl，注入高校液相色譜儀，測定對照品溶液及供試品溶液的峰面積，將峰面積積分值及濃度分別取常用對數后，按外標兩點法計算地榆皂苷Ⅰ的含量；

其中，高效液相色譜儀，用粒徑小于或等于5μm的碳十八烷基鍵合硅膠為固定相，以甲醇-水體積比為64：36的混合溶液為等度洗脫液，或以甲醇體積濃度為60-64%的甲醇-水混合溶劑梯度洗脫，洗脫程序為0~7min?60%→64%甲醇的水溶液，7~13min?64%甲醇的水溶液，流速1.0?ml/min，柱溫25℃，ELSD漂移管溫度為85℃，空氣流速2.8L/min，不分流模式，理論塔板數按地榆皂苷Ⅰ計算應不低于4×10³。